Reacția Coombs indirectă (test antiglobuline, detectarea anticorpilor antieritrocitari incompleti), sânge. Testul Coombs: aspecte clinice și de laborator

Un test Coombs este un test clinic de sânge care se face pentru a vedea dacă sângele conține anumiți anticorpi care ar putea să nu fie siguri. Acești anticorpi se lipesc de celulele roșii din sânge și pot invada sistemul imunitar și pot dăuna în alte moduri. În terminologia medicală, acest test se mai numește și test antiglobulină (AGT).

Tipuri de teste Coombs

Există două tipuri de test Coombs - direct și indirect.

Testul Coombs direct, cunoscut și sub numele de direct (DAT), detectează auto-anticorpi care se atașează la suprafața globulelor roșii. Acești anticorpi sunt uneori produși în organism din cauza anumitor boli sau atunci când iau anumite medicamente, cum ar fi procainamida, metildopa sau chinidina.

Acești anticorpi sunt periculoși, deoarece uneori provoacă anemie prin distrugerea globulelor roșii.

Acest test este uneori prescris pentru a diagnostica cauza icterului sau anemiei.

În mod normal, reacția Coombs este negativă.

Pozitiv pentru:

• boala hemolitică a nou-născutului;
• hemoliză autoimună;
• reacții hemolitice de transfuzie;
• anemie hemolitică imună indusă de medicamente.

Testul Coombs indirect, cunoscut și sub denumirea de , este utilizat pentru a detecta anticorpii la eritrocite conținute în serul sanguin (serul este lichidul galben limpede din sânge care rămâne după excretarea globulelor roșii și coagulant).

Testul Coombs indirect este utilizat într-o transfuzie de sânge pentru a determina dacă sângele donatorului se potrivește cu cel al primitorului. Acesta se numește test de compatibilitate și ajută la prevenirea oricărei reacții adverse la sângele donatorului. Această analiză este recomandată și femeilor însărcinate. Unele femei au anticorpi IgG care pot traversa placenta în fat și pot dăuna nou-născutului, provocând o boală hemolitică cunoscută sub numele de anemie hemolitică.

Procedură

Sângele este prelevat cu ajutorul unei seringi dintr-o venă, de obicei din dosul mâinii sau în cotul cotului. Locul puncției este dezinfectat temeinic înainte de aceasta și, după efectuarea unui test de sânge, se aplică tifon curat sau vată.

Sângele rezultat este purificat în laborator, iar celulele roșii din sânge sunt separate. Proba este apoi examinată secvenţial utilizând diferiţi ser şi reactivi Coombs, care este contracarat. Dacă nu există aglutinare (aglomerarea globulelor roșii), aceasta înseamnă un rezultat pozitiv.

Totuși, dacă testul este negativ, înseamnă că există anticorpi în sânge care acționează împotriva globulelor roșii. Acest lucru poate indica diferite boli, cum ar fi anemia (fie naturală sau indusă de medicamente), sifilisul sau infecția cu micoplasmă. După primirea rezultatelor, medicul curant va prescrie tratamentul adecvat.

Video

Sau dizolvat în plasmă.

Sinonime: test antiglobulină, test Coombs, AGT, test antiglobulină indirect/direct, IAT, NAT, DAT, test Coombs indirect/direct

Testul Coombs este

o analiză care detectează imunizarea și anticorpii la celulele roșii din sânge.

Tipuri de test Coombs

• testul Coombs direct- detectează anticorpii fixați pe suprafața eritrocitelor. Se efectuează cu suspiciune de anemie hemolitică autoimună, hemoliză în boli autoimune, după administrarea de medicamente (metildopa, penicilină, chinină), după transfuzie de sânge și boala hemolitică a nou-născutului.

Eritrocitele au fost sensibilizate in vivo - anticorpii sunt deja ferm atașați de ele, iar adăugarea de ser antiglobulinic (anti-IgG) face ca celulele sensibilizate să se lipească, ceea ce este vizibil cu ochiul liber.

• testul Coombs indirect- detectează anticorpi antieritrocitari în plasma sanguină, efectuată înainte de transfuzia de sânge și în timpul sarcinii.

Anticorpii anti-eritrocitari sunt un tip de autoanticorpi, de ex. anticorpi împotriva propriilor țesuturi. Un autoanticorp apare atunci când sistemul imunitar este anormal de reactiv la anumite medicamente, cum ar fi doze mari de penicilină.

Eritrocitele pe suprafața lor conțin diferite structuri chimice (glicolipide, zaharide, glicoproteine ​​și proteine), denumite în medicină antigene. O persoană moștenește de la părinți o anumită hartă a antigenelor de pe fiecare globule roșie.

Antigenele sunt combinate în grupuri și, alături de aceasta, sângele este împărțit în mai multe grupuri - conform sistemul AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Daffy. Cele mai faimoase și semnificative în activitatea unui medic sunt AB0 și factorul Rh (Rh).

sistem AB0

Afilierea Rhesus o persoană este determinată de prezența acestor antigene. Un antigen eritrocitar deosebit de important este antigenul D. Dacă este prezent, atunci se vorbește despre Rh-pozitiv Rh din sânge, iar dacă nu este acolo, despre Rh-negativ Rh.

Dacă anticorpul corespunzător se unește cu antigenele eritrocitelor, atunci eritrocitul este distrus - hemoliza.

Indicatii de realizare testul direct cu antiglobulină

• anemie hemolitică autoimună primară
• anemie hemolitică în boli autoimune, neoplazice, infecțioase
• anemie hemolitică autoimună indusă de medicamente
• anemie hemolitică post-transfuzie (zile - luni)
• boala hemolitică a nou-născutului (incompatibilitate într-una dintre grupele sanguine)

Indicatii de realizare testul indirect al antiglobulinei

• înainte de transfuzia de sânge
• în timpul sarcinii unei femei Rh negativ

Anemia hemolitică autoimună

Anemia hemolitică autoimună (primară) este o boală autoimună clasică cu cauze necunoscute. Să presupunem o încălcare a procesului de interacțiune la nivelul sistemului imunitar, ceea ce duce la percepția propriilor eritrocite ca străine. Celulele produc anticorpi din clasa IgG (reacționează la t 37°C) și/sau IgM (la t 40°C), atașându-se la suprafața eritrocitei, încep un număr de enzime (sistemul complementar) și „perforează” peretele eritrocitelor, ceea ce duce la distrugerea acestuia - hemoliza.

Simptomele anemiei hemolitice

• oboseală, slăbiciune generală, iritabilitate
• dispnee
• dureri abdominale, greață
• culoare închisă a urinei
• dureri de spate
• colorarea icterică a pielii și a mucoaselor
• mărirea ficatului, splinei
• scăderea numărului de globule roșii și a hemoglobinei în testul general de sânge

Rezultat pozitiv Drept Testul Coombs 100% confirmă diagnosticul de anemie hemolitică autoimună, dovedind originea sa autoimună. În același timp, un rezultat negativ nu face posibilă stabilirea unui diagnostic.

Anemia hemolitică autoimună secundară și un test Coombs pozitiv pot fi cu următoarele boli:

• lupus eritematos sistemic
• sindromul Evans
• Macroglobulinemia lui Waldenström
• hemoglobinurie paroxistica rece
• leucemie limfocitară cronică
• limfoame
• Mononucleoza infectioasa
• infecție cu Mycoplasma pneumoniae
• sifilis

Pozitivitatea testului antiglobulinei în aceste boli nu servește ca criteriu de diagnostic, ci este unul dintre simptomele bolii.

Boala hemolitică a nou-născutului

Cauză boala hemolitică a nou-născutului incompatibilitatea grupelor de sânge la mamă și făt, în majoritatea cazurilor conform sistemului Rhesus, în cazuri singulare - conform sistemului AB0, cazuistic - conform altor antigene.

Conflictul Rh se dezvoltă dacă la o femeie Rh negativ fătul a moștenit sânge Rh pozitiv de la tatăl ei.

Boala la nou-născut se dezvoltă numai dacă mama a dezvoltat deja anticorpi la antigenele corespunzătoare, ceea ce se întâmplă după sarcini anterioare, naștere, avorturi, transfuzii de sânge incompatibil. Cel mai frecvent motiv pentru declanșarea sintezei de anticorpi la antigenele membranei eritrocitare este nașterea (sângerarea feto-maternă). Primele nașteri trec de cele mai multe ori fără complicații, dar următoarele sunt pline de boală hemolitică a nou-născutului în primele zile după naștere.

Simptomele bolii hemolitice ale nou-născutului

• îngălbenirea pielii
• anemie
• pielea palida si mucoasele
• mărirea ficatului și a splinei
• tulburări respiratorii
• umflarea întregului corp
• excitația și deprimarea treptată a sistemului nervos central

Anemia după transfuzie de sânge

Testul Coombs indirect efectuate înainte de transfuzia de sânge pentru a evalua compatibilitatea și testul Coombs direct- după aceasta, dacă se suspectează hemoliză post-transfuzională, i.e. dacă aveți simptome precum febră, frisoane, udare (citiți mai jos). Scopul testului este de a detecta anticorpi la eritrocite transfuzate care s-au legat de eritrocitele primitorului și sunt cauza hemolizei post-transfuzie, precum și îndepărtarea prematură a globulelor roșii donatoare din fluxul sanguin al primitorului (cel care a primit sânge).

Simptomele unei reacții hemolitice după o transfuzie de sânge

• creșterea temperaturii corpului
• erupție pe piele
• dureri de spate
• culoarea roșie a urinei
• greaţă
• ameţeală

Descifrarea testului Coombs

Merită să reamintim că regulile fundamentale pentru decodarea testelor antiglobuline directe și indirecte sunt aceleași. Singura diferență este localizarea anticorpilor - în sânge sau deja pe un glob roșu - pe un eritrocit.

• dacă testul Coombs direct este negativ- aceasta înseamnă că anticorpul nu se „așează” pe eritrocite și că cauza simptomelor trebuie căutată în continuare și trebuie efectuat un test Coombs indirect
• dacă un rezultat pozitiv al testului Coombs este detectat după o transfuzie de sânge, infecții, medicamente - pozitivitatea poate dura până la 3 luni (durata de viață a eritrocitelor 120 de zile - 3 luni)
• un rezultat pozitiv al testului antiglobulină într-o boală autoimună poate dura luni sau chiar ani

Norme de testare Coombs

• testul Coombs direct- negativ
• testul Coombs indirect- negativ

Calitativ, un rezultat pozitiv este măsurat în numărul de plusuri de la unu la patru (+, ++, +++, ++++), iar cantitativ în formă digitală - 1:16, 1:256 etc.

4 fapte despre testul Coombs

• propus pentru prima dată la Cambridge în 1945
• pragul de sensibilitate - cel puțin 300 de molecule de anticorpi fixate pe un eritrocit
• numărul de anticorpi care declanșează hemoliza - individual pentru fiecare persoană (de la 16-30 la 300)
• dinamica altor indicatori de laborator ai anemiei hemolitice (hemoglobina, bilirubina, reticulocite) se poate normaliza, iar testul Coombs va ramane la acelasi nivel.

Dezavantajele testului antiglobulinei

• nu poate determina puterea de legare a unui antigen la un anticorp
• număr necunoscut de anticorpi legați
• nu determină tipul de anticorp
• un test Coombs pozitiv nu va ajuta la determinarea cauzei acestuia
• 0,5% dintre oamenii sănătoși au un test Coombs pozitiv fără nicio dovadă de anemie hemolitică
• nu este potrivit pentru monitorizarea succesului tratamentului, deoarece nu indică activitatea hemolizei eritrocitelor

Un test antiglobulină conceput pentru a detecta anticorpii anti-eritrocitari incompleti a fost propus de Coombs, Morant, Reis în 1945 și a fost numit ulterior testul Coombs. Esența acestei metode constă în faptul că serul antiglobulinic care conține anticorpi la imunoglobulinele umane, atunci când reacţionează cu eritrocitele sensibilizate de anticorpi incompleti, duce la aglutinarea acestora.

În funcție de faptul că anticorpii sunt fixați pe suprafața globulelor roșii sau sunt liberi în plasma sanguină, se folosește un test Coombs direct sau indirect.

Un test Coombs direct este efectuat în cazurile în care există motive să credem că celulele roșii din sânge aflate în studiu sunt deja in vivo au fost sensibilizate cu anticorpi corespunzători, de ex. prima fază a reacției - fixarea anticorpilor pe suprafața eritrocitelor - a avut loc în organism și adăugarea ulterioară de ser antiglobulinic determină aglutinarea celulelor sensibilizate.

Folosind testul indirect Coombs, sunt detectați anticorpi incompleti prezenți în serul de testare. În acest caz, reacția se desfășoară în două etape. Prima etapă este incubarea eritrocitelor de testat cu serul de testare, timp în care anticorpii conținuți în proba de ser de testat sunt fixați pe suprafața eritrocitelor. A doua etapă este adăugarea de ser antiglobulinic.

Până în prezent, testul Coombs a fost utilizat pe scară largă în practica de laborator pentru diagnosticarea stărilor imunopatologice, în special, în anemiile hemolitice autoimune, caracterizate prin distrugerea eritrocitelor datorită legării membranei celulare de anticorpi și (sau) componente ale sistemul complementului. Cu ajutorul acestuia, este detectată prezența Ig G (de obicei Ig G1 și Ig G3) pe membrana eritrocitară, care poate activa complementul și uneori complementul (C3d). Cu toate acestea, în perioada acută a bolii, din cauza distrugerii eritrocitelor, pe care au fost fixați un număr mare de anticorpi, în timpul unei crize hemolitice, precum și cu o cantitate insuficientă de anticorpi în cursul cronic al bolii, o se poate observa testul Coombs direct negativ.

Trebuie subliniat faptul că testul Coombs indirect rămâne cea mai bună metodă pentru selecția individuală a mediilor de transfuzie, deoarece permite determinarea cât mai precisă a compatibilității individuale a donatorului și a primitorului pentru antigenele eritrocitare.

Un test suplimentar de antiglobulină directă pentru prezența autoanticorpilor este recomandat în examinarea tuturor primitorilor de organe și țesuturi în perioada pre-transplant și a primitorilor de celule stem hematopoietice și după transplant.

Pe lângă imunohematologie și transfuziologie, testele antiglobuline sunt utilizate pe scară largă în diagnosticul unui număr de afecțiuni patologice: în boli hematologice, inclusiv boli limfoproliferative, în boli sistemice ale țesutului conjunctiv, boala Sjögren, hepatită cronică activă etc.

Testele lui Coombs sunt utilizate în mod activ în genetica medicală și medicina legală pentru a determina antigenele eritrocitare de suprafață.

Testul Coombs este o metodă de cercetare care necesită destul de mult timp, care necesită o atenție specială în implementarea sa. Când îl utilizați, există unele dificultăți asociate, în special, cu interpretarea reacțiilor slab pozitive. Se știe că reacțiile false slab pozitive sau negative la efectuarea testelor Coombs pot fi rezultatul spălării insuficient eficiente a eritrocitelor, neutralizării reactivului antiglobulinic cu urme de ser, precum și contactului cu o suprafață nedegrasată pe care poate fi antiglobulina. fix, pierzându-și activitatea. Un alt dezavantaj al testului Coombs este instabilitatea reactivului antiglobulinic a cărui preparare și păstrare au anumite caracteristici, ceea ce îngreunează și cuantificarea reacției de hemaglutinare cu ser antiglobulinic.

În plus, studiile efectuate de A. Holburn, D. Voak et al. , a arătat că agitarea excesivă în timpul resuspendarii suspensiei de celule roșii poate fi cauza unor rezultate fals negative. Rezultatele eronate la efectuarea testelor antiglobuline se pot datora, de asemenea, prezenței unui amestec de anticorpi anti-complementari în reactivul antiglobulinei, în special la componentele complementului C3d, C3c, C4c și C4d, care sunt adsorbite pe suprafața eritrocitelor de testat în timpul incubației și creează apariția unui rezultat pozitiv.

Aceste neajunsuri pot fi eliminate cu ușurință prin spălarea temeinică a probelor de testat și controlul condițiilor de reacție.

În ultimul deceniu, soluția salină izotonică cu putere ionică scăzută (LISS) a fost utilizată pentru a reduce timpul și sensibilitatea testului Coombs indirect.

Avantajul incontestabil al testelor cu antiglobulină, după o serie de autori, este sensibilitatea lor ridicată, care depășește semnificativ rezoluția metodelor alternative de cercetare care sunt folosite pentru a detecta anticorpii neaglutinanți.

Am comparat rezoluția metodelor de studiere a serurilor de sânge pentru prezența anticorpilor incompleti folosind poliglucină, gelatină și ser antiglobuline. Pe parcursul studiului, titrurile de anticorpi anti-D incompleti au fost monitorizate în 140 de probe de ser de sânge de la donatori izoimuni folosind teste cu gelatină, poliglucină și antiglobulină indirectă. Prezentarea acestor metode a fost efectuată în conformitate cu metodele general acceptate.

S-a constatat că, în ceea ce privește rezoluția lor, metodele de depistare a sensibilizării eritrocitare cu anticorpi anti-D sunt dispuse astfel: cel mai sensibil este testul Coombs indirect, apoi testul cu gelatină, iar cel mai puțin informativ este testul poliglucină. Rezultatele obținute în această serie de experimente corespund pe deplin datelor din literatură, ceea ce ne permite să concluzionam că sensibilitatea testelor lui Coombs este suficient de mare, ceea ce face posibilă identificarea cu un grad ridicat de certitudine a prezenței anticorpilor antieritrocitari. în organism care nu provoacă aglutinarea globulelor roșii.

Cu toate acestea, în practica testelor lui Coombs, există cazuri în care nu sunt detectați anticorpi incompleti, deși tabloul clinic al bolii sau imunizarea anterioară indică posibila prezență a acestora. În astfel de cazuri, se poate presupune că cantitatea de anticorpi nu este suficientă pentru ca aceștia să fie precipitați de anticorpii serici antiglobulină.

Această concluzie a fost confirmată de propriul nostru experiment, în care, folosind metoda microelectroforezei analitice a celulelor, s-a stabilit prezența anticorpilor anti-D pe eritrocitele de testare, care nu au fost detectați în testul Coombs indirect. În această serie de experimente, la eritrocite s-a adăugat ser antiglobulinic, incubat în prealabil cu seruri obținute din sângele donatorilor imunizați, în perioada de genezei anticorpilor din mers, adică. în perioada în care metodele cunoscute, inclusiv testul Coombs, nu au detectat anticorpi în ele.

În studiile efectuate, dovezile prezenței anticorpilor incompleti pe suprafața eritrocitelor a reprezentat o schimbare semnificativă statistic în mobilitatea electroforetică a globulelor roșii sensibilizate după adăugarea de ser antiglobulinic. De remarcat că ulterior, anticorpii anti-D au fost detectați în serul sanguin al tuturor donatorilor imunizați în testul Coombs indirect.

Gillerand şi colab. a mai arătat că testele cu antiglobulină se caracterizează printr-un anumit prag de sensibilitate: un rezultat pozitiv se observă numai atunci când pe suprafața unui eritrocit sunt fixate cel puțin 500 de molecule Ig G.

În plus, există dovezi în literatura de specialitate că un posibil rezultat Coombs negativ se poate datora afinității scăzute a anticorpilor care sensibilizează celulele roșii din sânge, drept urmare acestea sunt ușor eluate de pe suprafața globulelor roșii în timpul procesului de spălare. .

Având în vedere cele de mai sus, se poate concluziona că în unele cazuri un rezultat negativ al testului Coombs nu este încă o dovadă a absenței anticorpilor fixați pe suprafața eritrocitelor.

Se știe că reacțiile lui Coombs sunt foarte specifice și permit detectarea majorității tipurilor de anticorpi incompleti. Cu toate acestea, după cum arată unele date experimentale, testele antiglobuline pot fi pozitive și în condiții non-imunologice. E. Muirhead et al. în a doua zi după administrarea de fenilhidrazină, s-a observat că câinii au un test Coombs pozitiv. O astfel de apariție rapidă a unei reacții pozitive mărturisește împotriva naturii sale imunologice și, mai degrabă, este asociată cu adsorbția nespecifică a proteinei pe suprafața eritrocitelor.

M. Williams şi colab. a constatat că acidul clavulanic poate provoca, de asemenea, o reacție pozitivă, care, potrivit autorilor, este asociată cu adsorbția nespecifică a proteinelor plasmatice pe suprafața eritrocitelor. Un efect similar a fost observat în tratamentul cu antibiotice cefalosporine.

Autorii studiilor de mai sus subliniază natura neimunologică a rezultatelor pozitive obținute în urma testelor lui Coombs și insistă că aceste substanțe sunt capabile să provoace modificarea membranelor celulelor roșii din sânge, ca urmare a căreia eritrocitele pot adsorbi proteine ​​(în special, albumine), care sunt prezente în mod normal în plasma sanguină și nu posedă proprietăți ale anticorpilor. În plus, este posibil ca xenobioticul, adsorbit pe suprafața celulei, să servească drept legătură între membrana celulară și proteinele plasmatice.

Pentru interpretarea corectă a rezultatelor înființării testelor antiglobuline, trebuie luat în considerare și raportul cantitativ dintre eritrocitele tinere și cele mature din sângele periferic. S-a constatat că reticulocitele izolate din organism în perioada regenerării eritronului intensificat pot fi aglutinate de serul antiglobulinic.

Rezultat pozitiv al testului antiglobulinei direct De asemenea, este utilizat în diferite afecțiuni patologice însoțite de tulburări ale sistemului imunitar, procese inflamatorii care conduc la adsorbția nespecifică a anticorpilor cu specificitate diferită pe membranele eritrocitare. Acest lucru sugerează că moleculele Ig G nu interacționează cu antigenele eritrocitare specifice, ci sunt fixate doar pe suprafața celulelor studiate.

Trebuie avut în vedere faptul că la stabilirea testului Coombs în cazurile de boli caracterizate prin dezvoltarea disproteinemiei sau apariția paraproteinelor, un rezultat pozitiv se datorează prezenței proteinelor pe suprafața eritrocitelor care nu au proprietățile de anticorpi, ceea ce indică și o specificitate insuficientă a testelor antiglobuline în ceea ce privește natura proteinei detectate cu ajutorul acestora.

Astfel, după cum au arătat numeroase studii, rezultatele pozitive ale testelor antiglobuline directe și indirecte nu reprezintă o dovadă absolută a prezenței anticorpilor, deoarece reacțiile pozitive pot fi observate și în diferite condiții patologice care nu sunt asociate cu izosensibilizarea sau autosensibilizarea organismului. Prin urmare, doar o comparație a rezultatelor mai multor metode imunoserologice cu tabloul clinic al bolii ne permite să judecăm pe deplin procesul patologic în curs de dezvoltare.

Un test de antiglobulină indirect pozitiv cu un test direct negativ indică de obicei prezența aloanticorpilor liberi în serul de testat, asociate cu transfuzii de sânge sau sarcini anterioare.

Testul lui Coombs este adesea pozitiv în timpul exacerbării hemoglobinuriei paroxistice nocturne; un test Coombs pozitiv cu anti-C3 și anti-C3dg este un marker al bolii cu aglutinină rece.

În cazurile în care există un risc ridicat de dezvoltare a bolii hemolitice a nou-născutului, rezultatele testelor antiglobuline directe și indirecte sunt de mare importanță pentru stabilirea unui diagnostic (cel mai adesea în timpul sarcinii) și, dacă este necesar, monitorizarea dinamică a aspectului și modificării. în titrul de anticorpi. Cel mai adesea, boala hemolitică a nou-născutului este asociată cu incompatibilitatea dintre mamă și făt pentru antigenul D, mai rar pentru antigenele sistemului AB0 și chiar mai rar pentru alte antigene (C, c, K etc.). Anticorpii rezultați la, fiind, de regulă, anticorpi incompleti din clasa Ig G, sunt depistați clar într-un test indirect de antiglobulină. În această boală, titrul și specificitatea anticorpilor detectați corect stabilite sunt de mare importanță, deoarece există o anumită corelație între nivelul de anticorpi anti-eritrocitari din sângele unei femei gravide și un posibil prognostic al severității bolii hemolitice.

Testul indirect Coombs este, de asemenea, esențial în practica clinică pentru a asigura o terapie transfuzională sigură. Implementarea acestuia este o componentă obligatorie a studiilor imunohematologice ale donatorilor și ale diferitelor categorii de primitori, precum și a examinărilor de rutină ale tuturor pacienților din instituțiile medicale care ar putea avea nevoie de o transfuzie de sânge și componente ale acestuia.

Un test indirect de antiglobulină este utilizat în următoarele cazuri:

Pentru o determinare mai precisă a apartenenței Rh (antigenul D) cu rezultate neclare ale determinării factorului Rh prin alte metode (poliglucină, gelatină etc.);

Pentru a detecta antigene eritrocitare slabe (sisteme Kell, Duffy, Kidd, Lewis etc.) și anticorpi împotriva acestor antigene;

Pentru detectarea și identificarea anticorpilor aloimuni anti-eritrocitari, inclusiv a anticorpilor care provoacă reacții hemolitice post-transfuzie;

Pentru a determina prezența anticorpilor imunitari ai sistemului AB0 în complicațiile hemolitice transfuzie;

Ca test de compatibilitate pentru selecția individuală a sângelui transfuzat și a componentelor acestuia.

Astfel, testul Coombs este un test de diagnostic important utilizat în diverse domenii ale medicinei (hematologie, obstetrică, reumatologie, transfuziologie, diagnostic clinic și de laborator etc.). Cunoașterea caracteristicilor testului Coombs va contribui la creșterea fiabilității rezultatelor și va contribui la interpretarea corectă a datelor de laborator.

Literatură

1. Anticorpi. Metode / ed. D. Cathy. — M.: Mir, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Rahimov A.A., Gadzhiev A.B.. // Terapia transfuzională a anemiei: manual. ghid pentru medici. - M .: Prakt. medicina, 2005. - S. 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Levchenko L.B.// Transfuziologie. - 2006. - Nr. 2. - S. 39-62.

4. Donskov S.I.// Grupele sanguine ale sistemului Rhesus: teorie și practică. - M.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.Imunoserologie (documente normative) / comp. A.G. Bashlay, S.I. Donskov. — M.: VINITI RAN, 1998.

6.Cercetarea sistemului sanguin în practica clinică / ed. G.I. Kozintsa, V.A. Makarov. — M.: Triada-X, 1997.

7. Levin V.I. La mecanismul eritrodiezei și eritropoiezei în perioada anemiei acute posthemoragice: dr. dis. ...cad. Miere. Științe. - Minsk, 1968.

8. Rahimov A.A., Bairamalibeyli I.E.. // Fundamentele diagnosticului, prevenirii și tratamentului anemiei. - M .: GOU VUNMTs al Ministerului Sănătății al Federației Ruse, 2002. - S. 204-209.

9. Chumakova E.D.. // Probleme actuale de hematologie și transfuziologie: materiale ale Congresului VI al hematologilor și transfuziologilor din Republica Belarus, Minsk, 24-25 mai 2007 / ed. A.I. Svirnovsky, M.P. Potapnev. - Minsk: Centrul Republican Științific și Practic de Hematologie și Transfuziologie, 2007. - P. 50.

10. Coombs R., Mourant A., Race R. // Lancet. - 1945. - Vol. 2. - P. 15.

11. Freedman J. // J. Clin. Pathol. - 1979. - Vol. 32. - P. 1014-1018.

12. Holburn A.M. control de calitate. Metode în hematologie / ed. I. Cavill. - Edinburg: Churchill Livingstone, 1982. - Vol. 4. - P. 34-50.

13. Khan S.// CMAJ. - 2006. - Vol. 175, nr 8. - p. 919.

14. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Vol. 63 (suppl. 7). - P. 719-721.

15. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Vol. 63 (suppl. 7). - P. 716-718.

16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F.// Noua Engl. J. Med. —1976. — Vol. 277. - P. 123-125.

17. Muirhead E.E., GrovesM., Brian S. // J. Lab. Clin. Med. —1954. — Vol. 44. - P. 902-903.

18. Rosse W.F.//Hosp. Prac. - 1995. - N 105.

19. Voak D., Downie D., Mooreb. et al. //Biotestele Bull. - 1986. - Vol. 1. - P. 41-52.

20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. Mașini de spălat celule pentru teste antiglobuline. Testare replicată - o nouă metodă care demonstrează ineficiența unei mașini utilizate pe scară largă - Sorvall CW1-AF2: raport către DHSS Technical Branch, februarie 1991.

21. Williams M.E., Thomas D., Harman C.P. et al. //Agenți antimicrobieni și chimioterapie. -1985. - P. 125-127.

22. Zarandona J.M., Yazer M.H. // CMAJ. - 2006. - Vol. 174, nr 3. - P. 305-307.

Știri medicale. - 2008. - Nr. 3. - S. 33-36.

Atenţie! Articolul se adresează medicilor specialiști. Retipărirea acestui articol sau a fragmentelor sale pe Internet fără un hyperlink către sursa originală este considerată o încălcare a drepturilor de autor.

Testul Coombs este un test de laborator realizat prin influențarea hemaglutinării. Se bazează pe susceptibilitatea anticorpilor la imunoglobuline și elemente enzimatice, precum și pe capacitatea lor de a aglutina eritrocitele acoperite cu C3 sau Lg.

Diagnosticul direct al lui Coombs

Folosit pentru detectarea anticorpilor sau a componentelor complementului montate în exteriorul celulelor. Testul Coombs direct se realizează prin următorii pași.

Utilizarea unui astfel de test

Diagnosticul Direct Coombs este utilizat în anumite cazuri, cum ar fi:

• efecte de transfuzie;
• hemoliză autoimună;
• anemie hemolitică indusă de medicamente.

Testul Coombs indirect

Acest diagnostic face posibilă detectarea anticorpilor la celulele din ser, care este incubat, de regulă, cu eritrocite de tip donator 0, apoi se efectuează un test direct. Aplicați diagnosticul indirect Coombs în următoarele cazuri:

Cum să vă pregătiți pentru analiză

Există câteva reguli pentru pregătirea sondajului.

1. Dacă pacientul este un nou-născut, părinții trebuie să fie conștienți de faptul că testarea va ajuta la diagnosticarea HN (boala hemolitică a nou-născutului).
2. Dacă pacientul are suspiciuni de anemie hemolitică, trebuie explicat că analiza îi va permite să afle dacă este cauzată de tulburări de protecție, medicamente sau alți factori.
3. Testul Coombs, direct și indirect, nu face nicio restricție alimentară sau alimentară.
4. Este necesar să anunțați pacientul că va fi prelevat sânge dintr-o venă pentru examinare și, de asemenea, să îi spuneți când se va efectua exact puncția venoasă.
5. De asemenea, ar trebui să fiți avertizat cu privire la probabilitatea de disconfort în timpul perioadei de pansare a brațului și a procedurii în sine.
6. Medicamentele care pot afecta rezultatul probei trebuie întrerupte.

Aceste medicamente includ:

• "Streptomicină";
• "Metildopa";
• "Procainamidă";
• sulfonamide;
• „Melphalan”;
• "Chinidină";
• „Rifampin”;
• „Isoniazidă”;
• cefalosporine;
• "Hidralazina";
• "Clorpromazină";
• „Levodopa”;
• "Tetraciclină";
• "Difenilhidantoină";
• "Etosuximidă";
• "Penicilină";
• acid mefenamic.

Prelevarea de sânge se face dimineața pe stomacul gol.

Cum se desfășoară evenimentul

Testul Coombs se efectuează în următoarea ordine:

1. La efectuarea diagnosticului la un pacient adult, după puncție venoasă, sângele este prelevat în tuburi cu EDTA (etilendiaminotetraacetat).
2. De la nou-născut, sângele este prelevat din cordonul ombilical într-un pahar cu EDTA.
3. Zona de puncție este presată cu un tampon de bumbac până când sângerarea se oprește.
4. Când apare o vânătaie la locul puncției venoase, se prescriu comprese calde.
5. După o extragere de sânge, pacientului i se permite să revină la administrarea medicamentelor de sevraj.
6. Părinții nou-născutului trebuie informați că poate fi necesară o analiză secundară pentru a monitoriza dinamica anemiei.

Beneficiile testului Coombs

Un astfel de studiu are câteva avantaje, și anume:

Contra analizei

Testul Coombs pozitiv este o metodă destul de laborioasă de examinare, sugerând o precizie caracteristică a execuției. Când îl utilizați, se pot întâmpina anumite dificultăți, în special legate de interpretarea influențelor slab pozitive.

S-a stabilit că reacțiile eronate negative sau slab pozitive în producerea probelor Coombs pot fi consecințele spălării active nesatisfăcătoare a celulelor, slăbirii reactivului antiglobulinic prin reziduuri serice, precum și compuși cu aspect negras, pe care antiglobulina poate fi fixată, pierzându-și eficacitatea.

Testul Coombs are un alt dezavantaj - stabilitatea scăzută a reactivului antiglobulinei, a cărui achiziție și stocare au caracteristici individuale, ceea ce în mod similar face dificilă evaluarea numerică a efectului serului antiglobulinei asupra hemaglutinării.

Boli care pot fi depistate în timpul studiului

Diagnosticul lui Coombs face posibilă detectarea anumitor tipuri de boli, cum ar fi:

• stare de rău hemolitică a nou-născuților;
• diverse reacții de transfuzie;
• hemoliză autoimună;
• anemie hemolitică medicinală.

Până în prezent, testul Coombs este considerat un sistem de analiză a sângelui destul de popular atât la un adult, cât și la un nou-născut. Face posibilă identificarea multor boli diferite.

În mod normal, nu există anticorpi împotriva eritrocitelor în sânge.

Testul Coombs direct este un test cu antiglobulină (aglutinare cu gel, care permite detectarea anticorpilor bivalenți completi), care determină anticorpii de clasă IgG și componenta C3 a complementului pe suprafața eritrocitelor. De obicei, anticorpii detectați prin testul Coombs direct au o specificitate largă care nu este asociată cu un antigen bine stabilit. Un test Coombs direct pozitiv indică în mod clar prezența anemiei hemolitice la un pacient, deși nu toți pacienții cu un test antiglobulină direct pozitiv au această boală. Aproximativ 10% dintre pacienții cu anticorpi sau componente ale complementului pe membrana eritrocitară nu pot fi detectați printr-un test Coombs direct (test negativ), dar cu toate acestea suferă de anemie hemolitică autoimună. Pentru a clarifica specificitatea anticorpilor în astfel de cazuri, se folosesc teste cu eluția lor. Testul Coombs direct, pozitiv doar pentru complement, este de obicei asociat cu anticorpi IgM de tip rece. În acest caz, anticorpii IgM nu sunt prezenți pe eritrocite la temperatura bazală a corpului. Totuși, datorită faptului că anticorpii IgM fixează activ complementul, iar complementul rămâne pe eritrocite, în această formă de anemie hemolitică autoimună (boala aglutinină rece), testul Coombs va fi pozitiv doar pentru complement.

Testul Coombs direct este pozitiv în anemia hemolitică autoimună cauzată de anticorpi caldi, anemie autoimună medicamentoasă (la administrarea de metildopa, până la 20% dintre pacienți au o reacție pozitivă), anemie hemolitică de tip cu adsorbție de medicamente, anemie hemolitică de tip imunocomplex ( testul este pozitiv doar pentru C3), cu anemie hemolitică autoimună cauzată de anticorpi la rece - boala aglutinină la rece (testul este pozitiv doar pentru C3). Cu hemoglobinurie paroxistica rece, testul Coombs direct este negativ.

Testul Coombs indirect - un test indirect de antiglobulină (detectă anticorpi incompleti) vă permite să detectați anticorpi atipici în sânge, inclusiv aloanticorpi, la antigenele eritrocitare străine. Și-a primit numele (indirect) datorită faptului că se desfășoară în 2 etape. Inițial, serul sanguin al pacientului, care conține anticorpi incompleti, interacționează cu Ag diagnosticum corpuscular adăugat fără manifestări vizibile. În a doua etapă, serul antiglobulinic introdus interacționează cu anticorpi incompleti adsorbiți pe antigeni, cu apariția unui precipitat vizibil. Transfuzia de eritrocite omologi (alogene) sau sarcina sunt cele mai frecvente cauze ale acestor anticorpi anti-RBC. Combinația dintre un test Coombs indirect pozitiv cu un test direct negativ nu face nimic pentru a diagnostica anemie hemolitică autoimună. Un test Coombs indirect pozitiv provoacă anumite dificultăți în selectarea sângelui pentru transfuzie și potrivirea încrucișată cu sângele acumulat, dar nu are altă valoare diagnostică.