Metode suplimentare de testare a sângelui pentru determinarea hematocritului reticulocitelor. Reticulocite. Test de sange. Test de sange

Metode suplimentare de testare a sângelui pentru determinarea hematocritului reticulocitelor. Reticulocite. Test de sange. Test de sange

05.03.2020

1. Numărarea numărului de reticulocite dintr-un frotiu după colorarea lor cu coloranți speciali.

2. Numărarea numărului de reticulocite folosind microscopia fluorescentă.

3. Numărarea automată a numărului de reticulocite folosind un analizor de hematologie.

În majoritatea laboratoarelor domestice, reticulocitele sunt numărate într-un frotiu după colorarea lor cu coloranți speciali. Această metodă este simplă, economică, nu necesită echipamente speciale scumpe și, prin urmare, poate fi utilizată în orice laborator de diagnostic clinic.

A doua și a treia metodă de numărare a reticulocitelor sunt, de asemenea, destul de simple, dar mult mai scumpe din punct de vedere economic - necesită echipamente scumpe (microscop fluorescent și analizor hematologic care numără reticulocitele) și reactivi și, prin urmare, pot fi utilizate doar în unele laboratoare .

Determinarea numărului de reticulocite se realizează prin microscopia frotiurilor special colorate.

O metodă standardizată de numărare a numărului de reticulocite după colorarea lor cu albastru crezil strălucitor, azur I sau azur II direct pe sticlă sau într-o eprubetă (1972).

Principiu. Colorarea supravitală cu coloranți care dezvăluie substanța granulo-filamentoasă a reticulocitelor.

Reactivi. Se poate utiliza unul dintre următorii coloranți.

1. Soluție saturată de albastru crezil strălucitor în alcool absolut (pentru a prepara alcool absolut, este necesar să reziste la 96% etanol în mai multe modificări de pulbere de sulfat de cupru calcinat). Pentru 100 ml alcool absolut, luați 1,2 g de vopsea.

2. O soluție de azur I, propusă de P. N. Korikov: azur 1 - 1 g, oxalat de amoniu - 0,4 g, clorură de sodiu - 0,8 g, alcool etilic 96% 10 ml, apă distilată - 90 ml. O soluție de vopsea într-o sticlă închisă este plasată într-un termostat la 37 ° C timp de 2-3 zile și se agită periodic energic. Apoi răcit la temperatura camerei și filtrat printr-un filtru de hârtie. Soluția este păstrată într-un recipient din sticlă întunecată. Dacă apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou.

3. O soluție de azur II din următoarea compoziție: azur II 1 g, citrat de sodiu 5 g, clorură de sodiu 0,4 g, apă distilată 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, amestecând ocazional. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită la foc mic timp de 15-20 de minute, fără a fierbe. Se răcește la temperatura camerei și se filtrează). A se păstra într-un recipient din sticlă întunecată.

Echipament special. Microscop.

Progresul determinării.

Pictură pe sticlă.

O lamelă de sticlă bine spălată și degresată este încălzită pe flacăra arzătorului. O picătură dintr-unul dintre coloranți este aplicată pe sticlă cu o tijă de sticlă, iar o frotiu de vopsea este pregătit cu sticlă lustruită. Partea sticlei, pe care se aplică pata de vopsea, este marcată cu un recorder de sticlă. În această formă, sticla poate fi pregătită pentru utilizare viitoare și depozitată într-un loc uscat și întunecat. O picătură de sânge se aplică pe un frotiu de vopsea, se prepară un frotiu subțire din acesta și se pune imediat într-o cameră umedă timp de 3-4 minute (puteți folosi o cutie Petri cu suluri de vată umezită sau hârtie de filtru așezată de-a lungul margini). Apoi frotiurile sunt uscate la aer.

În frotiurile astfel preparate, eritrocitele sunt vopsite într-o culoare gălbuie-verzuie, substanța granulo-filamentoasă în albastru.

Colorarea in vitro.

Metoda 1: înainte de utilizare, preparați într-o eprubetă o soluție de lucru de albastru crezil strălucitor la o rată de soluție de 1% oxalat de potasiu 4 picături de soluție de vopsea 1. Adăugați 0,04 ml de sânge în vopsea (două pipete până la semnul 0,02) . Amestecul se amestecă bine, dar cu atenție și se lasă 30 de minute. Se amestecă și se prepară lovituri subțiri.

Metoda 2: 0,05 ml de soluție de vopsea 3 și 0,2 ml de sânge sunt plasate într-o eprubetă. Amestecul se amestecă bine și se lasă 20-30 de minute. Se amestecă și se prepară lovituri subțiri.

Metoda 3: 0,3-0,5 ml soluție de vopsea 2 și 5-6 picături de sânge sunt plasate într-o eprubetă cu o pipetă din aparatul Panchenkov. Eprubeta este acoperită cu un dop de cauciuc, amestecul este bine amestecat, dar atent lăsat timp de 1-2 ore (reticulocitele se colorează mai bine cu o expunere de 2-3 ore). Se amestecă și se prepară lovituri subțiri.

Numărarea reticulocitelor.

În frotiuri, eritrocitele sunt vopsite într-o culoare gălbuie-verzuie, o substanță granulo-filamentoasă într-o culoare albastră sau albastru-violet.

Frotiurile preparate prin una dintre metodele de mai sus sunt microscopate cu un obiectiv de imersiune. Este necesar să se numere cel puțin 1000 de eritrocite și să se noteze printre acestea numărul de eritrocite care conțin o substanță granulo-filamentoasă. În practică, pentru o precizie mai mare, utilizează un ocular special, în care câmpul vizual poate fi redus la dimensiunea necesară. Cu frotiuri subțiri uniforme, în care eritrocitele sunt situate într-un rând, este selectat un câmp vizual în care există, de exemplu, 50 de eritrocite și apoi sunt calculate 20 de astfel de câmpuri vizuale. În absența unui ocular gata preparat, acesta poate fi ușor pregătit, pentru care ocularul 10X este deșurubat, o bucată de hârtie cu un mic pătrat decupat este pusă în el și înșurubată. Numărul de reticulocite numărat este exprimat la 1000 sau la 100 de eritrocite.

Numărarea numărului de reticulocite folosind microscopia fluorescentă.

Principiu. Utilizarea abilității substanței reticulocitelor de a fluoresc după tratamentul sângelui cu acridină portocalie.

Reactivi.

1. O soluție de portocală acridină în soluție izotonică de clorură de sodiu și o concentrație de 1: 5000. Pentru a prepara o soluție izotonică, se recomandă utilizarea apei distilate cu pH 5,8-6,8. Soluția de portocală acridină trebuie să fie proaspătă; depozitați-l timp de cel mult 3-5 zile într-o sticlă întunecată, cu dop la sol.

2. Ulei de imersie non-fluorescent. Și se poate utiliza afluol sau ulei de imersiune obișnuit cu fluorescență stinsă cu nitrobenzen (0,3 ml nitrobenzen per ml ulei). Yu. N. Zubzhitskiy propune utilizarea anisolului distilat ca ulei non-fluorescent. Echipament special. Microscop ultraviolet MUF-3M sau fluorescent.

Progresul determinării. Sângele este amestecat cu portocală acridină într-o eprubetă sau într-un mixer într-un raport de 1 parte de sânge și 10 părți de vopsea (amestecul poate fi păstrat cel mult 5 ore). Amestecul este agitat timp de 2 minute, o picătură de amestec se aplică pe o lamă de sticlă și se acoperă cu o sticlă de acoperire. Microscopie cu filtru de lumină ZhS-17. În preparat, eritrocitele nu fluoresc, iar în reticulocite, substanța granulo-filamentoasă strălucește cu o culoare roșie aprinsă. S-a observat că fluorescența reticulocitelor nu a fost observată în sângele stabilizat cu heparină sau citrat de sodiu. Metoda este simplă și durează puțin; datorită strălucirii strălucitoare, reticulocitele sunt ușor de numărat. Valorile normale. La persoanele sănătoase, numărul de reticulocite este de 2-12 ppm, sau 0,2-1,2%.

Semnificația clinică.

Numărul de reticulocite din sânge reflectă proprietățile regenerative ale măduvei osoase, iar evaluarea sa este utilizată pe scară largă pentru diferite anemii (vezi Tabelul 24). O creștere a numărului de retpculocite se observă după pierderea de sânge, cu anemii hemolitice, în special în timpul unei crize (numărul de reticulocite poate fi de 20-30%), precum și pe fondul tratamentului anemiei Addison Birmer cu vitamina B12 ( criză reticulocitară - o creștere a numărului de reticulocite în tratamentul de 4-8 zile). O scădere a numărului de reticulocite este caracteristică anemiei hipoplazice, recurența anemiei Addison-Birmer. Determinarea numărului de reticulocite poate fi utilizată pentru a determina producția de eritropoieză și pentru a calcula durata de viață a eritrocitelor.

ETAPE DE BAZĂ A SCHIMBULUI DE FIER (TRANSPORT ȘI DEPOZIT).

Transportul fierului

Transferrin

  • Proteine \u200b\u200bde transport (b-1-globulină), glicoproteină,
  • Transferă Fe din tractul gastro-intestinal în eritrocariocite și în depozitele de țesuturi (ficat etc.).
  • Nivel normal: 2,6 ± 0,05 g / l.
  • Saturația fierului transferrin: 30-75%.
  • Intră în celulă prin endocitoză: captarea complexului Fe-transferrin de către celulă.

Recenziile postate pe acest site sunt opiniile personale ale persoanelor care le-au scris. Nu vă auto-medicați!

Reticulocite (semnificație clinică și diagnostic de laborator)

(1) reticulocite cu un nucleu (eritronormoblaste), iar granularitatea lor este localizată sub forma unei corole dense în jurul nucleului;

(2) reticulocite care au o substanță granular-reticulară sub formă de bilă sau bucată;

(3) reticulocite cu granularitate densă asemănătoare rețelei;

(4) reticulocite având o substanță cu plasă granulară sub formă de filamente separate;

(5) reticulocite care conțin semințe simple.

În cazul anemiilor hemolitice (numărul de reticulocite poate ajunge la 60% sau mai mult (în special în creștere puternică în crizele hemolitice);

În cazul pierderii acute de sânge (la 3 - 5 zile după pierderea de sânge, apare o criză reticulocitară), inclusiv o creștere a reticulocitelor, permite suspectarea sângerării latente (de exemplu, la pacienții cu ulcer peptic al tractului gastro-intestinal, febra tifoidă);

În tratamentul anemiilor cu deficit de fier cu fier (la câteva zile (3 - 10) după începerea tratamentului antianemic al anemiei pernicioase);

Cu o lipsă acută de oxigen;

Cu metastaze tumorale în măduva osoasă.

Formă anormală de hemoglobină;

Cu anemii aplastice și hipoplazice sunt generatoare;

Cu anemie cauzată de lipsa fierului, a vitaminei B12, a acidului folic (anemii microcitico-hipocrome și megaloblastice);

Cu anemie sideroblastică;

Cu metastaze de cancer până la os;

Cu boala de radiații și radioterapie;

Când este tratat cu citostatice;

Cu boli autoimune ale sistemului hematopoietic;

Cu boli de rinichi;

Cu recidiva anemiei Addison-Birmer;

Alegerea greșită a anticoagulantului sau amestecarea insuficientă a sângelui cu anticoagulantul;

Strângerea prelungită a mâinii cu un garou;

Recepția sulfonamidelor (sunt posibile atât rezultate subestimate, cât și supraestimate);

Transfuzie de sânge cu puțin timp înainte de studiu;

Hemoliza unei probe de sânge.

Evaluarea activității eritropoiezei în condiții însoțite de hemoliză sau pierderi de sânge;

Evaluarea capacității măduvei osoase de a se regenera după terapia citotoxică și transplantul de măduvă osoasă;

Evaluarea restaurării sintezei eritropoietinei după transplant renal;

Controlul dopajului la sportivi (administrarea de eritropoietină);

Diagnosticul hematopoiezei ineficiente sau a scăderii producției de eritrocite;

Diagnosticul diferențial al anemiei;

Detectarea încălcărilor capacității regenerative a măduvei osoase cu un deficit de fier, vitamine B12, B6, folati, cupru și monitorizarea terapiei adecvate;

Evaluarea răspunsului la terapia cu eritropoietină, eritro-supresoare.

Reticulocite cu un conținut redus de ARN, cele mai mature (LFR%, fracțiuni reduse de reticulocite cu fluorescență, fracție de reticulocite cu fluorescență redusă);

Reticulocite cu un conținut mediu de ARN (MFR%, fracțiuni de reticulocite cu fluorescență medie) - o fracțiune de reticulocite cu o fluorescență medie);

Reticulocite cu conținut ridicat de ARN (HFR%, fracțiuni de reticulocite cu fluorescență ridicată) - fracție de reticulocite cu fluorescență ridicată);

Fracțiunea reticulocitelor imature (IRF%, Fracția reticulocitelor imature).

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după colorarea lor cu coloranți speciali

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după colorarea lor cu coloranți speciali este în practică cea mai utilizată metodă de numărare a numărului de reticulocite. Acest lucru se datorează faptului că metoda este simplă, destul de ieftină și nu necesită echipamente speciale scumpe și, prin urmare, poate fi utilizată în orice laborator de diagnostic clinic.

Principiul metodei

Descoperirea substanței granular-reticulare a reticulocitelor în colorarea supravitală cu vopsele alcaline cu numărarea lor ulterioară într-un frotiu de sânge.

Reactivi

Se poate utiliza unul dintre următorii coloranți:

  1. Soluție saturată de albastru crezil strălucitor în alcool absolut (pentru a prepara alcool absolut, este necesar să reziste la 96% etanol în mai multe modificări de pulbere de sulfat de cupru calcinat). Pentru 100 ml alcool absolut, luați 1,2 g de vopsea.
  2. Soluție Azur I: azur I - 1 g, oxalat de amoniu - 0,4 g, clorură de sodiu - 0,8 g, alcool etilic 96% - 10 ml, apă distilată - 90 ml. Soluția de vopsea într-o sticlă închisă este plasată într-un termostat la 37 ° C timp de 2-3 zile și se agită periodic energic. Apoi răcit la temperatura camerei și filtrat printr-un filtru de hârtie. Soluția este păstrată într-un recipient din sticlă întunecată. Dacă apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou.
  3. Soluție Azur II: azure II - 1 g, citrat de sodiu - 5 g, clorură de sodiu - 0,4 g, apă distilată - 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, amestecând ocazional. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită la foc mic timp de 15 - 20 de minute, fără a fierbe. Se răcește la temperatura camerei și se filtrează. A se păstra într-un recipient din sticlă întunecată.

Echipament special

Progresul determinării

Colorarea reticulocitelor se efectuează fie pe sticlă, fie într-o eprubetă.

Colorarea reticulocitelor pe sticlă

La colorarea reticulocitelor pe sticlă, o lamă de sticlă bine spălată și degresată este încălzită pe flacăra arzătorului. O picătură dintr-unul dintre coloranții de mai sus se aplică pe sticlă cu o tijă de sticlă, iar o frotiu de vopsea se prepară cu sticlă lustruită. Partea sticlei pe care a fost aplicat frotiul de vopsea este marcată cu o imprimantă de sticlă. În această formă, sticla poate fi pregătită pentru utilizare viitoare și depozitată într-un loc uscat și întunecat. O cameră umedă este pregătită înainte de analiză. De obicei, folosesc o cutie Petri cu suluri de vată umezită sau hârtie de filtru așezată de-a lungul marginilor. O picătură de sânge se aplică pe un frotiu de vopsea, se prepară un frotiu subțire din acesta și se pune imediat într-o cameră umedă timp de 3-10 minute. Apoi frotiurile sunt uscate la aer.

Colorarea in vitro a reticulocitelor

Colorarea reticulocitelor in vitro diferă prin utilizarea diferiților coloranți.

Metoda 1 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu albastru crezil strălucitor.

Înainte de utilizare, o soluție de lucru de albastru crezil strălucitor este preparată într-o eprubetă, pe baza unei picături de soluție de 1% oxalat de potasiu, 4 picături dintr-o soluție de vopsea strălucitoare de albastru crezil. Adăugați 0,04 ml de sânge în vopsea (două pipete până la semnul 0,02). Amestecul se amestecă bine, dar ușor și se lasă timp de 30 de minute. Apoi amestecați din nou și pregătiți frotiuri subțiri.

Metoda 2 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu azur II.

0,05 ml soluție de vopsea Azur II și 0,2 ml sânge sunt plasate într-o eprubetă. Amestecul se amestecă bine și se lasă timp de 20 până la 30 de minute. Se amestecă din nou și se pregătesc lovituri subțiri.

Metoda 3 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu azur I.

0,3 - 0,5 ml dintr-o soluție de vopsea azur I și 5 - 6 picături de sânge sunt plasate într-o eprubetă cu o pipetă din aparatul Panchenkov. Eprubeta este închisă cu un dop de cauciuc, amestecul este amestecat bine, dar cu atenție și lăsat timp de 1 - 1,5 ore (reticulocitele se colorează mai bine atunci când sunt expuse timp de 1,5 - 3 ore). Se amestecă și se prepară lovituri subțiri.

Vopsele de reticulocite prefabricate sunt acum disponibile comercial. Colorarea reticulocitelor cu ajutorul lor se efectuează conform instrucțiunilor atașate.

Numărarea reticulocitelor.

Frotiurile preparate prin una dintre metodele de mai sus sunt microscopate cu un obiectiv de imersiune. În frotiu, reticulocitele și eritrocitele sunt colorate gălbuie-verzuie, substanța granulo-filamentoasă din reticulocite este albastră (când este colorată cu azur II și albastru crezil strălucitor) sau albastru-violet (când este colorată cu azur I).

Fotografii ale reticulocitelor:

Găsiți câmpul vizual, unde celulele roșii din sânge sunt situate separat. În aceste câmpuri vizuale, este necesar să se numere cel puțin 1000 de eritrocite și să se noteze printre ele numărul de eritrocite care conțin o substanță granulo-filamentoasă. Se obține o precizie mai mare la numărarea 2000 - 3000 eritrocite.

Datorită faptului că există un număr mare de celule roșii din sânge în câmpul vizual, ceea ce face dificilă numărarea, este necesar să se limiteze (să se reducă) câmpul vizual. Pentru a face acest lucru, puteți utiliza fie un ocular special, în care puteți reduce câmpul vizual la dimensiunea necesară, fie puteți utiliza o „fereastră” specială (un cerc cu un diametru puțin mai mic decât ocularul este decupat din hârtie, un mic diamant este decupat în centrul cercului și fereastra rezultată este introdusă în ocular).

Numărul de reticulocite numărate este exprimat la 100 (procent) sau 1000 (la mie) eritrocite.

Exemplu: Când 1000 de eritrocite au fost numărate într-un frotiu, s-a dezvăluit că 15 din 1000 de eritrocite au o substanță granular-reticulară de un grad sau altul, adică sunt reticulocite. Prin urmare, numărul de reticulocite în acest caz este de 1,5% sau 15 ‰.

Literatură:

  • Manual „Metode de cercetare de laborator în clinică” editat de V. V. Menshikov - Moscova, „Medicină”, 1987
  • Lyubina A. Ya., Ilyicheva L. P. și colab. - "Cercetări clinice de laborator" - Moscova, "Medicină", \u200b\u200b1984

Numărarea numărului de reticulocite folosind microscopia fluorescentă

Metoda de numărare a numărului de reticulocite folosind microscopia cu luminiscență este simplă și necesită puțin timp, mai precisă decât metoda obișnuită, deoarece microscopia cu luminescență relevă cele mai mici granule de plasă filamentoasă.

Reticulocite

Reticulocitele sunt eritrocite tinere formate după pierderea nucleelor \u200b\u200bde către normoblaste. O trăsătură caracteristică a reticulocitelor este prezența în citoplasma lor a unei substanțe granulo-filamentoase (reticul), reprezentând ribozomi și mitocondrii agregate.

Incluziuni patologice în eritrocite

Corpurile mici ale lui Jolly (corpurile lui Howell-Jolly) sunt mici incluziuni rotunde de culoare roșu violet, cu o dimensiune de µm, se găsesc în 1 (mai rar 2 - 3) într-un eritrocit. Ele reprezintă restul miezului după eliminarea RES. Acestea sunt detectate în timpul hemolizei intense și al „supraîncărcării” RES, după splenectomie și în anemia megaloblastică.

Studiu citochimic al lipidelor

Studiul citochimic al lipidelor se bazează pe utilizarea coloranților care se dizolvă în grăsimi (Sudan III, Sudan IV, Sudan negru etc.). Pentru a identifica grăsimea neutră, se folosește Sudan III, care colorează grăsimea portocalie. Lipoidele sunt mai bine detectate de Sudanul negru (colorare neagră).

Analiza urinei conform Nechiporenko

Metoda Nechiporenko în diagnosticul de laborator intern este cea mai comună metodă pentru determinarea cantitativă a elementelor formate în urină. Această metodă este cea mai simplă, accesibilă oricărui laborator și convenabilă în practica ambulatorie și are, de asemenea, o serie de avantaje față de alte metode cantitative cunoscute pentru studierea sedimentelor de urină. Conform metodei Nechiporenko, se determină numărul de elemente formate (eritrocite, leucocite și cilindri) în 1 ml de urină.

© 18 Diagnostice de laborator

Ce este un reticulocit într-un test de sânge? Indicatori ai normei și desemnării

Un reticulocit este un precursor al unui eritrocit, adică este un eritrocit într-o formă tânără. În sângele unei persoane sănătoase, conținutul lor este de 0,2-1,2%. Acest raport reflectă conținutul de reticulocite din sânge față de eritrocite. Se coc 4-5 zile.

Noțiuni de bază

O trăsătură caracteristică a formelor tinere de eritrocite este prezența unei substanțe granulo-filamentoase în citoplasmă, care este ribozomii și mitocondriile agregate. Această substanță poate fi identificată folosind o metodă specială de colorare a frotiurilor de sânge. Această culoare a reticulocitelor se numește supravital, adică este produsă fără fixarea prealabilă a celulelor.

Grupuri de reticulocite

În total, experții disting cinci grupuri principale de reticulocite. Se diferențiază prin rețeaua reticulară. Densitatea și vârsta acesteia sunt în proporție inversă: cu cât este mai densă ochiul, cu atât sunt mai tinere. Să ne dăm seama care este cel mai tânăr reticulocit.

Aceasta este o celulă care are o plasă sub forma unei bile dense. Aceste celule aparțin primului grup. Reticulocitele mai mature apar ca o substanță care are o plasă clar vizibilă. În grupele a patra și a cincea, este reprezentat de fire separate și boabe. Cel mai adesea, sângele oamenilor sănătoși conține reticulocite ale acestor din urmă grupuri, adică altele mai mature. De regulă, ele reprezintă aproximativ 80% din rest. Cu o regenerare îmbunătățită, care este caracteristică unor patologii, crește numărul de reticulocite din primele trei grupuri. Aceste patologii includ:

Criza reticulocitică care însoțește anemia cu deficit de B12.

Funcții îndeplinite de reticulocite

Un reticulocit este, de asemenea, un eritrocit. Are aceeași funcție ca și eritrocitele. Adică, celulele transferă, de asemenea, molecule de oxigen în diferite țesuturi și organe, dar eficiența acestui proces este mult mai mică decât atunci când oxigenul este transferat de eritrocitele mature. Reticulocitele pot adsorbi moleculele de fier, care sunt conținute în hemoglobină. Acest lucru este posibil datorită receptorilor receptivi la transferină. De ce se efectuează numărarea reticulocitelor? Mai multe despre asta mai târziu.

Mecanism de prelevare a sângelui

Se ia o probă de sânge pentru a determina acest indicator ca parte a unei analize generale. Dacă este necesar să se determine nivelul reticulocitelor, atunci medicul care a ordonat analiza indică în direcția nevoii de numărare suplimentară.

Această analiză nu necesită o pregătire specială, dar în mod tradițional se face pe stomacul gol dimineața. În același timp, dacă este nevoie, atunci acesta poate fi returnat în orice moment al zilei. Sângele pentru analiză trebuie luat dintr-un deget, studiul său se efectuează în laborator, în secția de hematologie.

Numărarea numărului de reticulocite se efectuează într-un frotiu colorat supravital. Se folosește o metodă microscopică, adică numărul lor este pur și simplu numărat prin plasarea unei probe de sânge la microscop. Astăzi există o metodă de numărare hardware. Este folosit de laboratoarele moderne.

Desemnarea reticulocitelor în testul de sânge este RET.

Analiză

Există mai multe metode pentru efectuarea unor astfel de cercetări:

  • Paharul este spălat, uscat și încălzit folosind un arzător special. Apoi, i se aplică unul din cei trei coloranți, apoi se adaugă o picătură de sânge, după care se face un frotiu subțire. Paharul este plasat într-o cutie Petri sau într-o altă cameră pentru o anumită perioadă de timp, apoi este uscat în aer proaspăt.
  • Dacă se folosește o eprubetă, atunci se pune un agent de colorare în ea și se adaugă acolo o picătură de sânge. Amestecul trebuie agitat. Timp de așteptare - de la 20 de minute la 3 ore, depinde de reactivul utilizat. Apoi, lichidul din eprubetă se amestecă din nou, se scot frotii din el.

Este dificil de spus care metodă determină cele mai precise rezultate. Amândoi sunt buni în felul lor, dar medicul poate considera necesar să efectueze analiza într-un anumit mod, apoi ar trebui să o indice în direcție.

Indicatori

La calcularea nivelului de reticulocite, diferențele de gen în normă sunt semnificative numai după 12 ani. Până la această vârstă, norma la copiii ambelor sexe este aceeași. La vârsta de aproximativ vârsta, fetele încep menstruația, care sunt obișnuite. Ca urmare a pierderii lunare de sânge, gama fluctuațiilor celulelor eritroide se extinde.

1. La nou-născuți, norma este cuprinsă între 0,15 și 1,5%.

2. La copiii cu vârsta de două săptămâni - de la 0,45 la 2,0%.

3. La copiii cu vârsta cuprinsă între o lună și două luni - de la 0,25 la 0,95%.

4. La copiii cu vârsta de șase luni - de la 0,2 la 1,0%.

5. Pentru copii cu vârsta de doi până la șase ani - de la 0,25 la 0,75%.

6. La copiii cu vârsta cuprinsă între șase și doisprezece ani - de la 0,25 la 1,3%.

7. Pentru bărbații cu vârsta peste doisprezece ani - de la 0,25 la 1,7%.

8. Pentru femeile cu vârsta peste doisprezece ani - de la 0,12 la 2,1%.

Ce înseamnă situația atunci când reticulocitele sunt crescute?

Creșterea numărului de reticulocite din sânge

Cu anemii de diferite etimologii, determinarea numărului de reticulocite joacă un rol special. Dacă conținutul lor este crescut în sânge, atunci această patologie se numește reticulocitoză. Dacă creșterea este însoțită de o creștere a nivelului de hemoglobină, atunci acest lucru indică faptul că măduva osoasă are o capacitate regenerativă bună. Acest lucru se poate întâmpla dacă sunt prezenți următorii factori:

Anemie hemolitică de diferite etimologii. Este o serie de boli caracterizate prin distrugerea celulelor roșii din sânge. Acest fenomen se numește hemoliză. În acest caz, conținutul de reticulocite din sânge poate ajunge la 60%. Dacă apare o criză hemolitică, această cifră se poate agrava.

Otravire cu hemotoxine care provoaca hemoliza. Hemotoxinele includ venin de viperă și unele medicamente care sunt utilizate pentru tratarea eritemiei. Toxinele malariei pot provoca, de asemenea, hemoliză.

Terapia cu levodopa pentru boala Parkinson.

Utilizarea pe termen lung a unor medicamente antiinflamatoare și antipiretice.

Terapia cu medicamentul „Eritropoietina” bolilor anemice.

Metastaze ale măduvei osoase.

Perioada de recuperare după radioterapie sau terapie chimică.

Reticulocitoza poate fi falsă sau adevărată.

De ce să fii testat pentru reticulocite? Această întrebare este adesea pusă.

Reticulocitoza falsă și adevărată

Adevărata reticulocitoză se caracterizează printr-o creștere a numărului de reticulocite tinere din sânge, care este însoțită de o creștere a numărului lor în măduva osoasă.

Reticulocitoza falsă se caracterizează printr-o creștere a numărului de reticulocite exclusiv în sângele periferic, în timp ce în măduva osoasă nivelul lor rămâne normal sau ușor coborât.

Performanță scăzută

Procesul de reducere a numărului de reticulocite este observat atunci când eritropoieza este inhibată. Apare ca urmare a influenței următorilor factori:

Utilizarea pe termen lung a sulfonamidelor.

Luarea anumitor medicamente, cum ar fi cloramfenicolul sau carbamazepina.

Boli infecțioase cronice.

Unele afecțiuni renale severe care afectează eritropoieza.

Mixedem sau altă disfuncție tiroidiană.

Tumori în măduva osoasă.

Am examinat ce este un reticulocit. Aceasta este o globulă roșie tânără din sângele uman.

Motivele creșterii reticulocitelor, cum se determină funcționalitatea sistemului hematopoietic?

Uneori, când se prescrie un examen clinic, în testul general de sânge, RTC sau RET pot fi desemnați separat - abrevieri care arată conținutul reticulocitelor. Sunt celule non-nucleare care preced celulele roșii din sânge (celule roșii din sânge) în timpul formării lor. Reticulocitele din testul de sânge, numărul și raportul lor cu eritrocitele reflectă starea și funcționalitatea de reproducere a măduvei osoase, precum și întregul sistem hematopoietic.

Certificat medical

Este posibil să se definească în detaliu ce sunt reticulocitele în acest fel: acestea sunt celule de formă rotundă sau stelată, care se formează în măduva osoasă și se transformă în eritrocite sub influența hormonului glicoproteic eritropoietină.

Culoarea reticulocitelor este de obicei roz cu o nuanță albastră. Trăsătura lor distinctivă de la forma ulterioară este prezența în structură a ARN-ului rezidual, mitocondriilor și a altor organite, care au forma unor formațiuni granulare și filamentoase, a căror pierdere indică transformarea într-o celulă matură.

Sarcinile funcționale ale reticulocitelor coincid cu eritrocitele - de a transporta oxigenul, dar cu o eficiență mult mai redusă datorită conținutului lor redus de hemoglobină. Acestea sunt concentrate în principal în măduva osoasă roșie, oasele plate și tubulare și numai celulele roșii mature intră în sânge. Dar o mică parte din reticulocitele imature este permisă și în fluxul sanguin periferic, ceea ce indică activarea procesului de producere a eritrocitelor (eritropoieză).

Procesul de hematopoieză

Eritropoieza începe cu transformarea eritroblastului, o celulă care conține un nucleu, dar nu are hemoglobină, într-un pronormblast. Mai mult, în rândul eritroidian, se formează un eritroblast bazofil, care are deja elementele de hemoglobinizare.

Deoarece progenitorii eritrocitelor acumulează substanțe care rețin oxigenul (hemoglobina), celula trece prin etapele normoblastului policromatofil și apoi oxifilic. În această perioadă, nucleul este încă păstrat, a cărui involuție duce la formarea unui eritrocit direct tânăr - un reticulocit, care are deja capacitatea de a reține și transporta oxigenul, dioxidul de carbon.

Globulele roșii tinere rămân la locul de formare până la 40 de ore, după care o mică parte din ele, sub influența eritropoietinei, intră în vasele de sânge, unde se mișcă liber timp de 1,5 sau 2 zile. În acest timp, celula își pierde reticulul (formațiuni filamentoase reziduale) și se transformă într-un eritrocit.

Etapele de dezvoltare ale reticulocitelor

În sânge, reticulocitele trec prin cinci etape de maturare ca involuție a reticulului:

  1. stadiul zero - când substanța bazofilă (substanță intracelulară reticulară) are forma unui nucleu, adică acumularea de granularitate arată ca un fel de corolă;
  2. prima etapă - substanța bazofilă (BS) capătă o structură reticulară sub forma unei bobine;
  3. a doua etapă - rețeaua granulară este distribuită uniform pe celulă;
  4. a treia etapă - BV arată ca fire separate;
  5. a patra etapă - BV se distribuie de-a lungul periferiei celulei sub formă de boabe mici.

Într-un organism sănătos, reticulocitele din sânge ar trebui să fie găsite numai în etapele III și IV de maturare (80%) și 0 - II - în exemplare unice. Dar moartea excesivă a eritrocitelor sau foametea oxigenului stimulează producția crescută de eritropoietină de către rinichi, ceea ce duce la eliberarea celulelor imature din toate etapele și chiar a normoblastelor în vase.

Test de sânge pentru reticulocite

Numărul de reticulocite într-un frotiu de sânge nu este necesar pentru examenul hematologic, ci se referă la o analiză clinică generală. Numai atunci când apar anumite suspiciuni, medicul face o desemnare specială în analiză.

Motive de cercetare

Motivele pentru care a fost testat cantitatea de RTC din sânge sunt verificarea funcționării măduvei osoase și a rinichilor pentru a produce celule sanguine și eritropoietină în astfel de cazuri:

  • cu suspiciune de anemie de diferite origini;
  • dacă este necesar, controlul terapiei medicamentoase pentru deficit de fier, vitamina B12 și acid folic;
  • pentru observare atunci când se iau medicamente care conțin eritropoietină, eritro-supresoare;
  • cu sângerări externe severe sau suspiciune de sângerare internă;
  • în legătură cu necesitatea de a lua medicamente care neutralizează toxinele ca urmare a mușcăturilor de insecte otrăvitoare sau șerpi;
  • pentru a controla producția de celule roșii din sânge în timpul transplantului de măduvă osoasă sau rinichi;
  • pentru definirea cancerului.

Ultimul punct este asociat cu caracteristicile metastazelor unor tumori canceroase din organele care formează sânge.

Metoda de detectare

În cazul pierderii nucleului, metodele de colorare numai cu coloranți acizi sunt aplicabile celulelor sanguine. Prin colorarea într-un frotiu de sânge sunt indicate elemente din seria eritroidă, care sunt apoi detectate cu ajutorul microscopiei cu lumină. Pentru a izola reticulocitele de masa totală a eritrocitelor, este necesar să se utilizeze preparate speciale care să schimbe culoarea structurii granulare a celulelor.

Procesul efectiv de detectare constă în amestecarea plasmei sanguine cu vopsea invazil diamant crezil albastru sau acridină portocalie (într-o eprubetă) sau pe sticlă în proporțiile: 1 parte de sânge la 10 părți de substanță.

Metodele pe sticlă și in vitro sunt fundamental diferite. În primul caz, frotiurile de sânge amestecate cu un colorant sunt scufundate într-un mediu umed timp de 10 minute, după care sunt uscate și celulele sunt numărate la microscop. În a doua variantă, compoziția amestecată într-o eprubetă se lasă până la 3 ore, apoi se amestecă din nou, se unge și se numără.

Când celulele stelate ale reticulocitelor devin distincte, iar gradul de maturitate al acestora este determinat (de structura BV colorat), se pot obține informații despre starea măduvei osoase.

Indicatori acceptabili

Nivelul normal al reticulocitelor corespunde procesului de formare a sângelui într-un corp sănătos. Pentru a comanda datele, se utilizează un tabel special, în care intervalele normale sunt clasificate în funcție de vârsta și sexul unei persoane.

Rata de reticulocite din sânge la copii

Rata de reticulocite la copii variază în funcție de perioada specifică de formare a sistemului de formare a sângelui. Deci, la nou-născuți până la 14 zile, indicatorul admis este de la 0,15 la 1,5% în raport cu eritrocitele. Valorile normale pentru sugari de până la două luni sunt de la 0,45 la 2,1 la sută și până la șase luni - 0,25 - 0,9 la sută. La un copil de la șase luni la un an, valorile de la 0,2 la 1 la sută sunt considerate sănătoase și se stabilizează până la vârsta de șase ani. Mai mult, intervalul se restrânge: de la 7 la 12 ani, este de la 0,2 la 1,3 la sută.

Reticulocite din sânge la adulți

Conținutul suplimentar permis de reticulocite în sânge depinde mai mult de sexul copilului decât de vârstă și corespunde indicatorilor adulți. Acest lucru se datorează apariției ciclului menstrual la fete, ceea ce implică pierderea lunară de sânge și, în consecință, o creștere a producției de celule sanguine în această perioadă. Indicatori normativi:

  • nivelul permis de eritrocite tinere în sânge la femei și fete tinere de la vârsta de 13 ani va fi de la 0,12 la 2,05 procente (de la 1,2 la 20 ppm, respectiv);
  • numărul de reticulocite la bărbați variază în mod normal de la 0,24 la 1,7 la sută din masa eritroidă totală.

Deci, la un adult, se stabilește un interval constant de concentrație permisă de celule tinere din sânge, care conțin o substanță granular-reticulară. În acest caz, reculocitele crescute sau o criză reticulocitară indică anumite tulburări în funcționarea sistemului hematopoietic.

Creșterea reticulocitelor

Reticulocitele crescute (sau altfel reticulocitoza) pot avea semnificație atât pozitivă, cât și negativă pentru subiect. Un număr crescut de celule sanguine imature apare în următoarele cazuri:

  • Cu rezultate pozitive ale terapiei cu medicamente care conțin fier, vitamina B12 și acid folic, care apar de obicei într-o săptămână.
  • La completarea volumului de sânge după pierderi semnificative de sânge.
  • Cu rezultate pozitive ale tratamentului bolilor oncologice prin intermediul medicamentelor anticanceroase sau radioterapiei.

Important! Reticulocitoza se observă cu deficit de oxigen la o altitudine semnificativă deasupra nivelului mării.

Valorile negative ale reticulocitozei includ:

  • Consecințele unor boli precum febra tifoidă, care provoacă sângerări interne.
  • Reticulocitele sunt crescute la intoxicație cu otrăvuri chimice sau agenți străini.
  • Falsa reticulocitoză arată prezența celulelor imature în sânge în absența acestora în măduva osoasă, ceea ce indică procese inflamatorii sau metastaze în organ.
  • Reticulocitoza se observă în malarie, anemie hemolitică sau talasemie.

Un conținut crescut de celule sanguine imature în sânge (reticulocitoză) este plin de îngroșare, care poate duce ulterior la tromboză, atac de cord sau accident vascular cerebral.

Reticulocitele din sânge în timpul sarcinii

La femeile gravide, volumul total de sânge crește datorită plasmei, prin urmare, se observă diluarea acestuia și o scădere a nivelului de eritrocite. Datorită faptului că sângele nu conține suficientă hemoglobină, se dezvoltă anemie, care activează procesul de eritropoieză. Prin urmare, un procent ridicat de reticulocite este determinat la femeile gravide. Clinica acestui fenomen îndeplinește norma cu adaptarea fiziologică a corpului la nașterea unui copil.

Reticulocitele sunt reduse

Reticulocitopenia (atunci când numărul de reticulocite este scăzut) indică deseori leziuni ale rinichilor și / sau măduvei osoase. Factorii care scad conținutul de eritrocite tinere sunt:

  • Anemie cauzată de lipsa de acid folic, vitamina B12 sau fier, care duce la distrugerea celulelor roșii din sânge.
  • Boli ale rinichilor, dar pot reduce ușor nivelul reticulocitelor.
  • Abuzul de alcool, care va arăta o scădere a RTC datorită suprimării funcției renale, suprimării funcției măduvei osoase și distrugerii directe a celulelor ca urmare a intoxicației.

Important! Tumorile maligne pot reduce, de asemenea, nivelul de reticulocite din sânge. Depinde de zona măduvei osoase în care cancerul s-a metastazat.

În sine, un indicator al conținutului de reticulocite din sânge nu este un diagnostic. Dacă există o abatere semnificativă de la intervalul permis, aceasta stabilește direcția generală a diagnosticului.

\u003e Numărarea reticulocitelor

Aceste informații nu pot fi utilizate pentru auto-medicație!
Consultarea cu un specialist este imperativă!

Pentru ce se numără reticulocitele?

Un număr de reticulocite este un test de sânge de laborator care evaluează eficacitatea eritropoiezei. Eritropoieza este formarea de celule roșii din sânge în măduva osoasă. Iar reticulocitele sunt celule sanguine care sunt o formă de tranziție între precursorii celulelor roșii din sânge care se formează în măduva osoasă și celulele roșii din sânge care circulă în fluxul sanguin. Numărul lor arată cât de intens se produce procesul de hematopoieză.

În ce cazuri sunt numărate eritrocitele?

Necesitatea numărării reticulocitelor apare atunci când semne de anemie sau tulburări de eritropoieză se găsesc într-un test clinic de sânge: scăderea sau creșterea numărului de globule roșii sau concentrația hemoglobinei, apariția globulelor roșii de dimensiuni sau forme anormale etc. Studiul ajută la diagnosticarea tipului de anemie și la controlul procesului de tratament al acesteia. Numărul de reticulocite este, de asemenea, utilizat pentru a monitoriza eficacitatea chimioterapiei și radioterapiei pentru tumorile măduvei osoase.

Cine poate comanda testul și unde se poate face?

Analiza poate fi prescrisă de un terapeut, pediatru, hematolog, specialist în boli infecțioase, chirurg sau ginecolog. Se face în clinici publice și centre medicale private care colectează sânge pentru cercetări de laborator. Pentru a număra reticulocitele, sângele este preluat dintr-un deget sau dintr-o venă și examinat la microscop sau folosind un analizor hematologic. Rezultatul analizei este gata a doua zi.

Cum să vă pregătiți pentru studiu?

Rezultatul testului poate fi afectat de unele medicamente antiinflamatoare nesteroidiene, antibiotice ale grupelor fluorochinolone și tetracicline, derivați de nitrofuran, tranchilizante, tireostatice și alte medicamente. Prin urmare, cu o zi înainte de studiu, este recomandabil să întrerupeți administrarea medicamentelor, după ce ați fost de acord asupra anularii lor de o zi cu un medic. Este recomandabil să nu mâncați sau să fumați cu 2-3 ore înainte de prelevarea de sânge. Puteți bea apă curată fără gaz.

Câte reticulocite sunt considerate normale?

În termeni absoluți, numărul de reticulocite la femei ar trebui să fie de 17–63,8 x 10 ^ 9 / l, la bărbați acesta variază de la 23 la 70 x 10 ^ 9 / l. În termeni procentuali, reticulocitele reprezintă de la 0,5 la 1,9% din numărul total de eritrocite. Cel mai mare număr de eritrocite imature se observă la nou-născuți (conform diferitelor surse, de la 5 la 15%). Odată cu vârsta, numărul lor scade treptat. O creștere a numărului de reticulocite se observă la femeile gravide, fumătoare și alpiniști.

Despre ce boli pot vorbi abaterile de la normă?

O creștere a numărului de reticulocite se numește reticulocitoză, o scădere se numește reticulocitopenie. În sine, nivelul reticulocitelor nu este o bază pentru a face vreun diagnostic, dar permite medicului să-și asume mai exact ce proces patologic are loc în organism.

O scădere a numărului de reticulocite sau chiar absența lor completă se observă cu diferite tipuri de anemie (hipoplazică, aplastică, sideroblastică, cauzată de lipsa de fier, acid folic, vitamina B12), cu metastaze tumorale la nivelul osului, cu tratament cu citostatice, boala de radiații și radioterapie.

Cauzele reticulocitozei pot fi anemia hemolitică (în acest caz, numărul de reticulocite ajunge la 60% sau mai mult), pierderea acută de sânge (3-4 zile după ce apare o criză reticulocitară), malaria, policitemia, tratamentul antianemic, lipsa acută de oxigen. Un număr crescut de reticulocite poate indica sângerări ascunse (de exemplu, la persoanele cu boală de ulcer peptic).

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după colorarea lor cu coloranți speciali este în practică cea mai utilizată metodă de numărare a numărului de reticulocite. Acest lucru se datorează faptului că metoda este simplă, destul de ieftină și nu necesită echipamente speciale scumpe și, prin urmare, poate fi utilizată în orice laborator de diagnostic clinic.

Principiul metodei

Descoperirea substanței granular-reticulare a reticulocitelor în colorarea supravitală cu vopsele alcaline cu numărarea lor ulterioară într-un frotiu de sânge.

Reactivi

Se poate utiliza unul dintre următorii coloranți:

  1. Soluție saturată de albastru crezil strălucitor în alcool absolut (pentru a prepara alcool absolut, este necesar să reziste la 96% etanol în mai multe modificări de pulbere de sulfat de cupru calcinat). Pentru 100 ml alcool absolut, luați 1,2 g de vopsea.
  2. Soluție Azur I: azur I - 1 g, oxalat de amoniu - 0,4 g, clorură de sodiu - 0,8 g, alcool etilic 96% - 10 ml, apă distilată - 90 ml. Soluția de vopsea într-o sticlă închisă este plasată într-un termostat la 37 ° C timp de 2-3 zile și se agită periodic energic. Apoi răcit la temperatura camerei și filtrat printr-un filtru de hârtie. Soluția este păstrată într-un recipient din sticlă întunecată. Dacă apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou.
  3. Soluție Azur II: azure II - 1 g, citrat de sodiu - 5 g, clorură de sodiu - 0,4 g, apă distilată - 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, amestecând ocazional. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită la foc mic timp de 15 - 20 de minute, fără a fierbe. Se răcește la temperatura camerei și se filtrează. A se păstra într-un recipient din sticlă întunecată.

Echipament special

Microscop.

Progresul determinării

Colorarea reticulocitelor se efectuează fie pe sticlă, fie într-o eprubetă.

Colorarea reticulocitelor pe sticlă

La colorarea reticulocitelor pe sticlă, o lamă de sticlă bine spălată și degresată este încălzită pe flacăra arzătorului. O picătură dintr-unul dintre coloranții de mai sus se aplică pe sticlă cu o tijă de sticlă, iar o frotiu de vopsea se prepară cu sticlă lustruită. Partea sticlei pe care a fost aplicat frotiul de vopsea este marcată cu o imprimantă de sticlă. În această formă, sticla poate fi pregătită pentru utilizare viitoare și depozitată într-un loc uscat și întunecat. O cameră umedă este pregătită înainte de analiză. De obicei, folosesc o cutie Petri cu suluri de vată umezită sau hârtie de filtru așezată de-a lungul marginilor. O picătură de sânge se aplică pe un frotiu de vopsea, se prepară un frotiu subțire din acesta și se pune imediat într-o cameră umedă timp de 3-10 minute. Apoi frotiurile sunt uscate la aer.

Colorarea in vitro a reticulocitelor

Colorarea reticulocitelor in vitro diferă prin utilizarea diferiților coloranți.

Metoda 1 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu albastru crezil strălucitor.

Înainte de utilizare, o soluție de lucru de albastru crezil strălucitor este preparată într-o eprubetă, pe baza unei picături de soluție de 1% oxalat de potasiu, 4 picături dintr-o soluție de vopsea strălucitoare de albastru crezil. Adăugați 0,04 ml de sânge în vopsea (două pipete până la semnul 0,02). Amestecul se amestecă bine, dar ușor și se lasă timp de 30 de minute. Apoi amestecați din nou și pregătiți frotiuri subțiri.

Metoda 2 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu azur II.

0,05 ml soluție de vopsea Azur II și 0,2 ml sânge sunt plasate într-o eprubetă. Amestecul se amestecă bine și se lasă timp de 20 până la 30 de minute. Se amestecă din nou și se pregătesc lovituri subțiri.

Metoda 3 - colorarea reticulocitelor într-o eprubetă cu azur I.

0,3 - 0,5 ml dintr-o soluție de vopsea azur I și 5 - 6 picături de sânge sunt plasate într-o eprubetă cu o pipetă din aparatul Panchenkov. Eprubeta este închisă cu un dop de cauciuc, amestecul este amestecat bine, dar cu atenție și lăsat timp de 1 - 1,5 ore (reticulocitele se colorează mai bine atunci când sunt expuse timp de 1,5 - 3 ore). Se amestecă și se prepară lovituri subțiri.

Vopsele de reticulocite prefabricate sunt acum disponibile comercial. Colorarea reticulocitelor cu ajutorul lor se efectuează conform instrucțiunilor atașate.

Numărarea reticulocitelor.

Frotiurile preparate prin una dintre metodele de mai sus sunt microscopate cu un obiectiv de imersiune. În frotiu, reticulocitele și eritrocitele sunt colorate gălbuie-verzuie, substanța granulo-filamentoasă din reticulocite este albastră (când este colorată cu azur II și albastru crezil strălucitor) sau albastru-violet (când este colorată cu azur I).

Fotografii ale reticulocitelor:

Găsiți câmpul vizual, unde celulele roșii din sânge sunt situate separat. În aceste câmpuri vizuale, este necesar să se numere cel puțin 1000 de eritrocite și să se noteze printre ele numărul de eritrocite care conțin o substanță granulo-filamentoasă. Se obține o precizie mai mare la numărarea 2000 - 3000 eritrocite.

Datorită faptului că există un număr mare de celule roșii din sânge în câmpul vizual, ceea ce face dificilă numărarea, este necesar să se limiteze (să se reducă) câmpul vizual. Pentru a face acest lucru, puteți utiliza fie un ocular special, în care puteți reduce câmpul vizual la dimensiunea necesară, fie puteți utiliza o „fereastră” specială (un cerc cu un diametru puțin mai mic decât ocularul este decupat din hârtie, un mic diamant este decupat în centrul cercului și fereastra rezultată este introdusă în ocular).

Numărul de reticulocite numărate este exprimat la 100 (procent) sau 1000 (la mie) eritrocite.

Exemplu: Când 1000 de eritrocite au fost numărate într-un frotiu, s-a dezvăluit că 15 din 1000 de eritrocite au o substanță granular-reticulară de un grad sau altul, adică sunt reticulocite. Prin urmare, numărul de reticulocite în acest caz este de 1,5% sau 15 ‰.

Literatură:

  • Director "Metode de cercetare de laborator în clinică" editat de V. V. Menshikov - Moscova, "Medicină", \u200b\u200b1987
  • Lyubina A. Ya., Ilyicheva L. P. și colab. - "Cercetări clinice de laborator" - Moscova, "Medicină", \u200b\u200b1984

Determinarea numărului de reticulocite - un test clinic de sânge, în care se efectuează numărul de eritrocite tinere produse de măduva osoasă. Studiul completează numărul total de sânge. Numărarea reticulocitelor se efectuează pentru diagnosticul diferențial al diferitelor tipuri de anemie, evaluarea funcționării măduvei osoase și splinei, monitorizarea stărilor pacienților cu deficit de fier, vitamina B12 sau deficit de acid folic, insuficiență renală și boli oncologice. . Prelevarea de sânge pentru cercetare se face dintr-o venă sau capilare. Numărul de reticulocite se determină folosind metoda citometriei în flux. Valorile de referință pentru bărbați sunt 23-70 mii / μl, pentru femei - 17-63,8 mii / μl. Cronologia analizei nu depășește o zi lucrătoare.

Reticulocitele sunt precursorii eritrocitelor. Sunt produse de măduva osoasă în timpul diferențierii și divizării celulelor stem. Majoritatea reticulocitelor sunt localizate în măduva osoasă; globulele roșii mature intră în principal în fluxul sanguin. Proporția de reticulocite din sânge este de aproximativ 0,5-2%. La efectuarea analizei, se determină numărul de celule de acest tip și procentul acestora din numărul total de eritrocite. Rezultatele ne permit să evaluăm producția de celule roșii din sânge în măduva osoasă, pentru a releva gradul de activitate al acestui proces.

Corpul menține un nivel stabil de celule roșii din sânge în sânge. Odată cu scăderea numărului lor ca urmare a hemolizei, se activează sinteza afectată, sângerarea, mecanismele compensatorii pentru restabilirea concentrației normale. Prin modificarea nivelului și a procentului de reticulocite, este posibil să se stabilească o creștere a producției de celule roșii din sânge în măduva osoasă sau inhibarea acestui proces. Dacă măduva osoasă funcționează normal, atunci pierderea globulelor roșii duce la o creștere ulterioară a numărului acestora și a numărului de reticulocite. O scădere a nivelului acestor tipuri de celule apare atunci când măduva osoasă roșie este afectată de o tumoare, metastaze, radioterapie și chimioterapie. Pentru analiza reticulocitelor, biomaterialul este sângele capilar sau venos. Studiul se realizează cu ajutorul unui analizor de hematologie prin citometrie în flux. Rezultatele sunt aplicate în practica terapeutică generală, în hematologie, pediatrie, boli infecțioase, chirurgie.

Indicații

Testul reticulocitelor este utilizat pentru a evalua producția de celule roșii din sânge de către măduva osoasă. Rezultatele cercetării fac posibilă diferențierea între diferite tipuri de anemii. După nivelul reticulocitelor, acestea sunt împărțite în hiporegenerative și regenerative. În primul caz, indicatorii de testare sunt reduși, producția de eritrocite este insuficientă, funcțiile măduvei osoase sunt deprimate. Acest grup include anemii hemolitice în bolile cronice, intoxicație generală, cașexie, deficit de proteine, fier, vitamine. Anemiile regenerative sunt însoțite de o creștere compensatorie a nivelului de reticulocite pe fondul creșterii distrugerii sau pierderii eritrocitelor. Acest grup include anemii post-hemoragice și unele anemii hemolitice. Analiza pentru reticulocite poate fi utilizată pentru a stabili severitatea anemiei, apoi rezultatele acesteia sunt completate de indicatori ai nivelului de indici ai eritrocitelor, hemoglobinei și eritrocitelor.

Determinarea nivelului de reticulocite este indicată cu un nivel redus de eritrocite, hemoglobină, cu plângeri de oboseală frecventă, dureri de cap, dificultăți de respirație, sânge în urină sau scaun. Cu un diagnostic stabilit de anemie, este prescrisă o analiză pentru a evalua eficacitatea tratamentului. Este utilizat în special pentru a monitoriza anemia cauzată de un deficit de fier, vitamina B12 sau acid folic, precum și pentru dezvoltarea în contextul insuficienței renale, a bolilor cronice. Pentru studiul funcției măduvei osoase, este indicat un test reticulocitar pentru un număr crescut de celule roșii din sânge pentru a determina cauza policitemiei.

Testul de sânge al reticulocitelor nu este utilizat pentru a pune un diagnostic. Scopul său principal în practica clinică este planificarea unor proceduri de diagnosticare suplimentare și monitorizarea succesului terapiei. Numărul de reticulocite din sânge este relativ stabil, prin urmare, cu o scădere a nivelului de eritrocite și hematocrit, parametrii de analiză devin artificial mari. Acest lucru poate fi evitat prin calcularea indicelui reticulocitelor - numărul absolut de reticulocite (procentul de reticulocite înmulțit cu hematocritul). O altă caracteristică a acestui studiu este că rezultatele indică o activitate recentă a măduvei osoase, deoarece globulele roșii imature circulă în sânge timp de 2 zile.

Pregătirea pentru analiză și eșantionarea materialului

Este recomandat să luați sânge pentru analize pentru reticulocite dimineața, pe stomacul gol. Intervalul minim dintre mese și procedură este de 3-4 ore. Cu cel puțin o zi înainte, este necesar să renunțați la activitatea fizică intensă, la consumul de alcool și să evitați expunerea la factorii de stres. Atunci când prescrieți o analiză, merită să informați medicul despre medicamentele utilizate, deoarece unele medicamente afectează nivelul reticulocitelor din sânge. Cu 30 de minute înainte de procedura de colectare, trebuie să renunțați la fumat, să eliminați stresul fizic și emoțional.

Nivelul reticulocitelor este determinat în sângele capilar sau venos. În consecință, gardul este realizat din degetul inelar sau din vena ulnară. Sângele este plasat într-un tub anticoagulant și trimis la laborator. În prezent, analizorii de hematologie sunt folosiți aproape peste tot pentru a număra reticulocitele. Studiul se realizează prin metoda citometriei în flux - celulele dintr-un flux fluid se deplasează printr-un capilar foarte îngust și sunt luate în considerare în timpul iradierii cu laser. Cronologia analizei este de 1 zi.

Valorile normale

Rezultatele testului reticulocitelor arată numărul absolut de celule pe unitate de volum de sânge și procentul din numărul total de celule roșii din sânge. În mod normal, la pacienții de sex feminin, nivelul reticulocitelor variază de la 17 * 109 la 63,8 * 109 celule / l, la pacienții de sex masculin - de la 23 * 109 la 70 * 109 celule / l. Proporția de celule de acest tip în numărul total de eritrocite se modifică odată cu vârsta:

  • de la naștere până la 2 săptămâni - de la 0,15 la 1,5%;
  • de la 2 săptămâni la 1 lună - de la 0,45 la 1,4%;
  • de la 2 la 6 luni - de la 0,25 la 0,9%;
  • de la 6 luni la 2 ani - de la 0,2 la 1%;
  • de la 2 la 6 ani - de la 0,2 la 0,7%;
  • de la 6 la 12 ani - de la 0,2 la 1,3%;
  • de la 12 la 18 ani - de la 0,12 la 2,05% pentru fete, de la 0,24 la 1,7% pentru băieți;
  • de la 18 ani - de la 0,59 la 2,07% pentru femei, de la 0,67 la 1,92% pentru bărbați.

O creștere fiziologică a nivelului de reticulocite din sânge apare în timpul foametei de oxigen cauzată de ascensiunea la o înălțime mare sau coborârea sub apă, șederea prelungită într-o cameră neventilată, fumatul și consumul de alcool. În plus, o creștere a concentrației acestor celule este uneori determinată la femeile gravide și este considerată o variantă a normei.

Ridică nivelul

Sângerarea poate fi cauza creșterii nivelului de reticulocite din sânge. Concentrația de celule roșii din sânge scade, pentru a o restabili, măduva osoasă crește producția precursorilor lor. În sângerările acute, numărul de reticulocite crește cu 3 sau 4 zile, în sângerările cronice, acesta rămâne constant crescut tot timpul. În bolile însoțite de hemoliză (distrugerea eritrocitelor), numărul de reticulocite depășește semnificativ norma, uneori abaterile ajung la 300%. Cele mai frecvente patologii ale acestui grup sunt defectele ereditare ale eritrocitelor, distrugerea lor autoimună și deteriorarea toxică a malariei. Alte motive pentru creșterea nivelului de reticulocite pot fi policitemia, inflamația, cancerul măduvei osoase sau răspândirea metastazelor în acesta, restabilirea funcției măduvei osoase după radiații și chimioterapie. În tratamentul anemiilor, normalizarea concentrației de reticulocite indică succesul măsurilor terapeutice.

Scăderea nivelului

Scăderea nivelului de reticulocite din sânge poate fi cauzată de anemie cauzată de un deficit de fier, vitamina B12 sau acid folic. În astfel de cazuri, producția de celule sanguine este redusă din cauza lipsei de „material de construcție”. Un alt motiv pentru scăderea nivelului de reticulocite este anemia care se dezvoltă pe fondul deteriorării măduvei osoase sau a inhibării funcțiilor sale. Modificările de acest tip sunt determinate de intoxicația cu alcool, scăderea activității glandei tiroide, infecții cronice, patologii autoimune, boli de rinichi, expunerea la substanțe toxice, inclusiv medicamente, radiații.

Tratamentul abaterilor de la normă

În practica clinică, un test reticulocitar este cel mai adesea prescris după un test general de sânge cu o scădere a numărului de eritrocite și hemoglobină. Nivelul reticulocitelor face posibilă evaluarea funcției măduvei osoase, sinteza eritrocitelor, determinarea tipului de anemie și monitorizarea eficacității tratamentului acesteia. Dacă rezultatele testului se abat de la normal, ar trebui să solicitați sfatul medicului curant - terapeut, pediatru, hematolog, chirurg. Pentru a preveni influența factorilor fiziologici asupra numărului de reticulocite, este necesar să se excludă situațiile care provoacă foamete de oxigen - ascensiuni sau coborâri sub apă, ședere prelungită într-o cameră gazată sau înfundată, fumatul, consumul de alcool.

© 2021 huhu.ru - Faringe, examinare, curgerea nasului, afecțiuni ale gâtului, amigdalele