Primiți în același mod ca și alte seruri de diagnostic. Folosit pentru serotiparea salmonelelor în reacția de aglutinare.
Salmonella O- și H-monodiagnostice.Sunt suspensii de salmonelă ucise prin încălzire (O-diagnosticare) sau prin tratament cu formalină (diagnosticare H). Folosit pentru serodiagnosticul febrei tifoide în reacția Widal.
Bacteriofagii tipici ai salmonelelor.Folosit pentru fotografierea salmonellei.
Vaccinul anti-tifoid și anti-alcool tifoid îmbogățit cu antigenul Vi.Este utilizat pentru profilaxia activă specifică a febrei tifoide.
Bacteriofag polivalent tifoid.Disponibil sub formă de tablete cu o acoperire rezistentă la acid. Folosit pentru prevenirea de urgență a febrei tifoide.
Koli-bacterină.Conține celule vii uscate congelate E colitulpina M17, cu proprietăți antagonice pronunțate împotriva unui număr de bacterii intestinale patogene. Acestea sunt utilizate pentru normalizarea microflorei intestinale în caz de disbioză și tratamentul dizenteriei, în principal la copii.
Bifidumbacterin.Contine suspensia uscata prin congelare a celulelor vii B. bifidum.Folosit pentru tratarea infecțiilor intestinale cronice de etiologie necunoscută la copii șidizenterie.
Bifikol.Conține un amestec de bacterii vii uscate E colitulpina M17 și B. bifidum.Indicațiile de utilizare sunt aceleași.
Lactobacterin.Conține produse vitale de lactobacili. Disponibil sub formă de tabletă. Folosit pentru tratarea disbiozei la copii.
antibiotice:sulfonamide, peniciline semisintetice, cefalosporine de generația a II-a, cloramfenicol, tetracicline, fluorochinolone, polimixină.
Tema 13.3. Patogeni
TOXICOINFECȚII, INTOXICĂRI, ÎNCĂLCĂRI
ȘI ALTE INFECȚII INTESTINALE BACTERIALE
Plan
Un program
1. Proprietăți biologice ale agenților patogeni ai holerei, toxicinfectii și intoxicații alimentare. Patogenitatea lor, ecologia, caracteristicile infecției și epidemiologia bolilor cauzate.
2. Diagnosticare de laborator.
3. Medicamente diagnostice, preventive și terapeutice.
Demonstrație
1. Frumuri provenite din culturi pure de agenți patogeni de intoxicație alimentară a infecțiilor intestinale: Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Vibrio cholerae.Pata de Gram.
2. Medicamente diagnostice și terapeutice.
Atribuirea studenților
1. Microscop și frotiuri de schiță din culturi pure de infecții intestinale.
2. Diagnosticul bacteriologic al holerei.
2.1. Indicați materialul pentru cercetare.
2.2. Identificarea unei culturi pure a vibriilor izolați de la un pacient:
1) studierea proprietăților morfologice și tinctoriale: microscopul unui frotiu dintr-o cultură pură izolată de pacient;
2) pentru a studia proprietățile antigenice: să notăm rezultatele unei reacții de aglutinare detaliată cu 01-ser de diagnostic;
3) pentru a studia proprietățile biochimice: notați rezultatul testului hexaminic;
4) să determine sensibilitatea culturii selectate la bacteriofagii de diagnostic;
5) notați capacitatea de a crește pe un mediu cu poli-mixină;
6) emite o opinie.
3. Diagnosticul botulismului:
1) indicați materialul pentru studiu;
2) pentru a analiza rezultatele RIGA pentru a detecta toxina botulinică în serul sanguin al pacientului (reacția Boyden). Dă o concluzie.
4. Familiarizați-vă cu cei de la diagnosticare și medici
medicamente lactice.
Instrucțiuni
■ DIAGNOSTICA MICROBIOLOGICĂ A TOXICOINFECȚIILOR ALIMENTARE A NATURII BACTERIALE
Diagnosticul microbiologic al toxicoinfecțiilor provocate de alimente cauzate de Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp.
MATERIAL PENTRU CERCETARE: fecale, vărsături, spălarea stomacului pacientului, resturi alimentare - surse posibile și factori de transmitere a infecției.
METODE DIAGNOSTICE:
Produs prin însămânțare
Material pentru medii de diagnostic diferențiale și elective (Endo, agar sulfit bismut, etc.) pentru a izola o cultură pură de salmonella și Escherichia, precum și în apa de condensare într-o eprubetă cu agar nutritiv conos pentru identificarea bacteriilor din gen Proteus.După incubarea culturilor la 37 ° C timp de 20-24 ore, culoarea coloniilor pe plăci cu un mediu diferențial și prezența creșterii „târâtoare” caracteristică Proteus spp.,in vitro cu agar nutritiv teșit. Coloniile suspecte sunt subcultivate pe agar de nutrienți teși pentru a obține culturi pure și, în același timp, stabilesc o reacție indicativă de aglutinare cu sticlă folosind amestecuri de seruri de diagnostic. A doua zi, cu o cultură pură, a fost configurată o reacție detaliată de aglutinare cu serul monoreceptor corespunzător și s-a făcut inoculare pe medii variegate. Atunci când se izolează același serovar de Salmonella sau Escherichia de corpul bolnavilor și de un produs alimentar, se încheie o concluzie finală despre etiologia toxicozei transportate de alimente, sursa bolii. Dacă există o creștere „înfiorătoare” a agarului nutritiv înclinat din apa de condensare, o buclă este utilizată pentru a prelua materialul pentru prepararea căderii „agățate” pentru a stabili mobilitatea și frotiul, care este colorat folosind metoda Gram și microscopic. Apoi, o cultură pură este izolată, sunt determinate alte semne biochimice și se stabilește forma: P.vulgaris, P.mirabilis, P.morganiiși P.rettgeri.
O evaluare a rolului microorganismelor oportuniste în etiologia toxicoinfecțiilor transmise alimentar ar trebui argumentată strict pentru: a) excepții bacteriologice, serologice, epidemiologice și clinice de salmonella, dizenterie, holeră; b) selectarea tulpinilor identice de bacterii patogene condiționate din vărsături, lavaj gastric, mișcări intestinale, produse.
■ DIAGNOSTICA MICROBIOLOGICĂ A INTOXICĂRILOR ALIMENTARE A NATURII BACTERIALE
Diagnosticul microbiologic al intoxicației cu stafilococ alimentar
MATERIAL DE CERCETARE: vărsături, spălare gastrică, alimente suspecte.
METODE DIAGNOSTICE:
Metode de diagnostic expres: studii imunochimice, biochimice și moleculare.Studii imunochimice. Diagnosticul se bazează pe detectarea enterotoxinei în materialul de testare. Entero-Toxina Staphylococcus spp.extras cu soluție izotonică
romul de clorură de sodiu, apoi prezența sa și specificitatea serologică sunt determinate de o reacție de precipitare într-un gel cu seruri antitoxice imune A, B, C. Tehnica de configurare a reacției este descrisă mai sus (a se vedea Fig. 10.1.6). Se folosesc și aglutinarea din latex, ELISA, RIA etc.
Cercetări bacteriologice.Pentru a izola o cultură pură de stafilococ, materialul de testare, care poate conține bacterii viabile, este însămânțat în cupe cu ZHSA. Culturile pure obținute conform schemei (vezi subiectul 12.1) sunt testate pentru capacitatea lor de a produce enterotoxine. Pentru analiza epidemiologică a intoxicației cu stafilococ în masă, fagotiparea culturilor izolate se realizează folosind un set de fagi stafilococici.
Biotestare.Pentru a detecta enterotoxina, puteți utiliza un bioanaliză - hrăniți materialul studiat pentru puii care alăptează, în care enterotoxina stafilococică provoacă vărsături și diaree la 30-60 minute după hrănire.
Informații similare.
Medicament de diagnosticare. Conține anticorpi. Reprezintă serul din sânge al animalelor imunizate cu o cultură de Salmonella ucisă. Proiectat pentru identificarea serologică a bacteriilor din genul Salmonella în reacția de aglutinare pe sticlă. ser monoreceptor aglutinant pentru Salmonella (O) Afilierea de grup
Diagnosticianul. La pisică. obțineți în 3 etape: în primul rând alegeți salmonella (de exemplu S. typhimurium cu structura Ar O-1,4,5,12; Mi 1,2) este încălzită într-o baie de apă pentru a distruge flagelul H-Ag, ost. O-Ag doar 1,4,5,12. În a doua etapă, iepurii sunt hiper-imunizați cu restul de Salmonella O-Ag; O-1,4,5,12 At. Sunt formați la iepure. Este un ser polivalent. În etapa a 3-a, efectuăm epuizarea serului în funcție de Castellani. Pentru a face acest lucru, obțineți ser și adăugați preîncălzit în apă. O baie din același grup gri, de exemplu S.hudelberg o-45.12 Ar, o conexiune între Ar și restul O-1 At. Serul obținut este utilizat pentru sero-identificarea salmonelului în RA în stadiul 3 bact. analiză.
47 Ser polivalent adsorbit aglutinant la Shigella flexneri I-V.
48 Aglutinând receptorul de salmonelă adsorbită O-ser 9.
Medicament de diagnosticare. Conține anticorpi. Reprezintă serul din sânge al animalelor imunizate cu o cultură de Salmonella ucisă. Obținut prin metoda Castellani. Proiectat pentru identificarea serologică a bacteriilor din genul Salmonella în reacția de aglutinare pe sticlă.
50. A-aglutinant ser-O de salmonelă polivalentă adsorbită (grupele A, B, C, D, E).
Medicament de diagnosticare. Conține anticorpi împotriva O-antigenului. Reprezintă serul din sânge al animalelor imunizate cu o cultură de Salmonella ucisă. Obținut prin metoda Castellani. Proiectat pentru identificarea serologică a bacteriilor din gen Salmonella într-o reacție de aglutinare pe sticlă.
51 Aglutinând receptorul de salmonelă adsorbită H-ser d
Medicament de diagnosticare. Conține anticorpi pentru receptorul antigenului H d. Reprezintă serul din sânge al iepurilor imunizați cu cultura Salmonella ucisă. Obținut prin metoda Castellani. Proiectat pentru identificarea serologică a bacteriilor din genul Salmonella în reacția de aglutinare pe sticlă.
50. Aglutinând ser polivalent adsorbit la Shigella flexneri I-V.
Medicament de diagnosticare. Conține anticorpi. Ele sunt serul iepurilor imunizați cu suspensii vii formalizate ale Shigella, tipice tuturor semnelor. Atunci când interacționează cu microorganismele corespunzătoare, serurile provoacă aglutinarea lor. Proiectat pentru identificarea serologică a Shigella flexneri I-V. Serurile diagnostice de shigeloză sunt seruri de iepure adsorbite liofilizate care conțin anticorpi monoreceptori la 38 de antigene. Seruri polivalente sunt disponibile pentru opt grupuri de antigene. Preparatele sunt destinate identificării bacteriilor din genul Shigella în reacția de aglutinare. Serurile de shigeloză diagnostice au un titlu de anticorpi de cel puțin 1:40 în reacția de aglutinare. Folosind aceste seruri, orice bacterie Shigella poate fi determinată conform clasificării internaționale. Medicamentul este turnat în fiole de 2 ml. Se lasă într-o formă uscată. Perioada de valabilitate a zerului uscat monoreceptor este de 5 ani, zerul uscat polivalent este de 3 ani când este păstrat într-un loc uscat și întunecat la o temperatură de 4-80 ° C.
Preparatele sunt destinate identificării serologice a bacteriilor din genul Salmonella în reacția de aglutinare pe sticlă. Preparatele sunt seruri de iepure adsorbite imune care conțin aglutinine la antigene O și antigene Salmonella H. Medicamentele sunt eliberate sub formă de seruri O și H monovalente și polivalente.
Serurile polivalente din grupele principale (A, B, C, D, E) conțin anticorpi O împotriva antigenelor 1; 2; 3; 4; 5; 6 1; 6 2; 7; 8; 9; 10; 12; Vi; grupuri rare (F, G, H, J, I, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, X, Y, Z, 52, 53, 54, 55 , 57, 58, 59, 60, 61) conțin anticorpi O împotriva antigenelor: 11; 13, 22; 14, 24; şaisprezece; 17; optsprezece; 21; 23; 24; 25; 28; treizeci; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; cincizeci; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61.
Serurile H polivalente conțin anticorpi H împotriva complexelor antigenice înrudite: gm, gp, gq, gpu, fg, fgs, gst, gt, mt, gmt, gms; Z4 4 Z 24; Z4 4 Z 32; I-1,2; 1.5; 1.6; 1.7.
Titrul anticorpilor specifici în serurile O și H și polivalentul H nu este mai mic decât 1:80, iar polivalentul O - 1:40.
Setul de reactiv „Salmonella diagnostic adsorbit seruri O-polivalente pentru reacția de aglutinare” este destinat identificării prin reacția de aglutinare (RA) pe o lamelă de bacterii din genul Salmonella izolată de materialul biologic uman (urină, mișcări intestinale, lavaj gastric, vărsături).
Au fost descrise mai mult de 2400 de serovars de salmonelă patogenă, care determină gastroenterită acută, forme asemănătoare tifoidelor și septicopiemice ale bolii la om, combinate sub denumirea de salmoneloză. Principalii agenți cauzali ai salmonelozei sunt Salmonella serovars enteritidis, typhi murium, cholerae-suis, haifa etc.
Setul de reactivi „Ser de diagnostic de salmonelă adsorbat seruri O-polivalente pentru reacția de aglutinare” este conceput pentru a identifica astfel de bacterii pentru a prescrie tratamentul corect pentru pacient.
Setul este disponibil în 4 opțiuni de configurare:
Setul 1 Salmonella polivalent O-ser din grupele principale (A, B, C,D, E):
Set nr. 1/1 - Ser-O Salmonella polivalent din principalele grupuri, uscat;
Set nr. 1/2 - Ser O-Salmonella polivalent din grupele principale, lichid;
Setul 2 Salmonella polivalent O-ser din grupe rare:
Set nr. 2/1 - Salmonella polivalentă O-ser din grupe rare, uscat;
Set nr. 2/2 - Salmonella polivalentă O-ser din grupe rare, lichid.
Fiecare opțiune de configurare în 2 versiuni.
COMPOZIȚIE ȘI SET COMPLET
|
Executarea 1 |
Executarea 2 |
|||
|
Setul 1 Salmonella polivalent O-ser din grupele principale (A, B, C, D, E) |
||||
|
Set nr. 1/1 |
ser de sânge adsorbit imun uscat al unui iepure sau al unui berbec care conține O-aglutinine împotriva antigenelor 1; 2; 3,4; 5; 6,1; 6,2; 7; 8; 9; 10; 12, Vi; inactivat; masa amorfă de culoare albă sau cremă |
5 fl. (2,0 ml fiecare) |
1 fl. (2,0 ml fiecare) |
|
|
Set nr. 1/2 |
ser de sânge adsorbit cu imunitate lichidă a unui iepure sau a unui berbec care conține O-agglutinine împotriva antigenelor 1; 2; 3,4; 5; 6,1; 6,2; 7; 8; 9; 10; 12, Vi; inactivat; lichid incolor sau roz galben |
5 fl. (2,0 ml fiecare) |
1 fl. (2,0 ml fiecare) |
|
|
Setul 2 Salmonella polivalent O-ser din grupe rare |
||||
|
Set nr 2/1 |
ser imun adsorbit imun uscat al unui iepure sau al unui berbec din următoarele grupuri (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V, X, Y , Z, 52.53.54 "55.57, 58, 59, 60, 61) conținând O-agglutinine împotriva antigenelor 11; 13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; 18; 21; 28; 30; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; 50; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61); inactivat masă amorfă de culoare albă sau cremă |
5 fl. (2,0 ml fiecare) |
1 fl. (2,0 ml fiecare) |
|
|
Set nr. 2/2 |
ser de sânge adsorbit cu imunitate lichidă a unui iepure sau a unui ram din următoarele grupuri (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V, X, Y , Z, 52.53.54 "55.57, 58, 59, 60, 61) conținând O-agglutinine împotriva antigenelor 11; 13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; 18; 21; 28; 30; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; 50; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61); inactivat lichid incolor sau roz galben |
5 fl. (2,0 ml fiecare) |
1 fl. (2,0 ml fiecare) |
|
Componentele kitului sunt ambalate într-o cutie; instrucțiunile de utilizare sunt incluse în cutie; o schemă redusă a structurii antigenice a bacteriilor din grupul salmonella .
CARACTERISTICI CHEIE A CONSUMATORILOR
Variantele de bază ale seturilor kit sunt proiectate pentru cercetarea a 200 (versiunea 1) sau 40 probe (versiunea 2).
PRINCIPIUL DE FUNCȚIONARE
Serurile adsorbite conțin anticorpi care aglutinează culturi de salmonelă care conțin antigeni O omologi și nu aglutinează culturi de salmonella care conțin antigene O heterologe.
Eșantioane de cercetare
Cultura este studiată, izolată în timpul studiilor bacteriologice din material biologic (urină, mișcări intestinale, spălare gastrică, vărsături) și cultivată în eprubete pe agar nutritiv cosit timp de 18-20 de ore la o temperatură de 37 ° C.
Depozitarea culturii selectate pe agar nutritiv este permisă la o temperatură de +2 - + 8 timp de 2 zile.
Colectarea, depozitarea și prepararea materialului biologic uman ar trebui să fie efectuate în conformitate cu GOST R 53079.4-2008 „Asigurarea calității cercetărilor clinice de laborator”, MU 4.2.2723-10 „Diagnosticul de laborator al salmonelei, detectarea salmonelelor în produsele alimentare și obiectele de mediu”.
CARACTERISTICI ANALITICE ȘI DIAGNOSTICE
Activitate specifică:
Sensibilitate analitică: determinată cu tulpini omologe de teste muzeale de Salmonella și este 100%
Specificitatea analitică : definit cu tulpini de teste muzeale heterologe din Salmonella și este 100%
Reproductibilitatea rezultatelor este de 100%.
Sensibilitatea diagnosticului (cu un nivel de încredere de 95%) a fost:
Specificitatea diagnosticului (cu un nivel de încredere de 95%) a fost:
Tulpini de test pentru muzeul Salmonella - 98,07% -100%;
Culturi de Salmonella izolate din materialul clinic al pacienților - 98,25% -100%.
MASURI DE PRECAUTIE
Trusa este sigură din punct de vedere biologic, cu toate acestea, probele de testare trebuie manipulate ca material potențial infectat.
Precauții atunci când lucrați cu trusa - respectarea regulilor "Instrucțiuni pentru prevenirea răspândirii bolilor infecțioase atunci când lucrați în laboratoarele de diagnostic clinic ale instituțiilor medicale" (Aprobat de Ministerul Sănătății al URSS la 17 ianuarie 1991), GOST R 52905-2007 (ISO 15190: 2003).
Un set de reactivi, în conformitate cu SanPiN 2.1.7.2790-10 „Cerințe sanitare și epidemiologice pentru tratarea deșeurilor medicale” se referă la clasa B (deșeuri periculoase epidemiologic).
Eliminarea sau distrugerea, dezinfectarea truselor de reactivi trebuie efectuată în conformitate cu prevederile SanPiN 2.1.7.2790-10 „Cerințe sanitare și epidemiologice pentru tratarea deșeurilor medicale” și MU 287-113 „Orientări pentru dezinfectarea, curățarea pre-sterilizare și sterilizarea dispozitivelor medicale.”
MOD DE APLICARE
Echipamente și materiale (pentru setare "manuală")
Cronometru
Frigiderul cu un regim de temperatură de 2-8 0 C;
Pipete semiautomate cu domenii de operare: 5-50 μl, 20-200 μl;
Sfaturi de unică folosință pentru pipetele indicate;
Containere pentru deșeuri lichide și solide;
Mănuși din cauciuc sau din latex, dezinfectante;
Bucla bacteriologică;
Glisiere din sticlă;
Lupa cu mărire (2x);
0,9% soluție de clorură de sodiu;
Termostat cu aer uscat, menținând temperatura (37 ± 1) ° С;
70% soluție de alcool etilic și 6% soluție de peroxid de hidrogen (dezinfectanți) sau soluții ale altor dezinfectanți aprobați pentru SP 1.32322-08.
MOD DE APLICARE
Setarea RA pe sticlă
Salmonella polivalentă O-ser
Zerul uscat este dizolvat în 2 ml dintr-o soluție apoasă 0,9% de clorură de sodiu
Pe o lamă de sticlă se aplică o picătură (aproximativ 50 µl) de ser și o picătură de soluție apoasă 0,9% de clorură de sodiu. O cultură identificabilă cultivată în epruvete pe agar nutritiv cosit timp de 18-20 ore la o temperatură de 37 ° C este îndepărtată din vârful agarului cu o buclă, aplicată pe o lamelă de sticlă în apropierea unei picături de 0,9% soluție apoasă de clorură de sodiu și emulsionată (control pentru absența spontană aglutinare). În absența aglutinării spontane, manipularea se repetă într-o picătură de ser O - formând o suspensie opacă uniformă. Analiza se efectuează timp de 1-2 minute, balansând ușor paharul. O suspensie omogenă indică un rezultat negativ.
În prezența aglutininelor, un aglutinat floculant apare într-o picătură de ser în picătură de ser pentru tulpina studiată.
Contabilitate produce rezultate RAvizual folosind o lupă cu mărire (2x) conform sistemului cu patru creste
Rezultatele RA sunt luate în considerare și evaluate astfel:
Un aglutinat distinct, cu iluminare completă a unui lichid într-o picătură (100%).
Aglutinat distinct pe fondul unui lichid turbid (75%)
Ușor aglutinat împotriva unui lichid tulbure (50%)
Urme de aglutinat, lichidul din picătură este tulbure (25%)
(-) - rezultat negativ, lichid turbid omogen într-o picătură (0%).
RA cu ser de diagnostic este considerat numai cu un rezultat negativ al controlului spontan aglutinării.
Cultura studiată este atribuită grupei O corespunzătoare dacă RA este obținută pe sticlă cu ser polivalent din această grupă nu mai mică de (+++).
TERMEN DE VALABILITATE
Set nr. 1/1, nr. 1/2. O-ser Salmonella polivalent, uscat - 3 ani de la data acceptării producătorului OPF.
Set nr. 2/1, nr. 2/2. Salmonella polivalent O-ser, lichid - 1 an de la data acceptării producătorului OPF.
DEPOZITARE ȘI TRANSPORT
Depozitare
În ambalajul producătorului la o temperatură de la 2 ° C până la 8 ° C. Nu este permisă înghețarea.
După deschiderea ambalajelor, reactivii neutilizați pot fi depozitați în ambalaje bine închise la o temperatură de 2 până la 8 ° C timp de o lună.
Transport
La o temperatură de 2 până la 8 ° C, toate tipurile de transport în vehicule acoperite în conformitate cu normele de transport aplicabile acestui tip de transport. Nu este permisă înghețarea. Transportul la o temperatură de la 9 ° C la 25 ° C timp de 14 zile este permis.
TERMENI DE VACAȚIE
Pentru unitățile de asistență medicală.
