Vaccinuri împotriva bronșitei infecțioase de pui și a bolii Gumborough în Rusia. Boala bursală infecțioasă (boala Gumboro)

Daca nu intelegi religia in adancul ei (wafos), daca nu traiesti dupa ea, atunci evlavia (trosnitul) se transforma intr-o boala psihica, de altfel, intr-o boala cumplita.Dar pentru multi, religia este o lupta, anxietate si stres. Prin urmare, mulți oameni „religiosi” sunt considerați oameni nefericiți,

Boala infecțioasă de bursă a găinilor

Infectioza Bursita gallinarum (boala Gumboro) Boala virala acuta a gainilor si curcanilor, predominant in varsta de 2-15 saptamani, caracterizata prin inflamarea bursei, articulatiilor, intestinelor si hemoragii interne.

REFERINȚĂ ISTORICĂ- pentru prima dată boala a fost înregistrată în 1956 în județul Gumboro (SUA). În 1962, Kostrov a descris Gumborough drept o boală. Winterfeld și Hitchner (1962) au izolat un virus de la puii bolnavi care a provocat nefroz-nefrită la puii de carne bolnavi. Prin urmare, uneori această boală se numește nefroso-nefrită. Mai târziu, Carnayup (1965) a demonstrat că simptomele nefroso-nefritei sunt concomitente, modificările principale și permanente se găsesc în bursa țesăturii și, prin urmare, boala a fost numită bursită infecțioasă.

Boala este răspândită în multe țări din America, Europa, Asia, unde se dezvoltă creșterea industrială a păsărilor. Datele serologice arată că ratele de infecție în efective variază de la 2 la 100%. Și motivul pentru aceasta este importul constant de păsări de curte.

Agent cauzal- Virus care conține ARN din genul Aviovirus din familia Reoviridae (reovirusuri). Dimensiunea virionului este de 70-75 nm. Când embrionii de 9 zile sunt infectați în sacul vitelin, virusul provoacă moartea lor după 6 zile. Pe lângă întârzierea creșterii, provoacă

apariția edemului, focarelor necrozante în ficat, care sunt tipice pentru toate virusurile din acest grup. La 3 zile de la introducerea materialului vaccinat în punga fibroasă, apar modificări care sunt caracteristice infecției naturale. În cultura fibroblastelor embrionului de pui, virusul provoacă un efect citopatic. La o pasăre recuperată, se formează anticorpi de neutralizare și precipitare.

REZISTENTA - virusul este rezistent la eter, cloramina iar pH-ul 2,0 este sensibil la tripsina. În interior, virusul persistă în așternut timp de 52 de zile. La 56 ° C, nu moare într-o oră. Soluția de cloramină (0,5%) inactivează virusul în 10 minute, formaldehida (0,5%) în 6 ore.

DATE EPISOOTOLOGICE- puii de toate vârstele sunt sensibili la agentul patogen, dar mai ales puii de carne cu vârsta cuprinsă între 2-15 săptămâni. Cei mai sensibili sunt puii de 3-6 saptamani din rasa White Leghorn. La puii adulți, boala este asimptomatică.

Sursa agentului cauzal al infecției sunt puii bolnavi care secretă virusul cu excremente.

Bursita infecțioasă este o boală extrem de contagioasă care se transmite ușor prin plasarea compactă a păsărilor. Puii se infectează prin furaje contaminate, apă. Nu este exclusă o cale verticală de transmitere a virusului cu ouă infectate. Articolele de îngrijire infectate, echipamentele, îmbrăcămintea, personalul joacă un anumit rol în transmiterea agentului patogen.

S-a dovedit posibilitatea răspândirii virusului prin aer. Rezervorul agentului patogen poate fi gândacii de făină.

În focarele epizootice proaspete, boala evoluează acut și subacut, iar în focarele staționare este cronică și asimptomatică. Într-o serie de ferme, printre păsări, se înregistrează mai ales subinfectia imunizatoare.

PATOGENEZĂ- constă în înfrângerea țesuturilor limfoide și, în primul rând, sunt distruse limfocitele pungii de fabricație, splina, glandele cecale ale proceselor oarbe. Virusul pătrunde în tubul digestiv și, după 24-48 de ore, se localizează în bursă, afectând limfocitele B.

SEMNELE CLINICE- perioada de incubatie este de 1-2 zile. Apare la puii sub vârsta de 3 săptămâni sub formă de imunosupresie, care se manifestă prin sensibilitate crescută la infecțiile bacteriene.

Poate fi acută în primele 5-7 zile după boală la puii cu vârsta cuprinsă între 3 și 6 săptămâni. În cazul păsărilor de curte cu rezistență scăzută, mortalitatea poate ajunge la 90%.

Unul dintre primele semne este diareea, cu eliberare de excremente lichefiate galbene, sau mucoase-apoase, albe, sunt perturbate.

Apoi apare o apatie bruscă, tremur, semne de deteriorare a sistemului nervos. Pasărea își pierde curând capacitatea de a se mișca și moare în stare de prosternare.

Mortalitate maximă la 3-4 zile de la debutul focarului,

atunci rata mortalității scade.

Odată cu cursul bolii 6-8 zile, incidența este de 10-20% din pasăre, rata mortalității este de 1-15%.

Modificările hematologice se caracterizează prin limfopenie și eritrocitoză. Pentru 2 zile de boala numarul total de leucocite scade, in a 5-a zi creste si atinge maxim in a 7-a zi a domeniului de infectie.

PATOLOGIESCHIMBĂRI- cadavrele sunt bine hrănite, dar mușchii sunt deshidratați și palizi, gușa este goală, dezvăluie multiple hemoragii punctate și cu benzi, mai ales de multe ori sub pielea coapsei; mușchii sunt violet închis.

Punga de țesătură este mult crescută în volum, de peste 2 ori, conține un transudat asemănător gelatinei; în pliurile pungii există suprapuneri fibrinoase, iar în cazurile severe, lichid cu sânge.

Se notează umflarea ficatului, focarele necrotice, atrofia splinei. Pancreasul este modificat, nefroză. În stadiul final al bolii, apar edemul renal și atrofia bursei. Hemoragii parțiale cu benzi în mușchii scheletici degenerați ai miocardului, membranelor seroase, stomacului glandular și intestinelor.

Cele mai frecvente modificări histologice sunt necroza

elemente limfoide ale bursei, timusului, splinei, degenerescenta renala.

DIAGNOSTIC- Bursita infecțioasă este o infecție greu de detectat, care se răspândește neobservată, este mascata de alte boli și tulburări fiziologice, și doar într-un curs tipic este relativ ușor de diagnosticat prin semne clinice și patologice. Acestea țin cont de rata mare de incidență, răspândirea rapidă și re-imbolnavirea în 5-7 zile. Diagnosticul poate fi confirmat prin detectarea modificărilor caracteristice în punga de fabricație.

Pentru diagnosticul final se efectuează studii histologice și se efectuează un biotest prin infectarea embrionilor de pui de 9 zile pe membrana corioalantoidiană. Embrionii mor în 3-5 zile după infectare.

Virusul este identificat în RN, RDP și ELISA.

DIAGNOSTIC DIFERENTIAT- exclude coccidioza, otrăvirea, bronșita infecțioasă, sindromul hemoragic, micozele, boala Newcastle.

TRATAMENT- nedezvoltat.

IMUNITATE- folosiți vaccinuri vii și inactivate din tulpina BG (boala Gumboro), IBD (boala infecțioasă bursală), Winterfield-2512.

Primul vaccin se administrează de două ori la vârsta de 7-21 de zile cu un interval de 10-14 zile prin metoda băutării. A doua oară la vârsta de 110-120 de zile

o dată intramuscular în zona mușchiului pectoral sau în coapsă într-un volum de 0,5 ml. Imunitatea apare la 14-21 de zile după vaccinare și durează până la un an.

În practica străină, un vaccin dintr-o tulpină atenuată a virusului bursitei infecțioase este utilizat cu apă de băut și aerosolizat. Din vaccinuri străine, se pot folosi Nobilis Gumboro D78 și 228E. De asemenea, a fost dezvoltat un vaccin inactivat, Nobilis Gumboro Inac.

MĂSURI DE PREVENIRE ȘI CONTROL- efectuează măsuri generale sanitare veterinare pentru prevenirea introducerii agentului patogen în fermă.

Creșterea tânără a fiecărui lot tehnologic este crescută izolat. Starea de rezistență a păsărilor de curte este monitorizată prin hrănire și întreținere țintită.

Aerul care intră în casă este curățat cu filtre și dezinfectat cu raze ultraviolete.

Când apare o bursită infecțioasă, se impun restricții. Pasărea bolnavă și bănuitoare este distrusă. Unul sănătos este vaccinat.

Spațiile sunt dezinfectate temeinic cu soluții de sodă caustică, înălbitor (2-3%), aerosoli de preparate cu iod.

Daca boala nu poate fi oprita prin masuri generale veterinare si sanitare, se opreste incubarea oualor la ferma si se iau masuri sanitare suplimentare.

Nu există limită de timp pentru ridicarea restricției, acestea sunt stabilite de medicii veterinari, deoarece este dificil să scapi de această boală, din cauza dezvoltării rapide a acestei boli într-una staționară.

Informații generale despre boală

Boala infecțioasă de bursă (IBD, boala Gumboro, bursita infecțioasă a găinilor) este o boală virală foarte contagioasă, puțin studiată a găinilor de 2-15 săptămâni, caracterizată prin leziuni ale bursei Fabrice, nefroz-nefrită, hemoragii intramusculare și diaree. Boala, înregistrată pentru prima dată în județul Gumboro (Delaware, SUA) în 1957, s-a răspândit în multe țări din America, Asia, Africa, inclusiv țările CSI. Din 1991, boala a fost înregistrată în Republica Belarus.

Boala infecțioasă a burselor este răspândită în principal în fermele industriale de păsări. Motivul pentru aceasta este importul constant de păsări de curte. Cel mai des sunt afectate păsările cu vârsta de 3-6 săptămâni. Cele mai timpurii focare au fost raportate la pui de 11 zile, iar cele mai recente la vârsta de 84 de zile. Rata de incidență ajunge la 100%, rata mortalității este de 20-40% în medie. Sursa de infecție este o pasăre bolnavă și recuperată, principala cale de răspândire a virusului este aerogenă. Factori de transmitere: produse de sacrificare a păsărilor de curte, furaje contaminate, apă, îmbrăcăminte și încălțăminte ale însoțitorilor. Distingeți cursul acut, subacut și cronic al bolii. Când găinile de 3-6 săptămâni sunt infectate, boala este de obicei acută și subacută. Când puii se îmbolnăvesc până la vârsta de 3 săptămâni, care nu conțin anticorpi materni, se dezvoltă o formă latentă (subclinică) a bolii.

Prejudiciul economic cauzat de boală se datorează morții găinilor, scăderii creșterii în greutate corporală și creșterii procentului de respingere a păsărilor și a carcaselor. Virusul are un efect imunosupresiv pronunțat, afectând selectiv unul dintre organele centrale ale sistemului imunitar al păsării - bursa Fabrice. Ca urmare, eficacitatea vaccinărilor împotriva laringotraheitei infecțioase, a bolii Newcastle, a bronșitei infecțioase, a bolii Marek scade și sunt activate infecțiile secundare.

Majoritatea găinilor infectați cu virusul bolii infecțioase bursale prezintă semne de afectare hepatică, iar în timpul examinării bacteriologice a organului, agentul cauzal al salmonelozei este izolat. Pierderile economice în fermele nefavorabile pentru IBD cresc semnificativ din cauza manifestării complicațiilor: dermatită cu leziuni necrotice extinse ale foliculilor de pene și piele în spate și aripi, se observă adesea hepatită și enterită necrotică, incidența colibacilozei, a bolii Marek, a eimeriozei în pui crește. Pericolul imunosupresiei acestui virus constă nu numai în scăderea răspunsului imun al organismului păsării, ci și în faptul că anticorpii produși la diferiți antigeni în perioada bolii și după aceasta sunt defecte funcțional.

Virusul a fost descoperit și descris pentru prima dată ca agent patogen independent în 1962. Conform clasificării moderne, aparține familiei Birnaviridae.

Stabilitate.

Virusul este rezistent la eter, cloroform și radiații UV. La o temperatură de + 56 ° C, durează 5 ore, la + 60 ° C - 30 de minute și la 30 ° C în prezența de 0,5% fenol - timp de 1 oră. Când este expus la o soluție de formol 0,5%, acesta se inactivează în 6 ore, cu preparate cu iod - în 2 minute, 0,5% cloramină - în 10 minute.

Variabilitatea și relația antigenică.

Au fost dezvăluite 2 serotipuri de virus: Cu-1 (conține proteine ​​VP-1, VP-2, VP-3, VP-4 și VPX), izolate de la pui și 23/82 (conține proteine ​​VP-1, VPX, VP-3 și VP-4) izolate din păsări de curcan. Relația antigenică a acestor serotipuri nu depășește 10-30%.

Spectrul de patogenitate.

În condiții naturale, virusul IBD afectează puii de toate rasele, dar cei mai grav bolnavi pui din rasa White Leghorn. Cea mai sensibilă pasăre este la vârsta de 3-6 săptămâni. La infectarea găinilor ouătoare și, de asemenea, a găinilor de 1-10 zile, nu există simptome ale bolii.

Localizarea virusului.

În a 3-a zi după infectarea experimentală a găinilor de 3-5 săptămâni, virusul se acumulează în bursa Fabricii, splina și într-o concentrație mai mică - în creier și sânge. La puii de o zi, la 3 zile de la inocularea virusului, concentrația sa mare a fost observată în bursa Fabritius, ficat și rinichi. Cu infecția experimentală a găinilor, virusul poate fi izolat în 10 zile, cu toate acestea, modificările patomorfologice ale bursei Fabritius persistă timp de 10 săptămâni după infectare.

Activitate antigenică.

Deja în a 21-a zi după infectarea cu virusul puilor de 3-5 săptămâni, în serul sanguin sunt detectați anticorpi neutralizanți ai virusului (în titruri de până la 1: 718) și precipitanți (în titruri de până la 1: 640). Anticorpii la găinile ouătoare sunt transmise descendenților pe cale transovariană. În serul sanguin al găinilor obținut de la găini imuni, anticorpii antivirali specifici sunt detectați în decurs de 3-4 săptămâni de la ecloziune.

Infecție experimentală.

Infecția experimentală se efectuează pe pui în vârstă de 20-30 de zile prin inocularea de material viral pe conjunctivă, precum și pe cale orală. Infecția este însoțită de dezvoltarea semnelor clinice și a modificărilor patologice caracteristice acestei boli la păsări.

În cazul infecției intraperitoneale și intracerebrale a șoarecilor albi în vârstă de 1-3 zile cu tulpina Becht, s-au observat mâncărimi, ataxie, comă și encefalită limfocitară nesupurată în creier. Este posibilă infecția intracerebrală a șobolanilor și hamsterilor.

Infecția cu virusul curcanului este însoțită de formarea de anticorpi neutralizanți și precipitatori în absența semnelor clinice ale bolii. Porumbeii, gâștele, prepelițele și rațele nu sunt sensibile la această infecție.

Cultivare.

Virusul este cultivat în embrioni de pui (CE), lipsiți de anticorpi materni, atunci când este infectat în cavitatea alantoidiană sau pe membrana corion-alantoidiană. Moartea embrionilor are loc la 3-8 zile de la infectare.

Virusul se reproduce bine în cultura de celule de rinichi de embrioni de pui, provocând CPP în a 3-5-a zi după infectare. În cultura fibroblastelor TBE, virusul formează plăci. Posibilitatea cultivării virusului într-o cultură continuă de celule MA-104, Vero a fost demonstrată.

Proprietăți hemaglutinante.

În condiții normale, fără un tratament special prealabil, virusul nu are proprietăți hemaglutinante.

Patogeneza

Patogenia bolii bursale infecțioase nu este pe deplin înțeleasă. S-a constatat că celulele-ținte pentru reproducerea virusului sunt limfocitele bursei din fabrică de găini. Limfocitele B, purtătoare de imunoglobuline de clasa M la suprafață, s-au dovedit a fi foarte sensibile la virus.Virusul are un efect citopatic pronunțat, provocând necroza nodulilor limfoizi și procese inflamatorii în țesutul interstițial al bursei Fabricius. Moartea unui număr mare de elemente limfoide determină dezvoltarea imunodeficienței secundare la o pasăre recuperată.

S-a demonstrat, de asemenea, că evoluția latentă a IBD este însoțită de fenomene de atrofie și delimpatizare a bursei Fabritius pe fondul absenței sau manifestării foarte slabe a reacțiilor inflamatorii micro și macrofage în interstițiul organului. Această formă a bolii se caracterizează și prin dezvoltarea unei stări imunosupresoare la pui, asociată cu fenomenele de necroză a limfocitelor B.

Din punct de vedere morfologic, necroza limfocitară este relevată de fenomenele de cariopicnoză, cariorexie, vacuolizare a citoplasmei cu formarea de corpuri apoptotice. Apoptoza, spre deosebire de necroză, nu provoacă un răspuns inflamator pronunțat. Fenomenele de necroză a limfocitelor B la puii de găină cu forma subclinică a bolii Gumboro se găsesc nu numai în bursa Fabritius, ci și în splină, amigdalele cecale și sângele periferic.

Patogenia bolii depinde și de efectele complexelor imune care circulă limfocitelor infectate. Hemoragiile în mușchii scheletici, ficat și alte organe sunt cauzate de deteriorarea peretelui vaselor de sânge. Prezența uratului în rinichi și o creștere a acidului uric în sânge indică leziuni renale. Activitatea crescută a lactat dehidrogenazei și glutamat oxalat transaminazei serice confirmă afectarea ficatului.

Semne clinice

Perioada de incubație a bolii infecțioase de bursă este scurtă. Odată cu infecția experimentală a găinilor, semnele clinice apar după 2-3 zile. Boala poate fi acută, subacută și latentă, în funcție de starea imunitară a animalelor. În grupurile susceptibile la boli, de regulă, rata de incidență poate ajunge la 100%. În cursul acut, boala durează de obicei 4-8 zile.

Un simptom caracteristic al IBD este diareea, însoțită de scurgerea de excremente apoase, de culoare galben-albicioasă. La puii bolnavi, se observă depresie, iar într-o etapă ulterioară - tremur al capului și gâtului, comă. Morbiditatea și mortalitatea cresc rapid și ating un maxim în a 3-4-a zi de boală. Semnele distinctive ale bolii sunt brușterea și morbiditatea ridicată, recuperarea rapidă a animalelor. Mortalitatea poate ajunge la 20-40%. La eclozarea ulterioară a puilor, focarele recurente sunt mai puțin severe și adesea trec neobservate.

În ultimii ani, numărul focarelor de boală Gumboro latentă a crescut semnificativ. În același timp, infecția găinilor duce la dezvoltarea unei stări de imunodeficiență la păsări din cauza necrozei limfocitelor B. Ca urmare, eficiența vaccinărilor împotriva unui număr de boli virale este redusă. Au fost raportate focare de boli respiratorii cronice, ducând la dezvoltarea sindromului de umflare a capului. Microflora saprofită este adesea izolată din țesuturile afectate: coci, pseudomonas etc.

Modificări patologice

Puii morți sunt de obicei bine hrăniți. La autopsie se observă semne de deshidratare și anemie. Gușa este goală. Modificările bursei lui Fabricius sunt pronunțate și foarte naturale, ale căror leziuni se găsesc în cazuri de infecție asimptomatică. Organul este mărit de 1,5-2,5 ori. Membrana seroasă este de culoare gri-gălbuie. Membrana mucoasă este edematoasă, înroșită, cu hemoragii. În lumenul bursei dintre pliurile mucoasei se găsește exudat seros-fibrinos, în cazuri severe - exsudat hemoragic și cheaguri de fibrină asemănătoare brânzei. Se remarcă atrofia timusului, aplazia măduvei osoase roșii, amigdalele esofagiene și cecum, inflamația sero-hemoragică a splinei.

În muşchii pectorali, pe partea medială a coapselor şi a aripilor, se găsesc hemoragii punctiforme şi pete. Ficatul poate fi ușor mărit, la suprafață sunt vizibile urme ale coastelor. Rinichii sunt mariti, de la gri deschis la maro inchis, cu un model clar de tubuli si uretere umplute cu urati. În plus, se remarcă enterita catarală, hemoragii în membrana mucoasă a stomacului glandular și în amigdalele cefalice.

La examinarea histologică a bursei Fabrice în perioada inițială se observă necroza limfocitelor, iar apoi a stromei reticulare cu formarea de detritus necrotic în majoritatea nodulilor limfoizi. Pot fi detectați noduli atrofiați, structuri glandulare și chisturi. În timus la debutul bolii se observă delimfotizarea stratului cortical, epuizarea limfocitelor în zona cerebrală cu creșterea simultană a numărului și dimensiunii corpurilor lui Gassal și hiperplazia celulelor reticulare. În măduva osoasă roșie se constată o scădere a numărului total de elemente celulare și o activare a reacției macrofagelor. În splina puilor bolnavi se detectează necroza limfocitelor individuale în cuplurile periarteriale (limfocitele T) și nodulii limfoizi (limfocitele B), hiperemia vasculară cu pulpă roșie, reacțiile micro și macrofage. Modificări similare se găsesc în amigdalele esofagiene și cecum.

1. Inflamația sero-hemoragică sau fibrinos-necrotică a bursei lui Fabricius.

2. Inflamația sero-hemoragică a splinei.

3. Atrofia timusului, măduvei osoase, amigdalelor esofagiene și cecumului.

4. Hemoragii punctiforme și pete în mușchii coapselor și ai aripilor (din partea medială), în tegumentele seroase.

5. Degenerescenta granulara a ficatului si rinichilor, debordare cu uretere.

6. Pericardită sero-fibrinoasă, aerozaculită, pleuroperitonite, perihepatită (complicație).

7. Histo: necroză limfocitară totală în bursa lui Fabricius, timus și splină, edem seros-inflamator al țesutului interstițial, infiltrarea histiocitelor și pseudo-eozinofilelor în curs acut și subacut; atrofia și epuizarea limfocitelor bursei Fabrice, timusului, splinei, amigdalelor esofagiene și cecale, absența reacțiilor micro și macrofage în cursul latent al bolii.

Diagnosticare

Diagnosticul bolii infecțioase de bursă se realizează luând în considerare datele epizootologice, simptomele clinice, modificările patomorfologice, precum și un set de teste de laborator. Trebuie avut în vedere faptul că această boală este greu de detectat, este mascată de alte infecții și doar într-un curs tipic este diagnosticată prin semne clinice și date de examinare post-mortem. Prin urmare, într-un stadiu incipient al bolii și cu un curs latent, sunt necesare teste de laborator.

Diagnosticul de laborator al IBD include izolarea virusului pe embrioni de pui SPF (CE) în curs de dezvoltare sau în cultura de fibroblaste de embrioni de pui (FEC), identificarea acestuia în reacția de neutralizare (RN) și reacția de imunodifuzie (RID), biotestul la puii sensibili, detectarea antigenului viral prin reacție de rezistență la imunofluor (RIF), reacția de inhibare a hemaglutinării indirecte (RTNGA), reacția de aglutinare a latexului (RAL), microscopie electronică, reacția de contraimunoelectroforeză, precum și detectarea anticorpilor specifici în RN , RID, VIEF, reacție indirectă de hemaglutinare) ) și efectuarea de studii histologice.

Selectarea materialului patologic.

Din 5-10 cadavre de pui bolnavi care au murit sau au fost uciși în scopuri de diagnostic, se iau bursa lui Fabricius, splina, ficatul și rinichii. Organele sunt plasate în flacoane curate, uscate, sterile cu penicilină. Materialul este plasat într-un termos umplut cu gheață și depozitat până când este trimis la laborator.

Pentru cercetări serologice se trimit probe perechi (25-30) de ser sanguin al păsărilor bolnave, prelevate la un interval de 21 de zile. Serurile obţinute se pun în flacoane curate, uscate, sterile cu penicilină sub dopuri de cauciuc, introduse într-un termos cu gheaţă.

Materialul trimis la laborator este prevăzut cu o scrisoare de intenție. În laborator, materialul este depozitat congelat sau umplut cu o soluție apoasă 50% de glicerină.

În laborator, bucăți de material patologic se omogenizează în soluție salină tamponată cu fosfat 0,01 M (pH = 7,2) sau bulion de mezopatamie în raport de 1:10, se congelează și se decongelează de trei ori, urmată de centrifugare timp de 30 de minute la 5000 rpm. La supernatant se adaugă 100 U / ml de penicilină și 0,1 mg / ml de streptomicină, se incubează timp de 12 ore la 4 ° C, se verifică sterilitatea.

Izolarea virusului în embrionii de pui.

Pentru izolarea și titrarea agentului patogen se folosesc embrioni SPF cu vârsta de 9 zile în cantitate de cel puțin 10. Omogenatul preparat în cantitate de 0,2 ml se aplică pe membrana corion-alantoidiană sau pe cavitatea alantoică a embrion. 5-10 embrioni neinfectați sunt lăsați în control.

Moartea embrionilor de pui în prima zi este considerată nespecifică. Dacă există un virus în materialul de testat, moartea TBE are loc în 3-5 zile. Embrionii morți sunt deschiși pentru a detecta modificări patologice specifice. Membrana corion-alantoidiană (CAO) este edematoasă. Întârziată în creștere și dezvoltare, se remarcă prezența edemului seros-hemoragic al pielii în regiunea capului, gâtului, membrelor și peretelui abdominal. În plămâni se constată hiperemie congestivă și edem pulmonar, nefroză necrotică, degenerare granulară a miocardului, mărirea ficatului și a splinei. Bursa de țesătură nu este de obicei afectată.

Lichidul alantoic și CAO sunt prelevate din embrioni morți cu întârziere de creștere și modificări patomorfologice pronunțate în tuburi sterile și verificate pentru sterilitate prin inocularea a 0,2 ml de lichid pe MPA și BCH. Apartenența agentului izolat la virusul bolii Gumboro este determinată prin stabilirea PH și RID.

Infecția culturilor celulare.

Pentru a izola virusul, se folosesc culturi de fibroblaste TBE de 24-48 de ore. Momentul declanșării CPP depinde de doza de virus și de numărul de treceri. Odată cu izolarea sa primară, se observă modificări specifice după 2-3 treceri de material vaccinat. CPP se manifestă la 48-72 de ore după infectarea culturii celulare și se caracterizează prin vacuolizarea și rotunjirea celulelor, fenomenele de cariopicnoză și carioliză. Specificitatea modificărilor citopatice este confirmată prin stabilirea pH-ului.

Biotest pe pui.

Pentru infectare, se folosesc pui de 21 de zile cu SPF sau păsări de curte de 35-40 de zile dintr-o turmă industrială cu Factory Bursa bine dezvoltată. Pentru a face acest lucru, din numărul total de găini destinate biotestului, 5-10 capete sunt prinse, ucise aleatoriu, se determină greutățile corporale absolute individuale și bursa, iar indicele bursală (BI) este derivat conform formulei:

unde Ms este masa bursei Fabrice (g),

MT este greutatea corporală a păsărilor

Puii dintr-o turmă a cărui indice de bursă este de 4 sau mai mare sunt utilizați pentru stabilirea testelor biologice. Infecția puilor cu un indice sub 4 nu provoacă o evoluție acută a bolii. Determinarea indicelui bursală este de mare valoare diagnostică, deoarece la puii infectați există o scădere a acestui indicator de 3-9 ori.

Înainte de infectare, se prelevează probe de ser de sânge de la 10-20 de păsări selectate pentru un test biologic pentru testarea serologică (RID, RN, RNGA, ELISA) pentru prezența anticorpilor împotriva virusului bolii Gumboro. Materialul de testat se administrează intranazal la o doză de 0,5 ml.

Biotestul este considerat pozitiv dacă puii infectați dezvoltă semne clinice caracteristice ale bolii după 2-5 zile (diaree, deshidratare, depresie generală, pene gri murdare). La autopsia unei păsări bolnave și recuperate, sunt observate modificări patologice caracteristice.

La 15 zile de la infectare la puii supraviețuitori, se efectuează un studiu serologic repetat al serului sanguin pentru a izola o creștere diagnostică (de 4 ori) a titrului de anticorpi specifici și apoi aceștia sunt uciși pentru a stabili modificări patologice.

Reacția de neutralizare.

Este folosit pentru a identifica virusul bolii Gumboro și pentru a detecta anticorpi antivirali specifici. Reacția este pusă pe embrioni de pui. Utilizează seruri hiperimune normale și specifice și un virus izolat pe CE ca antigen. Înainte de setarea reacției, serurile sunt inactivate într-o baie de apă la + 56 ° C (30 min), după care se adaugă penicilină (1000 U/ml) și streptomicina (1 mg/ml).

Serurile hiperimune și normale se toarnă cu pipete sterile uscate, câte 0,5 ml fiecare, în eprubete sterile. Apoi, în fiecare dintre ele, 0,5 ml de antigen testat în diluții de la 10 -1 la 10 -9. După agitare, tuburile se mențin la + 37 ° C timp de 30 de minute. Amestecul rezultat într-o doză de 0,2 ml este injectat în cavitatea alantoică a embrionilor de 9 zile. Ovoscopia se efectuează de două ori pe zi. Se deschid embrionii morți. În a 10-a zi, pentru a identifica modificări specifice în organe și țesuturi, toți embrionii sunt deschiși. Rezultatele pH-ului sunt exprimate prin indicele de neutralizare, care este determinat conform unei metode general acceptate. Reacția este considerată pozitivă dacă diferența de titruri cu serurile normale și hiperimune este de 2 lg sau mai mult.

Reacția de imunofluorescență.

Este o metodă de diagnosticare expresă, deoarece permite stabilirea unui diagnostic în 2-3 ore de la momentul livrării materialului patologic.

Din bursa lui Fabricius a păsărilor ucise sau ucise în scop de diagnostic pe lame de sticlă subțiri, uscate, degresate, se prepară amprente (cel puțin 3), fixate timp de 10-20 minute în acetonă, spălate de două ori în două schimburi cu 0,01 M. tampon fosfat-salin ( pH = 7,2-7,4), apoi uscat și colorat conform tehnicii standard. Frotiuri de control - amprentele sunt preparate dintr-o bursă de pui sănătoși.

Reacția este considerată pozitivă dacă pe toate preparatele se găsesc cel puțin 3 limfocite cu o strălucire specifică verde strălucitoare a antigenului din citoplasmă (granule mici sau un halou difuz în jurul nucleului).

În plus față de frotiurile-amprente pentru RIF, puteți examina criosecțiuni ale bursei Fabrice. Pentru aceasta, organul este înghețat în eter de petrol răcit la minus 76 ° C într-un amestec de acetonă și gheață carbonică. Apoi sunt congelate în unitatea de microtom. Secțiunile sunt pregătite cu o grosime de 4-5 microni.

Reacție indirectă de inhibare a hemaglutinării.

Această tehnică poate fi utilizată pentru a indica antigenul viral din materialul patologic, precum și pentru a identifica virusul izolat în CE și CK.

Din material patologic de la păsări bolnave și moarte, membrane corion-alantoice care au murit după infectarea cu CE, se prepară un omogenat într-o soluție sterilă de clorură de sodiu 0,85% (pH = 7,2-7,4) în raport de 1: 1. După congelare și decongelare de trei ori, omogenatul este centrifugat la 5000 rpm. în 25 de minute. Lichidul supernatant este decantat pentru examinare la RTNGA. Probele de fluid alantoic sunt utilizate în forma lor nativă după centrifugare timp de 15-20 de minute la 3000 rpm. În același mod, se prepară suspensii de la păsările de control și EC. În plus, un ser imun specific la virusul bolii Gumboro și un antigen eritrocitar pozitiv din trusa de diagnostic BelNIIEV sunt utilizate pentru diagnosticul serologic al acestei boli în RNGA.

RTNGA este stabilit prin micrometodă folosind un microtitru Takachi. În același timp, în primul rând al godeurilor panoului, se prepară o diluție de două ori a materialului de testat de la 1: 2 la 1: 128 într-un volum de 0,025 ml. Pentru a face acest lucru, în fiecare godeu se adaugă 0,025 ml de soluție de clorură de sodiu 0,85% care conține 0,5% glicerină. În primul godeu, adăugați 0,025 ml din materialul de testat și, agitând, transferați 0,025 ml într-un alt godeu etc. (până la o diluție de 1: 128. În al doilea rând, se prepară o suspensie fără virusuri în același mod. La fiecare diluție a ambelor rânduri, se adaugă 0,025 ml de ser imun diluat cu diluții de 1-2 ori mai mici decât titrul său limitator în RNGA.Panoul cu amestecuri se agită și se pune într-un termostat timp de 60 de minute la 37 ° C. Se ia în considerare reacția după sedimentarea eritrocitelor.

Reacția este considerată pozitivă dacă, în primul rând cu materialul de testat, are loc inhibarea aglutinarii în primele două sau trei godeuri, cu condiția ca al doilea rând să fie complet aglutinat.

Testul de aglutinare cu latex este utilizat pentru a indica antigenul viral. Materialul patologic este omogenizat în soluție salină tamponată cu fosfat 0,01 M (pH = 7,2) în raport de 1: 1, congelat și decongelat de trei ori. Suspensia conţinând virus este centrifugată la 3000 rpm. 30 minute. Supernatantul este decantat pentru stadializare RAL.

Serul hiperimun la virusul IBD este obținut prin imunizarea găinilor cu un vaccin inactivat cu emulsie uleioasă. Fracția gamma-globulină este izolată din ser prin precipitare cu sulfat de amoniu.

Diagnosticul de anticorpi latex este preparat prin amestecarea unei suspensii de latex (concentrație de particule de 2%) cu un volum egal de fracție de gamma globulină într-o soluție tampon adecvată. Amestecul este incubat timp de 16-18 ore la 4°C, apoi centrifugat timp de 30 de minute la 3000 rpm. iar precipitatul se spală de trei ori cu o soluţie tampon. Latexul sensibilizat este resuspendat în aceeași soluție până la concentrația finală de particule (0,5-2,0%) și se adaugă 0,05% azidă de sodiu. Diagnosticul final este păstrat la frigider la 4 ° C.

Reacția de aglutinare a latexului este pusă pe o lamă de sticlă. Se aplică cu un dozator 25 μl de antigen într-o diluție de la 1: 2 la 1: 512, se adaugă 25 μl de latex anticorp diagnosticum și se amestecă, răsucind ușor. Rezultatele reacției sunt luate în considerare după 2-5 minute pe un sistem în trei puncte: reacție puternic pozitivă (+++) - aglutinare limpede, fulgi mari într-un lichid limpede; pozitiv (++) - aglutinarea este vizibilă, dar fundalul nu este complet luminat; negativ (-) - lichid omogen tulbure. Martorul este un amestec de latex cu soluție de clorură de sodiu 0,85% (control diagnostic), cu antigeni pozitivi și negativi (martor pozitiv și negativ).

Reacția de imunodifuzie (RID).

Această tehnică este utilizată pe scară largă atât pentru indicarea și identificarea virusului bolii Gumboro, cât și pentru determinarea anticorpilor specifici. La setarea RID, se folosesc truse VNIVIP sau ARRIAH pentru diagnosticul bolii Gumboro.

În laborator se cântărește materialul patologic, se adaugă o cantitate echivalentă de soluție de clorură de sodiu 0,85% sau apă distilată, se omogenizează, se îngheață și se centrifughează la 3000 rpm. în 10 minute. Supernatantul este decantat și utilizat pentru cercetare la RID.

Pentru a stabili reacția, se utilizează 1,25% agar cu 8% clorură de sodiu și 0,5% fenol. Cutiile Petri se umplu cu 24-72 de ore înainte de utilizare, pre-dizolvând agarul pe abur și turnați 20 ml în vase. Stratul de agar trebuie să fie de cel puțin 3 mm.

Pentru studiul probelor se folosește o ordine liniară a locației puțurilor. Faceți 3 rânduri de găuri verticale cu diametrul de 5 mm, la o distanță de 5 mm. dopurile de agar sunt îndepărtate cu un ac sau o pensetă.

Fiecare probă de ser de diagnosticare de test este diluată cu ser fiziologic (soluție de clorură de sodiu 0,85%), mai întâi 1: 2, apoi secvenţial în două etape până la 1: 256.

Înainte de utilizare, antigenele de referință uscate sunt dizolvate cu apă distilată sau soluție de clorură de sodiu 0,85% până la un volum de 0,5 ml. Serurile de diagnostic uscate sunt mai întâi diluate cu apă distilată în volumul indicat pe etichetă, apoi se prepară o serie de diluții succesive de două ori.

La examinarea materialelor patologice, ser pozitiv într-o diluție de lucru de 0,05 ml este introdus în rândul central de godeuri, iar normal, pozitiv (1 godeu fiecare) și antigenele studiate într-un volum de 0,05 ml în rândurile periferice. La examinarea serurilor de sânge ale păsărilor, un antigen pozitiv într-o diluție de lucru într-un volum de 0,05 ml este introdus în rândul central de găuri, iar serurile normale, pozitive (1 orificiu fiecare) și testate în diluții într-un volum de 0,05 ml sunt adăugate la rândurile periferice.

După umplerea godeurilor, vasele Petri sunt plasate într-un termostat la 37 ° C. Contabilitatea reacției este efectuată la 24 și 48 de ore după reacție. Cupele sunt privite pe un fundal întunecat într-un fascicul de lumină direcțional. Reacția este luată în considerare numai dacă există linii de precipitare între antigenul pozitiv și serul pozitiv în control și nu există linii de precipitare între antigenul pozitiv și serul normal de pui, precum și serul pozitiv și antigenul normal.

Pentru un rezultat pozitiv în studiul materialelor patologice pentru detectarea antigenului viral, se iau formarea a 1-2 linii de precipitare între godeurile cu materialul de testat și ser pozitiv, iar dacă sunt detectați anticorpi antivirali, prezența precipitațiilor. liniile dintre godeurile cu serul de testat și antigenul pozitiv.

Contraimunoelectroforeza este utilizată atât pentru indicarea și identificarea virusului bolii Gumboro, cât și pentru determinarea anticorpilor specifici. Esența tehnicii constă în mișcarea simultană a moleculelor de proteine ​​cu mobilitate electroforetică diferită în agar cu formarea unui precipitat din antigene și anticorpi omologi. Pentru setarea VIEF, PEF-3, EF-2 sau mărci similare sunt utilizate un set de truse de diagnosticare pentru setarea RID. Reacția se pune pe plăci de sticlă acoperite cu soluție de agar 1% în tampon veronal-medinal 0,85 M (pH = 8,6). In agar se taie godeurile cu diametrul de 4 mm, la o distanta de 4 mm una de alta.

În godeurile de la anod se introduc un antigen pozitiv și serurile studiate, iar la catod - un antigen pozitiv și materialul patologic studiat. Electroforeza se efectuează timp de 1,5 ore la un curent de 4 mA/cm. Antigenul negativ și serul sunt utilizate ca martori.

Plăcile sunt privite în lumină transmisă oblic pe un fundal întunecat. Reacția este considerată pozitivă dacă se formează una sau două linii de precipitare între godeurile cu antigenul sau serul de testat și serul sau antigenul pozitiv.

Reacția de hemaglutinare indirectă se bazează pe capacitatea anticorpilor de a aglutina eritrocitele sensibilizate de un antigen specific. RNGA poate fi utilizat atât pentru diagnosticarea serologică, cât și pentru studiul epizootologiei serologice a bolii Gumboro.

La setarea RNGA, antigenul eritrocitar și serurile de control (pozitive și negative) din trusa de diagnostic BelNIIEV sunt utilizate pentru a diagnostica bursita infecțioasă (boala Gumboro).

Reacția este stabilită prin metoda micro într-un microtitru Takachi. În godeurile rândurilor orizontale de plăci de plexiglas din plăcile studiate, se prepară diluții succesive de două ori (de la 1: 2 la 1: 1024) în soluție de clorură de sodiu 0,85% care conține 1% glicerol, într-un volum de 0,025 ml (1). cădere brusca). În primele godeuri se adaugă 0,025 ml de ser de testare, se amestecă, iar 0,025 ml din amestec se transferă în godeurile următoare etc. Din ultimele godeuri, după amestecare, 0,025 ml din conținut sunt îndepărtați într-o soluție dezinfectantă. Se adaugă 0,025 ml de suspensie 1% de eritrocite sensibilizate la virus în fiecare godeu cu o diluție adecvată de ser și se agită.

În același timp se pregătesc: controlul antigenului eritrocitar pentru aglutinare spontană (se adaugă 0,025 ml ser negativ și 0,025 ml antigen eritrocitar în 2-3 orificii); martor pozitiv (se adaugă în 2-3 orificii 0,025 ml ser pozitiv și 0,025 ml antigen eritrocitar); martor negativ (se adaugă 0,025 ml de ser negativ și 0,025 ml de antigen eritrocitar în 2-3 godeuri).

Plăcile din plexiglas cu componente se pun într-un termostat timp de 1-1,5 ore la t = 37 ° C până la sedimentarea eritrocitară.

Reacția este luată în considerare numai atunci când controlul antigenului eritrocitar pentru aglutinare spontană și cu ser evident negativ este negativ, iar controlul cu ser pozitiv este pozitiv.

O reacție pozitivă se caracterizează prin apariția unui sediment eritrocitar în formă de umbrelă la fundul puțului. O reacție negativă se manifestă prin precipitarea eritrocitelor sub forma unui punct sau a unui inel cu margini netede.

Când eritrocitele sunt aglutinate de serurile testate la o diluție de 1: 8 și mai mult, RNGA este considerat pozitiv, iar 1: 4 și mai jos este considerat negativ.

Testul imunosorbent legat de enzime este utilizat pe scară largă ca cel mai specific test pentru detectarea anticorpilor antivirali specifici în serul sanguin al păsărilor imune. Pentru a stabili această reacție, se utilizează un set de truse de diagnostic ARRIAH pentru a determina anticorpii împotriva virusului bolii infecțioase bursiere (boala Gumboro) prin ELISA. Esența acestei tehnici este identificarea complexului antigen-anticorp pe suprafața godeurilor unei plăci de polistiren. Complexul specific rezultat interacționează cu un conjugat imunoperoxidază anti-specie împotriva Ig G de pui și provoacă descompunerea substratului, colorând conținutul godeurilor plăcii.

Înainte de a pregăti soluțiile de lucru, trusa cu componentele se păstrează timp de 30 de minute. la temperatura camerei (18-20 ° C).

Soluția nr. 1. 0,97 g de tris (oximetil) aminometan (flacon 5.1), 6,61 g de clorhidrat de tris (oximetil) aminometan (flacon 5.2) și 11,7 g de clorură de sodiu (flacon 5.3) se dizolvă în 1000 cm 3 de apă distilată. După măsurarea pH-ului soluției rezultate (care ar trebui să fie în intervalul 7,4-7,6), se adaugă la aceasta 1,0 ml de detergent lichid Tween-20 (sticlă 7). Această soluție este utilizată pentru diluarea serurilor de control, a probelor de testat, a conjugatului anti-specie și a spălării inter-etape.

Soluția nr. 2. Pentru prepararea tamponului de substrat, 5,37 g de fosfat dihidrogen de sodiu (flacon 6.1) se dizolvă în 50 ml apă distilată. Conținutul flaconului 6.2 (1,51 g acid citric) se dizolvă și în 50 ml apă distilată. Apoi se amestecă 224,3 ml de soluție de dihidrogenofosfat de sodiu cu 25,7 ml de soluție de acid citric, se adaugă 50 ml de apă distilată. Soluția rezultată trebuie să aibă un pH de 4,9-5,0. Dacă este necesar, adăugați o componentă acidă sau alcalină.

Soluția nr. 3. În 0,5 ml de soluție nr. 1 se dizolvă 1,0 cm 3 de ser întreg liofilizat pozitiv împotriva bolii Gumboro (sticlă 1). Se lasă să se păstreze soluția rezultată timp de 3 zile la 4 ° C.

Soluția nr. 4. 1,0 cm 3 de ser negativ integral liofilizat împotriva bolii Gumboro (sticlă 1) se dizolvă în 0,5 ml soluție nr. 1. Se lasă să se păstreze soluția rezultată timp de 3 zile la 4 ° C.

Soluția nr. 5 Conținutul soluției 4 cu conjugat anti-specie se dizolvă în 0,5 ml soluție nr. 1. Pentru a obține o diluție de lucru de 1: 200, din acest flacon se iau 0,05 cm 3 la 10,0 ml de soluție nr. 1 (pe 1 placă). Pregătiți înainte de utilizare. Nu este supus depozitării.

Soluția nr. 6. O tabletă de hidroperit se dizolvă în 20 ml apă distilată. A se păstra într-un loc întunecat la 4 ° C timp de cel mult 20 de zile.

Soluția nr. 7. Amestecul substrat-indicator. O tabletă de ortofenilendiamină (substrat) se dizolvă în 20 ml soluție nr. 2, se agită până la dizolvarea completă și se adaugă 0,4 ml soluție nr. 6 pentru fiecare 20 ml din această soluție. Nu este supus depozitării.

Din trusă se ia o placă, în godeurile căreia este adsorbit antigenul purificat al virusului bolii Gumboro. Probele din probele de ser de sânge investigate sunt diluate 1: 100 cu soluția nr. 1. În acest scop, la 0,01 ml de ser se adaugă 1 ml de soluție nr.

Se adaugă 0,1 ml de soluție nr. 1 în godeurile rândurilor plăcii B1-12 ... H1-12 și se adaugă 0,2 ml de probe de ser diluate în godeurile A2-11 și titrarea se efectuează pe verticală. rânduri, de la 1: 100 la 1: 12800 ... În godeurile A1 și A12 se adaugă diluții de ser de control 1: 100 (negative și pozitive) și titrarea se efectuează, de asemenea, pe rânduri verticale. Scoateți 0,1 ml din ultimele godeuri H1 și H12.

Tableta este agitată ușor, acoperită cu un capac și transferată pe un termostat timp de 2 ore la 37 ° C. Apoi godeurile plăcii sunt eliberate de conținut prin agitare și spălate de trei ori cu soluția nr. 1. În toate godeurile plăcii se adaugă 0,1 ml de soluție nr. 5, se plasează într-un termostat timp de 1 oră, se spală de trei ori cu soluția nr. 1. Apoi, se adaugă 0,1 ml de soluție nr. 1 în toate godeurile. Se lasa la temperatura camerei timp de 10 minute. Reacția este oprită prin adăugarea în fiecare godeu a 0,05 ml de soluție de acid sulfuric 0,5%.

Detectarea anticorpilor specifici în serurile de sânge poate fi efectuată fără titrare a serurilor testate. În acest caz, în toate godeurile plăcii A2-12 ... H2-12 se adaugă 1 ml de ser sanguin la o diluție de 1: 400. Serurile de control pozitiv sunt introduse în godeurile A1 și B1 ale rândului vertical, serurile de control negativ la o diluție de 1: 400 sunt adăugate la următoarele două C1 și D1, iar godeurile E1 și F1 servesc ca control al conjugatului - La ele se adaugă 1 ml de soluție nr.

Rezultatele analizei se iau în considerare după oprirea reacției într-unul din următoarele moduri: vizual - prin intensitatea colorării conținutului sau instrumental - folosind un spectrofotometru cu fascicul vertical la o lungime de undă de 492 nm. La vizualizare, comparați culoarea conținutului godeurilor plăcii probelor de testat cu culoarea godeurilor probelor de control. Titrul serului testat este luat ca ultima sa diluție, la care se observă o colorare vizibilă pentru ochi, care este mai intensă în comparație cu o probă negativă. Probele sunt considerate pozitive, începând cu o diluție de 1: 400 și mai mare. La evaluarea rezultatelor fără titrare a serurilor, reacția este evaluată conform principiului - "da" - o reacție pozitivă (în probă sunt prezenți anticorpi specifici) sau "nu" - o reacție negativă (nu există anticorpi specifici în probă). probă).

Contabilitatea fotometrică instrumentală face posibilă cuantificarea titrurilor de anticorpi specifici prin determinarea extincției. Diluția finală a serului de testat este considerată ultima sa diluție, în care stingerea depășește de 2,0-2,1 ori controlul.

Examen histologic.

Bucăți din bursa lui Fabricius, timus, splina, ficat, rinichi, inimă, mușchii scheletici sunt luate din cadavrele păsărilor căzute sau ucise cu forța. Organele cu etichete sunt plasate în sticlă și umplute cu soluție de formol 10% pentru fixare. Volumul lichidului de fixare trebuie să fie de cel puțin 10 ori volumul pieselor de fixat. Fixarea se efectuează la temperatura camerei (18-20 ° C) timp de 24-48 de ore. Criteriile de finalizare a fixării sunt: ​​compactarea uniformă a organelor și aceeași culoare de la suprafață și pe tăietură. Piesele fixe cu etichete se pun in recipiente cu lichid de fixare sau in pungi de plastic cu vata inmuiata in fixativ si se trimit la laborator cu scrisoare de intentie.

În laborator, materialul se compactează prin congelare cu azot lichid sau pe mese semiconductoare, precum și prin înglobare în parafină. Secțiunile histologice se obțin pe un microtom de congelare sau de sanie, colorat cu hematoxilin-eozină. Secțiunile colorate sunt examinate la microscop cu lumină.

În sacul Factory la începutul bolii, există o necroză masivă a limfocitelor, apoi a celulelor reticulare, cu formarea de detritus necrotic în locul majorității nodulilor limfoizi. Nodulii limfoizi sunt înlocuiți cu structuri glandulare. În același timp, este detectată o reacție imună locală, în care, împreună cu necroza nodulilor limfoizi, are loc formarea unor limfocitare extinse cu formarea de mici noduli limfoizi în ei. În interstițiu se observă edemul, infiltrarea de pseudo-eozinofile și histiocite, hiperplazia celulelor reticulare.

Trebuie avut în vedere faptul că, odată cu evoluția latentă a bolii din cauza necrozei limfocitelor, se dezvoltă atrofia și delimfatizarea nodulilor limfoizi.

În timusul în cursul acut al bolii Gumboro, necroza limfocitară se găsește în corticală, mai rar în medula lobulilor, o creștere a numărului și dimensiunii corpurilor lui Gassal. Se notează hiperemie inflamatorie a vaselor de sânge, reacții micro și macrofage, hiperplazia celulelor reticulare. Cursul subacut și latent este însoțit de involuția accidentală precoce a organului.

În splină la debutul bolii se găsesc hiperemie vasculară pulpă roșie, infiltrație macrofagică, necroză limfocitară în mufurile periarteriale (limfocitele T) și noduli limfoizi (limfocitele B). La o dată ulterioară, este dezvăluită o plasmatizare pronunțată a organului.

În rinichi, în cursul acut al bolii Gumboro, se înregistrează hiperemie vasculară, degenerare vacuolară și necroză a celulelor epiteliale, distrugerea tubilor contorți. În unele zone, sunt detectate proliferări limfocitare - histiocitare extinse. Cursul cronic se caracterizează prin fenomene de nefroscleroză, acumularea de cristale de urat în lumenul tubilor.

În ficat, se observă hiperemia venelor centrale ale lobulilor, hemoragii focale, degenerarea granulară și grasă a hepatocitelor, precum și acumulări de limfocite, macrofage (mai rar microfage) în interstițiul organului.

În mușchii scheletici și cardiaci se detectează hiperemia vaselor de sânge, uneori distrofie granulară. În cursul cronic, între fibrele musculare se găsesc proliferări limfocitare - histiocitare slab exprimate.

Diagnostic diferentiat

În diagnosticul diferențial al bolii Gumboro, cea mai importantă este excluderea bolilor tumorale ale păsărilor, a infecției cu adenovirus, a sindromului producției de ouă (EDS-76), a bronșitei infecțioase, a gripei și a bolii Newcastle, precum și a streptococozei, pasteurelozei, colibacilozei, eimeriozei. , prostogonimoza, hipovitaminoza A, a si radiotoxicoza.

Boala lui Marek afectează puii de găină între 4 și 30 de săptămâni, apare sub formă de enzootice, mai rar epizootice. Mai des puii sunt bolnavi, mai rar - cocoși. În timpul vieții, păsările bolnave dezvăluie tulburări de coordonare a mișcării, pareza picioarelor și aripilor. Se remarcă sero-ochi, hiperplazia foliculilor de pene, slăbiciune și epuizare progresivă. La puii morți se găsesc neoplasme sebacee difuze sau focale în bursa Fabritius, splină, ficat, peretele intestinal, se observă îngroșarea nervilor sciatici. În timpul histoexaminării la bursa Fabrice se constată noduli limfoizi atrofiați cu înlocuirea lor cu chisturi sau glande, creșterea țesutului conjunctiv interfolicular. Adesea, se remarcă dezvoltarea tumorilor în organele interne, caracterizate prin proliferarea limfoblastelor, histiocitelor și plasmocitelor.

Diagnosticul patologic:

1. Creșterea țesutului tumoral salin în splină, ficat, rinichi, ovar, testicule, inimă, plămâni, peretele glandular al stomacului și intestinelor, timusului, bursei Fabrice sau atrofia acestora.

2. Hiperplazia foliculilor de pene.

3. Ochi cenușii, deformare a pupilei.

4. Nevrita cu o ingrosare accentuata a nervilor sciatici si ai nervilor plexurilor brahial si lombar.

5. Histo: proliferarea limfoblastelor, histiocitelor, plasmocitelor și reticulocitelor în ganglionii tumorali; atrofia nodulilor limfoizi ai bursei Fabrice, înlocuindu-i cu chisturi, glande, creșterea țesutului conjunctiv internodal.

Se efectuează teste de laborator suplimentare: se efectuează un biotest pe pui, se examinează serul sanguin în RID, se efectuează o histo-examinare a organelor și țesuturilor afectate.

Leucemia la pui apare de obicei sub formă de enzootice. O pasăre în vârstă de peste 8-12 luni se îmbolnăvește. La puii bolnavi, se notează letargie, diaree și epuizare. Autopsia păsărilor moarte relevă creșteri saline difuze sau focale ale țesutului tumoral în bursa Fabrice, splina, ficat, rinichi, inimă și alte organe.

Examinarea histologică în bursă relevă proliferarea celulelor tumorale care formează un focar tumoral, a cărui creștere infiltrativă duce la distrugerea organului. În ficat, rinichi, inimă, se dezvăluie creșterea celulelor limfoide imature.

Diagnosticul patologic:

1. Creșterea (difuză sau sub formă de ganglioni) a țesutului tumoral salin în bursa Fabrice.

2. Noduri sebacee asemănătoare tumorilor în splină, ficat, rinichi, peretele glandular al stomacului și intestinului subțire, inimă, plămâni

3. Epuizare și anemie generală.

4. Histo: proliferarea celulelor limfoide imature în ganglionii tumorali.

Diagnosticul de laborator se bazează pe efectuarea unui examen histologic al materialului patologic, stadializarea RSK și RNGA.

Sarcomul Rous este însoțit de cașexie progresivă, scăderea ovipoziției, diaree, abdomen lăsat, piele anemică și mucoase vizibile. Autopsia dezvăluie numeroși ganglioni tumorali în piele, mușchii scheletici, precum și în splină, mezenter intestinal, ficat, rinichi și ovar. În prezența unui număr mare de metastaze tumorale în organele interne, atrofia nodulilor limfoizi ai bursei Fabritius, se observă delimpatizare. Există o îngroșare de 2-3 ori a septurilor de țesut conjunctiv internodal, hiperemia și edemul acestora.

Diagnosticul patologic:

1. Ganglioni tumorali în piele, mușchi scheletici, splină, ficat, rinichi, mezenter intestinal, ovar.

2. Epuizare, anemie generală.

3. Histo: proliferarea celulelor polimorfe slab diferențiate în nodurile tumorale, atrofia și necroza elementelor parenchimului organelor interne; atrofia si delimfotizarea nodulilor limfoizi, hiperemie si edem seros al interstitiului la bursa Fabrice.

Pentru a confirma diagnosticul, se efectuează un studiu virusologic.

Infecția cu adenovirus afectează în principal animalele tinere în vârstă de 2-3 luni. Agentul cauzal este foarte contagios. Boala este însoțită de somnolență, anemie a membranelor mucoase. La puii căzuți sau uciși forțat, se constată hemoragii în mușchi, o creștere a ficatului cu revărsare de bilă în vezica biliară. Rinichii sunt umflați, cu hemoragii.

Examenul histologic evidențiază numeroase micronecroze, hemoragii (sub capsulă), proliferează limfocito-histiocitar interstițial în ficat și incluziuni eozinofile și bazofile în nucleii hepatocitelor. În bursa Fabrice se evidențiază atrofia nodulilor limfoizi, epuizarea limfocitelor în medular, edem interstițial, subțierea pliurilor mucoasei.

Diagnosticul patologic:

1. Hepatită alterativă, revărsare biliară a vezicii biliare.

2. Enterita acută cataral-hemoragică.

3. Mărirea splinei.

4. Hemoragii în mușchii scheletici, ficat, rinichi, în peretele vezicii biliare.

5. Anemie generală, epuizare.

6. Histo: ficat - incluziuni intranucleare bazofile și eozinofile, degenerescență vacuolară și necroză hepatocitelor, hemoragii, proliferează interstițial limfocito-histiocitar; pancreas - pancreatită cu prezența incluziunilor policromatofile intranucleare în celulele țesutului glandular; Bursa Fabricius - atrofia nodulilor limfoizi, epuizarea limfocitelor la nivelul medularului, edem interstițial, subțierea pliurilor mucoasei; splină – splenită seroasă cu corpi de incluziune intranuclear în reticulocite.

Se efectuează teste suplimentare de laborator: izolarea virusului în embrioni de pui.

Sindromul scăderii producției de ouă (EDS-76) afectează puii de găină de toate rasele în timpul perioadei de ouat. Virusul este capabil să persistă în corpul păsărilor și să devină mai activ în condiții de stres cauzat de debutul ouatului. Boala este însoțită de ovariită, salpingită catarrală. În timpul examinării histologice a oviductului uterin, în celulele epiteliale se găsesc incluziuni intranucleare bazofile. Modificările bursei lui Fabricius nu sunt patognomonice.

Diagnosticul patologic:

1. Ovariită, hemoragie la nivelul ovarului.

2. Salpingita catarală, cataral-hemoragică.

3. O scădere a grosimii cochiliei (cu 30-60%) și depigmentarea acesteia (la ouăle de rase colorate) la o culoare ușor galbenă sau albă.

4. Dermatită gangrenoasă (complicație).

Se ia în considerare scăderea producției de ouă la pui, se folosește diagnosticul precoce și retrospectiv folosind RZGA.

Bronșita infecțioasă se caracterizează prin afectarea tractului respirator (forma respiratorie) la pui și a oviductului la păsările adulte cu scăderea producției de ouă (forma reproductivă). La autopsie, la puii căzuți și uciși forțat, se observă inflamația catarrală acută a tractului respirator superior, aerosaculita sero-fibrinoasă, la pui - atrofia ovarului și a oviductului, deformarea foliculilor de ou. În plus, examenul histologic relevă degenerarea granulară a epiteliului tubilor contorți ai rinichilor.

Forma nefrozo-nefritică a bronșitei infecțioase se înregistrează la puii de 3-9 săptămâni. O pasăre bolnavă este observată cu diaree apoasă, depresie, prostrație. Principalele procese patologice detectate în timpul autopsiei și examinării histologice: degenerarea granulară și grasă a rinichilor și acumularea de urati în tubii renali și uretere, degenerarea grasă (picături mici) a ficatului, reacție pseudo-eozinofilă în interstițiul acestor organe.

Diagnosticul patologic:

forma respiratorie

1. Rinita sero-catarala, conjunctivita.

2. Traheita si bronsita fibrinoasa sero-catarala.

3. Pneumonie catarală focală sau fibrinoasă catarrală.

4. Aerozaculita seros-fibrinoasă.

5. Epuizarea.

forma nefrozo-nefritică

1. Nefroso-nefrită, acumulare de urati în uretere.

2. Revarsarea rectului si cloaca cu fecale albicioase amestecate cu urati.

3. Diateza viscerală a acidului uric.

formă de reproducere

1. Atrofia ovarului si a oviductului.

2. Cistoză ovariană cu masă cazeo-fibrinoasă în lumenul său.

3. Peritonita gălbenușă.

Se efectuează studii suplimentare: izolarea virusului pe CE și CK, bioprobele sunt efectuate pe embrioni de 9 zile (în care, deja în a 5-6-a zi după infectarea cu virusul embrionar, se observă „efectul pitic” - a întârzierea creșterii de 3-4 ori în comparație cu martor), precum și reacții serologice - RN, RID, RNGA.

Gripa păsărilor afectează puii de toate vârstele, este acută. Morbiditatea și mortalitatea pot ajunge până la 100%. Boala se caracterizează prin fenomene nervoase, umflarea capului, încetarea producției de ouă, diaree, cianoza crestei și a cerceilor, urmată de necroza acestora. Autopsia evidențiază numeroase hemoragii punctate și pete pe mucoasele și tegumentele seroase, un inel hemoragic în membrana mucoasă a stomacului glandular la limita cu stomacul muscular, enterită catarrală acută. Examenul histometric evidențiază micronecroză la nivelul creierului și epuizarea limfocitelor în bursa Fabricius, timus, splină, esofag și amigdale cecum.

Diagnosticul patologic:

1. Diateza hemoragică.

3. Cianoza crestei si cercei.

4. Pericardită seroasă fibrinoasă și pleuroperitonite.

5. Enterita catarală, cataral-hemoragică.

6. Edemul seros al țesutului subcutanat.

7. Splina neschimbată.

Histo: micronecroză la nivelul creierului; delimpatizarea bursei Fabricius, timusului, splinei, amigdalelor esofagiene și cecumului.

Diagnosticul de laborator se bazează pe izolarea virusului în embrionii de pui, stabilirea RHA și RZGA cu seruri hiperimune specifice și examinarea histologică a materialului patologic.

Boala de Newcastle afectează păsările de toate vârstele și este acută, subacută și cronică. Cursul acut se caracterizează prin creșterea temperaturii, depresie, somnolență, diaree (materiile fecale sunt apoase, de culoare galben-verzuie). La respirație se aud șuierături șuierătoare și gârâit în gât. Se observă cianoză a crestei și a cerceilor.

Cu evoluție subacută și cronică, se observă simptome nervoase, dificultăți de respirație, tuse, respirație șuierătoare.

Principalele modificări patologice se caracterizează prin fenomenele de diateză hemoragică, apariția unui inel hemoragic în membrana mucoasă a stomacului glandular la granița cu stomacul muscular. De asemenea, sunt detectate enterite fibrinos-necrotice, eroziv-ulcerative cu formare de muguri de crustă, distrofie granulară a organelor parenchimatoase, hiperemie venoasă și edem pulmonar. Histoexaminarea la nivelul creierului relevă encefalită limfocitară nesupurată; în organele sistemului imunitar - necroză în masă a limfocitelor, procese de distrugere a nodulilor limfoizi.

Diagnosticul patologic:

1. Diateza hemoragică.

2. Inel hemoragic în membrana mucoasă a stomacului glandular la limita cu stomacul muscular.

3. Cianoza crestei si cercei.

4. Enterită fibrinos-necrotică, eroziv-ulcerativă cu formare de muguri de crusta.

5. Edem seros al țesutului subcutanat.

6. Ușoară mărire a splinei.

7. Histo: encefalită limfocitară nesupurată; moartea limfocitelor și distrugerea nodulilor limfoizi din bursa și splina Fabritius.

Pentru a face diagnosticul final, se efectuează teste suplimentare de laborator: izolarea virusului în embrioni de pui și identificarea acestuia folosind RTGA, RN, RSK, RIF, ELISA. Se iau în considerare datele examenului histologic al creierului.

Streptococoza se desfășoară cu viteza fulgerului sau acut. Se observă că o pasăre bolnavă este somnoroasă, pene ciufulite, depresie, diaree, creasta anemică și cercei și uneori paralizie a membrelor. Modificările patologice se caracterizează prin edem seros-hemoragic al țesutului subcutanat, inflamația seros-fibrinoasă a tegumentului seros și hiperplazia splinei. Ficatul se află într-o stare de distrofie granulară cu focare miliare de necroză.

Diagnosticul patologic:

1. Cianoza mucoaselor vizibile si a pielii.

2. Edemul seros-hemoragic al țesutului subcutanat și intermuscular.

3. Hiperemia venoasă, degenerarea granulară și grasă a ficatului, focare de necroză în acesta.

4. Mărirea splinei.

5. Hiperemia venoasă acută și edem pulmonar.

6. Hiperemia venoasă acută, degenerarea granulară și glomerulonefrita renală seroasă.

7. Enterita acută catarală.

8. Peritonita sero-fibrinoasa, pericardita, perisplenita, ovariosalpingita (cu evolutie subacuta si cronica).

9. Hiperemia ovariană, deformarea foliculilor de ou și hemoragii în ei.

Se efectuează studii de laborator: microscopia frotiurilor - amprentele digitale ale organelor, izolarea unei culturi pure a agentului patogen, determinarea proprietăților sale virulente.

Cu pasteureloza găinilor, păsările bolnave observă letargie, sete, febră, depresie, diaree, cianoza crestei și cerceilor, iar în curs cronic - inflamația difteriei a bărbilor. La autopsia găinilor căzuți și uciși forțat, aceștia prezintă semne de septicemie, pneumonie croupoasă. În timpul histoexaminării în bursa Fabrice se înregistrează atrofie pronunțată și delimfotizare a nodulilor limfoizi cu o îngroșare simultană a septurilor de țesut conjunctiv interfolicular.

Diagnosticul patologic:

curs acut

1. Cianoza crestei si cercei.

2. Pleuropneumonie croupoasă.

3. Pericardită seroasă fibrinoasă.

4. Diateza hemoragică.

5. Degenerescenta granulara si necroza miliara la nivelul ficatului si miocardului.

6. Duodenită acută catarală, cataral-hemoragică.

7. Mărirea splinei (nu întotdeauna).

curs cronic

1. Inflamație fibrinos-necrotică a ghimpilor, uneori căderea acestora.

2. Pneumonie croupoasă, necrotică.

4. Artrita fibrinos-purulenta.

5. Epuizarea.

Histo: atrofia nodulilor limfoizi ai bursei Fabrice, ingrosarea interstitiului. Pentru a clarifica diagnosticul, se efectuează un studiu bacteriologic și se efectuează un biotest pe pui.

Colibaciloza se caracterizează prin febră, depresie, diaree și epuizare în creștere. Autopsia relevă: inflamație catarrală a intestinului subțire, inflamație sero-fibrinoasă a tegumentului seros, saci de aer. Microscopia bursei Fabrice evidențiază hemoragii focale, hiperemie și edem al interstițiului, atrofia nodulilor limfoizi. Se remarcă epuizarea elementelor limfoide ale zonelor corticale și cerebrale ale nodulilor, umflarea citoplasmei celulelor reticulare.

Diagnosticul patologic:

1. Perihepatita sero-fibrinoasa, perisplenita, pericardita, peritonita, aerosaculita.

2. Hemoragii punctiforme și punctate în organele parenchimoase, mucoase și seroase.

3. Enterita acută catarală.

4. Mărirea splinei.

5. Distrofie granulară și focare miliare de necroză în ficat.

6. Poliartrita seroasă fibrinoasă (în curs cronic).

7. Histo: hemoragii la bursa lui Fabricius, atrofia nodulilor limfoizi, hiperemie si edem al interstitiului.

Se efectuează cercetări suplimentare: izolarea culturii agentului patogen, determinarea virulenței acestuia.

Diagnosticul patologic:

1. Tiflită și proctită cataral-hemoragică eroziv-ulcerativă.

3. Degenerescenta granulara a ficatului, rinichilor si miocardului.

4. Epuizarea.

5. Histo: atrofia nodulilor limfoizi ai bursei Fabrice, edem al tesutului conjunctiv interfolicular, acumulare de histiocite, pseudoeozinofile si eozinofile in acesta.

Pentru diagnosticul final se efectuează microscopia fecalelor sau răzuirii mucoasei intestinale pentru a identifica oochisturile de eimeria.

Prostogonimioza apare sub formă de focare enzootice, mai des la fermele situate în apropierea corpurilor de apă. La păsările bolnave se observă depresie, somnolență, diaree (fecale de culoare albă sau verzuie), o scădere a producției de ouă și o burtă mărită. Autopsia păsărilor moarte sau ucise cu forța evidențiază ovariită, salpingită și peritonită purulent-fibrinoasă, hiperemie și edem al bursei Fabrice. Microscopia bucăților de bursă evidențiază edem seros-inflamator al interstițiului, infiltrație de pseudo-eozinofile și eozinofile.

Diagnosticul patologic:

1. Ovariita, deformarea si ruptura foliculilor.

2. Peritonita fibrinoasa purulenta.

3. Salpingită fibrinoasă purulentă, calculi de ou în lumenul oviductului.

4. Enterita acută catarală.

5. Degenerarea granulară a ficatului, rinichilor, miocardului.

6. Hiperemia si edemul bursei lui Fabricius.

7. Epuizare, exsicoză.

8. Histo: Edem seros-inflamator și infiltrație microfagală a țesutului conjunctiv internodular în bursa Fabrice.

Sunt efectuate studii suplimentare de laborator - microscopie a excrementelor de păsări bolnave pentru a detecta ouăle de helminți.

Hipovitaminoza A este înregistrată la pui, precum și la păsările productive. Simptome: inactivitate, întârziere de creștere, conjunctivită, laringită, anemie generală. La deschidere, pe membrana mucoasă a faringelui și esofagului se găsesc noduli miliari gri-gălbui (hiperplazie și cheratinizare a epiteliului glandelor mucoase), precum și degenerescență granulară și depunere de urati în rinichi.

Diagnosticul patologic:

1. Hiperkeratoza pielii, matitatea și fragilitatea penelor.

2. Conjunctivită fibrinoasă, xeroftalmie, keratomalacie, panoftalmită.

3. Rinite catarale, laringite, traheite.

4. Noduli lăptoși în membrana mucoasă a faringelui și esofagului.

5. Diateza acidului urinar visceral și guta.

6. Epuizare și anemie generală.

Pentru a stabili diagnosticul final, se efectuează un studiu biochimic al ficatului, sângelui, gălbenușurilor de ou, hranei pentru conținutul de vitamina A și caroten.

Distrofia alimentară, observată mai des la puii de 15-20 de zile, se caracterizează prin depresie, diaree și emaciare a păsării. Autopsia înregistrează absența grăsimii în depozitul de grăsime, atrofia mușchilor scheletici și a organelor interne. Examenul histologic al secțiunilor timusului și bursei lui Fabricius relevă involuția precoce a organului, însoțită de atrofie și golirea nodulilor limfoizi.

Diagnosticul patologic:

1. Lipsa de grăsime în depozitul de grăsime.

2. Atrofia mușchilor scheletici și a organelor interne.

3. Edem seros în țesutul subcutanat și intermuscular.

4. Anemie generală, exicoză.

5. Histo: Involuția accidentală a bursei și timusului Fabrice.

Se efectuează studiul chimic și toxicologic al furajelor. Se detectează o creștere a numărului de acizi și peroxid.

Radiotoxicoza este înregistrată la păsările de toate vârstele. Puii și puii bolnavi au anorexie, sete, umflături în zona capului. Autopsia relevă diateza hemoragică, infiltrarea seroasă a țesutului subcutanat și histoexaminarea - atrofie, necroză a țesutului limfoid în organele centrale și periferice ale sistemului imunitar.

Diagnosticul patologic:

1. Diateza hemoragică.

2. Edem seros al țesutului subcutanat din cap.

3. Enterita catarrala subacuta sau cronica, eroziv-ulcerativa.

4. Atrofia bursei lui Fabricius, timusului, splinei, glandei Garder.

5. Anemie generală, epuizare, exoză.

6. Histo: necroză focală sau atrofie a țesutului limfoid în timus, bursa Fabritius, glanda Garder, splina, amigdalele esofagiene și cecale.

Se efectuează studiul radiologic al furajului.

Măsuri de prevenire și control

Pentru a proteja fermele de păsări de păsări de introducerea agentului patogen, medicii veterinari sunt obligați: să utilizeze pentru incubație ouăle de la fermele de păsări sigure pentru boala bursală infecțioasă; să doteze adăposturile de păsări cu o pasăre de aceeași vârstă; observați pauzele tehnologice inter-ciclu cu curățare temeinică, dezinfecție, dezinsecție și deratizare; pentru a efectua dezinfecția ouălor și recipientelor conduse; asigură cerințele veterinare necesare pentru păstrarea și hrănirea păsărilor.

Atunci când se stabilește un diagnostic de IBD, se impun restricții în fermă, în condițiile cărora este interzis: exportul de ouă pentru incubație, păsări tinere și adulte, furaje, inventar și echipamente către ferme fără IBD și pentru vânzare către populație; recrutarea stolurilor cu păsări recuperate.

Este permisă vânzarea ouălor în scop alimentar, după dezinfecția cu vapori de formaldehidă.

După un studiu clinic, toți puii bolnavi și suspectați sunt sacrificați și eliminati. Puii sănătoși rămași sunt vaccinați cu sacrificarea ulterioară a tuturor păsărilor de curte care au atins condițiile de sacrificare din incinta unde a fost înregistrată boala. Opriți incubarea ouălor și primirea animalelor tinere pentru creștere. Incubatorul este dezinfectat. Depunerea ouălor pentru incubație se reia nu mai devreme de 10 zile de la eclozarea ultimului lot de ouă incubate.

Fiecare adăpost de păsări i se atribuie un însoțitor separat. Salopetele sunt dezinfectate zilnic într-o cameră cu abur-formolină.

Sacrificarea păsărilor se efectuează cu eviscerarea completă a carcaselor. În absența modificărilor patologice ale carcaselor, acestea sunt utilizate după fierbere la t = 100 ° C (în 90 de minute). Carcasele cu hemoragii intramusculare, edem, depozite de acid uric sunt trimise împreună cu organele interne pentru eliminarea tehnică.

Pentru dezinfecția umedă se folosește o soluție de hidroxid de sodiu 4%, o soluție clarificată de înălbitor (conținând cel puțin 3% clor activ), o soluție apoasă de formaldehidă 2% cu o expunere de cel puțin 6 ore.

Litierul și așternuturile adânci sunt dezinfectate biotermic.

Restricțiile se înlătură după măsurile veterinare și sanitare definitive și în absența modificărilor clinice și patologice la cel puțin 3 loturi de pui crescuți până la vârsta de 60 de zile după o pauză preventivă.

Profilaxia specifică

Conform observației unui număr de cercetători, măsurile generale veterinare și sanitare nu asigură recuperarea completă a fermelor de boala infecțioasă bursală. Prin urmare, în complexul de măsuri pentru prevenirea și eliminarea acestei infecții, locul principal este acordat prevenirii specifice folosind vaccinuri vii și inactivate.

Protecția găinilor de infecție cu virusul IBD se realizează prin crearea unui nivel ridicat de anticorpi pasivi la găini prin imunizarea găinilor de înlocuire cu vaccinuri inactivate și prin utilizarea vaccinurilor cu virus viu pe măsură ce imunitatea transovariană scade.

Vaccinurile cu virus viu sunt folosite pentru a imuniza puii. Păsările se vaccinează pe cale orală, la vârsta de 7-14 zile (în funcție de nivelul de imunitate pasivă și de situația epizootică), și se revaccinează după 14 zile. Cu 6 ore înainte de imunizare în adăpostul de păsări, alimentarea cu apă și furaj este oprită. Vaccinul se dizolvă în apă caldă și se hrănește găinilor astfel încât o doză de vaccin (10-15 ml) să cadă pe un cap. Furnizarea cu apă și furaje se reia nu mai devreme de 2 ore după ce vaccinul a fost băut. Stabiliți observarea clinică a stării păsării.

Dezavantajul majorității vaccinurilor cu virus vii împotriva bolii infecțioase de bursă este că tulpinile de vaccin ale virusului, împreună cu imunogenitatea, au proprietăți imunosupresoare pronunțate. Prin urmare, vaccinurile vii, în funcție de gradul de reactogenitate, sunt împărțite în moderat, slab și apatogen cu activitate imunogenă ridicată. Eficacitatea tulpinilor reactogene a fost stabilită prin vaccinarea găinilor cu niveluri ridicate de anticorpi materni, acestea fiind inacceptabile pentru puii susceptibili.

Unul dintre indicatorii reactogenității tulpinilor de vaccin în boala Gumboro este scăderea nivelului de antihemaglutinin la păsările vaccinate împotriva bolii Newcastle. S-a stabilit o corelație între activitatea imunogenă a tulpinilor de vaccin ale virusului, efectul său dăunător asupra structurii morfologice a bursei și scăderea indicelui bursiei. Cele mai imunogene tulpini provoacă leziuni mai pronunțate ale bursei Fabrice. O scădere a indicelui bursală a fost stabilită odată cu introducerea vaccinurilor reactogene la păsările slab imune de o vârstă fragedă. Prin urmare, înainte de a vaccina puii de găină împotriva IBD, recomandăm determinarea stării lor imunitare și a nivelurilor de bază ale anticorpilor specifici. Pentru a face acest lucru, la laboratorul de boli ale păsărilor și albinelor din BelNIIEV sau la departamentul de boli ale animalelor mici al VGAVM pentru studiul serului sanguin și al organelor imunitare de la 10-20 de pui.

S-a demonstrat că chiar și vaccinurile IBD slab patogenice sunt capabile să provoace modificări patomorfologice în organele sistemului imunitar, provocând astfel dezvoltarea unei stări de imunodeficiență la păsări. De exemplu, o singură imunizare a găinilor cu un vaccin uscat cu virus viu „Bursin-2” duce la o scădere bruscă a dimensiunii nodulilor limfoizi din cauza proceselor de delimfotizare a stratului lor cortical. În medular, se înregistrează fagocitoza celulelor distruse cu formarea multor cavități rotunjite de tip fagure. La puii vaccinați de două ori cu acest vaccin, leziunile bursei Fabritius sunt intensificate. Există o dispariție aproape completă a limfocitelor, atrofie și distrugere a nodulilor limfoizi, fibroplazie și transformarea organului într-o structură glandulare. Atrofia cortexului este observată în timus.

Vaccinarea dublă a puilor cu vaccinuri ateinizate „Gambovac” și „Gumboral-ST” (fabricat în Franța) determină atrofia aproape completă a bursei Fabricius cu pierderea părții sale funcționale.

Rezultatele studiilor noastre au arătat că, atunci când este administrat oral, vaccin cu virus viu uscat de la buc. „D 78” (produs în Olanda) la puii imuni dezvoltă procese de atrofie și delimpatizare în timus, bursa Fabritius și amigdalele cecale, ducând la imunosupresie.

De asemenea, am constatat că imunizarea orală a păsărilor împotriva bolii Gumboro cu un vaccin cu virus viu uscat de la buc. „Winterfield 2512” (produs de ARRIAH, Vladimir) este însoțit de restructurare imunomorfologică activă în organele sistemului imunitar și nu provoacă o stare de imunodeficiență. În măduva osoasă a puilor imunizați cu acest vaccin am înregistrat o creștere a numărului de celule mieloblastice, o creștere a indicelui leucoeritroblastic, precum și a indicelui de maturare a măduvei osoase a eozinofilelor și pseudoeozinofilelor. La timusul găinilor imunitare s-a observat o creștere a volumului specific al țesutului limfoid, iar la bursa lui Fabricius s-a observat hiperplazia nodulilor limfoizi. În amigdalele splinei și cecumului puilor imunizați cu acest vaccin, am evidențiat o creștere a densității țesutului limfoid nodular, o creștere a dimensiunii nodulilor limfoizi și o acumulare activă de plasmocite. În acest sens, utilizarea unui vaccin cu virus viu uscat de la buc. Winterfield 2512 (fabricat de ARRIAH) pentru imunizarea găinilor împotriva bolii Gumboro este cel mai de preferat, având în vedere imunogenitatea ridicată și reactogenitatea scăzută a acestui produs biologic.

BelNIIEV a dezvoltat un vaccin cu virus embrionar viu împotriva bolii Gumboro din tulpina KMIEV-15. În prezent, este în curs de ample teste de producție. Studiul eficacității acestui produs biologic prezintă un interes deosebit, având în vedere relația antigenică a tulpinilor de vaccin și virusul epizootic care circulă în Republica Belarus.

La vârsta de 110-120 de zile, vaccinurile inactivate sunt utilizate pentru înlocuirea animalelor tinere. Se injectează o dată, intramuscular, în zona mușchiului pectoral, în doză de 0,5 ml. Locul de injectare a vaccinului este tratat cu etanol 70%. S-a constatat că administrarea de vaccinuri inactivate crește titrul de anticorpi la păsările de curte imunizate anterior cu vaccinuri vii. În acest caz, efectul de imunizare este mai pronunțat decât vaccinul inactivat a fost utilizat ulterior. Imunizarea puiilor de înlocuire cu vaccinuri inactivate creează o imunitate mai intensă și de lungă durată decât atunci când se utilizează vaccinuri vii.

În ciuda imunizării puilor de înlocuire, există adesea o variabilitate semnificativă a anticorpilor pasivi într-o turmă de găini, ceea ce creează condiții pentru boala păsărilor cu un nivel slab de imunitate transovariană. Acest lucru necesită stimularea răspunsului imun post-vaccinare prin utilizarea agenților imunotropi.

Am efectuat studii pentru a studia efectul unui număr de imunostimulatori (tiosulfat de sodiu, timalină, ASD-2, levamisol) asupra proprietăților imunogene ale vaccinului ARRIAH inactivat cu absorbție lichidă împotriva bolii bursale infecțioase (produs în Vladimir, Rusia). S-a stabilit că imunizarea puilor de înlocuire împreună cu tiosulfat de sodiu și timalină contribuie la crearea unei imunități antivirale mai intense decât atunci când se utilizează un singur vaccin. Preparatele ASD-2 și levamisol nu au afectat semnificativ imunogenitatea acestui vaccin.

Metodă de imunizare a puilor de înlocuire împotriva IBD cu vaccin ARRIAH inactivat absorbit de lichid împreună cu tiosulfat de sodiu:

Pasărea este vaccinată la vârsta de 110-120 de zile. Se prepară în prealabil o soluție proaspătă de tiosulfat de sodiu 35%. Soluția rezultată se sterilizează prin fierbere timp de 30 de minute, iar după răcire se amestecă 50 ml dintr-o soluție apoasă 35% de tiosulfat de sodiu cu 200 ml (flacon - 400 doze) de vaccin. Amestecul rezultat (conținând 7% tiosulfat de sodiu) se injectează o dată, intramuscular, în zona mușchiului pectoral, în doză de 0,6 ml (astfel, volumul vaccinului injectat crește cu 0,1 ml). Locul de injectare este tratat cu etanol 70%.

Am constatat că imunizarea animalelor tinere de înlocuire împotriva bolii Gumboro cu un vaccin inactivat cu sorbție lichidă (produs de ARRIAH, Vladimir) împreună cu un tiosulfat de sodiu imunostimulant (în concentrație apoasă de 7%) activează procesele de restructurare imunomorfologică la nivel central (roșu). măduva osoasă, timusul, bursa Fabricius) și organele periferice (splină, sânge) ale sistemului imunitar al păsării, ceea ce crește nivelul de anticorpi specifici cu 20-50%....

O metodă de imunizare a găinilor de înlocuire împotriva IBD cu un vaccin ARRIAH inactivat absorbit de lichid împreună cu timalină:

Pasărea este imunizată la vârsta de 110-120 de zile. În ziua vaccinării, se cântăresc 10-20 de capete de pui de înlocuire pentru a determina greutatea medie a păsărilor. Timalin se administrează împreună cu vaccinul în doză de 1 mg/kg corp de pasăre. Medicamentul este produs sub formă de pulbere în flacoane de 10 mg.

Exemplu. Greutatea medie a păsării este de 2 kg. Prin urmare, 1 doză de vaccin ar trebui să conțină 2 mg timalină. Într-un flacon de vaccin (200 ml - 400 doze) se dizolvă 800 mg (80 flacoane) de timalină. Amestecul rezultat se injectează o dată, intramuscular, în zona mușchiului pectoral, în doză de 0,5 ml. Locul de injectare este tratat cu etanol 70%.

Studiile noastre au arătat că imunizarea păsărilor împreună cu timalină favorizează o creștere a anticorpilor specifici din sânge de 1,5-4,4 ori în comparație cu utilizarea unui vaccin fără imunostimulant.

În același timp, tiosulfatul de sodiu este un medicament mai ieftin și mai ușor disponibil. Prin urmare, utilizarea sa în perioada de imunizare a găinilor de înlocuire este de preferat.

Evaluarea tensiunii imunității post-vaccinare.

Pentru a evalua puterea imunității în boala Gumboro se folosesc metode serologice: RID, VIEF, RN, RNGA și ELISA. La toți puii vaccinați cu vaccinuri cu virus viu, anticorpii din serul sanguin sunt detectați începând cu vârsta de 20-30 de zile. Anticorpii antivirali specifici la puii de substitutie vaccinati la varsta de 110-120 de zile sunt detectati la puii de pana la varsta de 46 de saptamani. Anticorpii materni se găsesc la găini până la vârsta de 17-20 de zile.