Reticulocite. Reticulocitele (semnificație clinică și diagnosticarea laboratorului) Consecințele și tratamentul reticulocitozei

Reticulocite. Reticulocitele (semnificație clinică și diagnosticarea laboratorului) Consecințele și tratamentul reticulocitozei

29.07.2020

Reticulocitele sunt un indicator al numărului de celule, precursorii eritrocitelor produse în măduva osoasă. Reticulocitele - tinerii eritrocite reflectă capacitatea regenerativă a măduvei osoase. Numărarea reticulocitelor este utilizată pentru a estima intensitatea formării sângelui. Studiul se efectuează la: reducerea numărului de eritrocite, hemoliza suspectată, estimarea eritropoezei, în tratamentul anemiei cu fier și vitamina B 12, eritropoeina.

Reticulocitele sunt celule roșii roșii fără nucleare, al cărei maturare are loc în decurs de 24-48 de ore după intrarea în sângele periferic din măduva osoasă. Cantitatea de reticulocite formate reflectă activitatea eritropoeică a măduvei osoase. Cu alte cuvinte, conținutul de reticulocite reflectă rata de formare a eritrocitelor și servește ca indicator al răspunsului măduvei osoase la anemizare.

În plus față de parametrii general acceptați ai reticulocitelor - conținutul absolut și relativ (%) al reticulocitelor, apariția unor noi analizatori hematologici (pictura cu coloranți speciali pentru acizi nucleici) a făcut posibilă obținerea unor parametri suplimentari reticulocite:

Reticulocitele ARN, cele mai mature (LFR%, fracțiunea de reticulocite reduse de fluorescență);
reticulocite cu un conținut mediu de ARN (MFR%, fracțiune de reticulocite cu fluorescență medie);
Reticulocite ARN (HFR%, fracție de reticulocite de fluorescență ridicată);
Fracțiunile reticulocitelor imature (IRF%, fracțiunea reticulocitelor imature).

Diferențierea reticulocitelor pe baza gradului de maturitate și, în consecință, conținutul acizilor nucleici este o reflectare a activității hematopoietice a măduvei osoase.

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după pictura de coloranții lor speciale

Principiul metodei: detectarea substanței de plasă de cereale a reticulocitelor cu pictura antică cu vopsele alcaline, cu numărare ulterioară a acestora într-un frotiu de sânge.

Puteți utiliza una dintre următoarele coloranți: soluția Azura I; soluție Azura II;

Cursul de determinare: culoarea se efectuează fie pe geam, fie în tub.

Colorarea reticulocitelor din tubul de testare Azur al II-lea

0,05 ml soluție de vopsea Azur II și 0,2 ml de sânge sunt plasați în tub. Amestecul este bine amestecat și lăsat timp de 20 până la 30 de minute. Se amestecă din nou și pregătește curse subțiri.

Colorarea reticulocitelor într-un tub de testare Azur I

Tubul de testare este plasat 0,3 - 0,5 ml din soluția de vopsea Azur I și 5 - 6 picături de sânge cu o pipetă din aparatul Panchenkov. Tubul este închis cu un dop de cauciuc, amestecul este agitat cu atenție și lăsat timp de 1 până la 1,5 ore (reticulocitele sunt pictate mai bine atunci când expunerea de 1,5 - 3 ore). Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Microscopic microscopic cu lentile de imersie. În frotiu, reticulocitele și celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de cereale în reticulocite - în albastru (când pictura azur al II-lea) sau o culoare cinematică-violet (când pictează azur I).

Reticulocitele reprezintă un indicator important al capacității de regenerare a măduvei osoase. Creșterea acestora în sângele periferic (reticulocitoză) este observată în anemia hemolitică, cu crize hemolitice, cu pierderi ascuțite de sânge, malaria, în tratamentul anemiei cu deficit de fier, cu un dezavantaj acut de oxigen. Prezența unei cantități crescute de reticulocite permite suspectă sângerării ascunse (de exemplu, la pacienții cu tifoidă abdominală, boală ulcerativă).

Reducerea cantității sau absenței reticulocitelor (reticulocitelor) este observată în anemia aplastică și hipoplastică argenerată; anemie cauzată de deficiența conținutului de fier, vitamina B12, acidul folic; Când metastaza de cancer în os; boală de radiații; terapie cu radiatii; Tratamentul cu citostatice.

Tehnica eșantionului rival.

Exemplu rival - testul biochimic pentru diferențierea transudatei și exudat.

Tehnica este după cum urmează: Exedatele conțin sermocin (compusul naturii globulinei), care oferă o probă pozitivă (denaturare) cu o soluție slabă de acid acetic. Se toarnă 100-150 ml de apă distilată în cilindru, acidulat cu 2-3 picături de acid acetic de gheață și lichidul scurged se adaugă prin picurare. Pădurea căderii de exudatate formează cloud sub forma unui nor alb, coborând la fundul vasului. Picănța transudatelă nu formează turbiditate sau este nesemnificativă și dizolvată rapid. În ciuda diferențelor specificate de exudate și transudate, ele nu sunt întotdeauna ușor de delimit în practică, deoarece uneori este necesar să se ocupe de o serie de lichide tranzitorii, precum și exudatele care sunt în conținutul proteinei și standului relativ de densitate aproape de transudates.

Determinarea numărului de reticulocite - Analiza clinică a sângelui, în care se efectuează calcularea eritrocitelor tinere produse de măduva osoasă. Studiul completează testul global de sânge. Numărarea reticulocitelor este efectuată pentru diagnosticul diferențial al diferitelor tipuri de anemie, evaluând funcționarea măduvei osoase și a splinei, a stărilor de monitorizare a pacienților cu deficiență de fier, deficit de vitamina B12 sau acid folic, insuficiență renală, bolile oncologice. Gardul de sânge pentru cercetare este fabricat din venele sau capilarele. Indicatorul reticulocitelor este determinat utilizând metoda citofluorimetriei debitului. Valori de referință pentru bărbați - 23-70 mii / μl, pentru femei - 17-63,8 mii / μl. Calendarul analizei nu depășește 1 zi lucrătoare.

Reticulocite - predecesoare eritrocite. Acestea sunt produse de măduva osoasă în timpul diferențierii și divizării celulelor stem. Majoritatea reticulocitelor sunt în măduva osoasă, celulele roșii din sânge deja mature se încadrează în sânge. Proporția de propactare a sângelui este de aproximativ 0,5-2%. La efectuarea analizei, se determină numărul de celule de acest tip și procentul lor din eritrocitele totale. Rezultatele vă permit să evaluați producția de celule roșii din sânge în măduva osoasă, să identifice gradul de activitate al acestui proces.

Corpul menține un nivel stabil de eritrocite de sânge. Cu o scădere a cantității lor ca urmare a hemolizei, tulburărilor de sinteză, sângerări includ mecanisme compensatorii pentru restaurarea concentrației normale. Prin schimbarea nivelului și procentajului reticulocitelor, este posibilă stabilirea producției de celule roșii din sânge în măduva osoasă sau oprimarea acestui proces. Dacă măduva osoasă funcționează în mod normal, pierderea eritrocitelor conduce la o creștere ulterioară a numărului și cantității de reticulocite. Scăderea nivelului acestor tipuri de celule apare atunci când măduva osoasă roșie este deteriorată de tumoare, metastază, radioterapie și chimioterapie. Pentru a analiza reticulocitele, biomaterialul este capilar sau sânge venos. Studiul se efectuează utilizând un analizor hematologic prin citometrie de flux. Rezultatele sunt aplicate în practica terapeutică generală, în hematologie, pediatrie, infecții, chirurgie.

Indicații

Analiza pentru reticulocite este utilizată pentru a evalua producția de măduvă osoasă eritrocite. Rezultatele studiului fac posibilă diferențierea diferitelor tipuri de anemie. În ceea ce privește reticulocitele, ele sunt împărțite în hiphegegenerator și regenerative. În primul caz, indicatorii de testare sunt redus, producția de eritrocite este insuficientă, funcțiile măduvei osoase oprimate. Acest grup include anemie hemolitică în bolile cronice, intoxicația generală, cașexia, deficiența de proteine, fier, vitamine. Anemia regenerator este însoțită de o creștere compensatorie a nivelului reticulocitelor pe fondul distrugerii armate sau a pierderii celulelor roșii din sânge. Acest grup include postgemorgic și o anemie hemolitică. Analiza pentru reticulocite poate fi utilizată pentru a stabili severitatea anemiei, atunci rezultatele sale sunt completate de nivelul de niveluri de eritrocite, indici de hemoglobină și eritrocite.

Determinarea nivelului de reticulocite este prezentată la un nivel redus de eritrocite, hemoglobină, cu plângeri de oboseală frecventă, dureri de cap, dificultăți de respirație, sânge în urină sau scaun. Cu diagnosticul de anemie, analiza este atribuită pentru a evalua eficacitatea tratamentului. Mai ales adesea este utilizat pentru a monitoriza anemia cauzată de deficiența de fier, vitamina B12 sau acidul folic, precum și dezvoltarea pe fundalul insuficienței renale, a bolilor cronice. Pentru a studia funcția de măduvă osoasă, testul pentru reticulocite este arătat la un nivel ridicat de eritrocite, pentru a determina cauza policeticiei.

Analiza reticulocitelor din sânge nu este utilizată pentru a stabili un diagnostic. Scopul său principal în practica clinică este de a elabora un plan pentru proceduri suplimentare de diagnosticare și de monitorizare a succesului terapiei. Numărul de reticulocite din sânge este relativ stabil, prin urmare, cu o scădere a nivelului eritrocitelor și hematocritului, indicatorii de analiză devin artificial supraestimați. Calculul indicelui reticulocitelor este ajutat la evitarea acestui lucru - numărul absolut de reticulocite (procentul de reticulocite înmulțit cu hematocrit). O altă caracteristică a acestui studiu este că rezultatele indică activitatea recentă a măduvei osoase, deoarece celulele roșii roșii imature sunt circulate în sânge timp de 2 zile.

Pregătirea pentru analiză și gard de material

Sângele pentru analiză la reticulocite este recomandat dimineața, pe stomacul gol. Intervalul minim dintre mese și proceduri este de 3-4 ore. Nu mai puțin de o zi este necesar să abandoneze efortul fizic intensiv, consumul de alcool, evita expunerea la factorii de stres. La alocarea unei analize, este necesar să informați medicul despre medicamentele utilizate, deoarece unele medicamente afectează nivelul reticulocitelor din sânge. Cu 30 de minute înainte de procedura de gard, este necesar să abandonați fumatul, eliminarea tensiunii fizice și emoționale.

Nivelul reticulocitelor este determinat în sânge capilar sau venos. În consecință, gardul este fabricat dintr-un deget fără nume sau de la vena cotului. Sângele este plasat într-un tub de testare cu un anticoagulant și trimis la laborator. În prezent, analizoarele hematologice sunt folosite pentru numărarea reticulocitelor aproape peste tot. Studiul se efectuează prin metoda de citometrie a fluxului - celulele din curgerea fluidului se deplasează printr-o capilară foarte îngustă și sunt luate în considerare atunci când sunt expuse de laser. Calendarul analizei este de o zi.

Valori normale

În rezultatele analizei asupra reticulocitelor, numărul absolut de celule sunt afișate într-un volum unitar de sânge și procentul din eritrocitele totale. În mod normal la pacienții de sex feminin, nivelul reticulocitelor este de la 17 * 109 până la 63,8 * 109 celule / l, la pacienții de sex masculin - de la 23 * 109 până la 70 * 109 celule / l. Ponderea celulelor de acest tip în numărul total de celule roșii din sânge se schimbă odată cu vârsta:

  • de la naștere la 2 săptămâni - de la 0,15 la 1,5%;
  • de la 2 săptămâni la 1 lună - de la 0,45 la 1,4%;
  • de la 2 la 6 luni - de la 0,25 la 0,9%;
  • de la 6 luni la 2 ani - de la 0,2 la 1%;
  • de la 2 la 6 ani - de la 0,2 la 0,7%;
  • de la 6 la 12 ani - de la 0,2 la 1,3%;
  • de la 12 la 18 ani - de la 0,12 la 2,05% pentru fete, de la 0,24 la 1,7% pentru tinerii;
  • de la 18 ani - de la 0,59 la 2,07% pentru femei, de la 0,67 la 1,92% pentru bărbați.

Creșterea fiziologică a nivelului reticulocitelor din sânge apare în timpul postului de oxigen cauzată de creșterea la o înălțime mare sau coborâre la apă, de lungă durată într-o cameră incredibilă, fumatul, aportul de alcool. În plus, o creștere a concentrației de date celulare este uneori determinată la femeile gravide și este considerată o opțiune a normei.

Nivel în sus

Motivul pentru creșterea nivelului reticulocitelor din sânge poate fi sângerare. Concentrația eritrocitelor este redusă pentru ao restabili, măduva osoasă crește produsele predecesorilor lor. În sângerare acută, numărul de reticulocite crește cu 3 sau 4 zile, cu cronică - rămâne în mod constant tot timpul. În cazul bolilor însoțite de hemoliză (distrugerea eritrocitelor), raportul dintre reticulocite depășește în mod semnificativ norma, uneori deviațiile ajung la 300%. Cele mai frecvente patologii ale acestui grup sunt defecte ereditare ale celulelor roșii din sânge, distrugerea lor autoimună, daunele toxice în malarie. Alte motive pentru creșterea nivelului reticulocitelor pot fi policitemie, procese inflamatorii, cancer de măduvă osoasă sau distribuția metastazelor în ea, restabilirea funcțiilor măduvei osoase după radiație și chimioterapie. În tratamentul anemiei, normalizarea concentrației reticulocitelor mărturisește succesul măsurilor terapeutice.

Nivel redus

Motivul pentru reducerea nivelului reticulocitelor din sânge poate fi anemia cauzată de o deficiență de fier, vitamina B12 sau acid folic. În astfel de cazuri, producția de celule sanguine este redusă din cauza lipsei de "material de construcție". Un alt motiv pentru reducerea nivelului reticulocitelor este anemia, care se dezvoltă pe fondul leziunilor măduvei osoase sau oprimarea funcțiilor sale. Modificările de acest tip sunt determinate în intoxicația de alcool, reducând activitatea glandei tiroide, a infecțiilor cronice, a patologiilor autoimune, a bolilor renale și a bolilor toxice, inclusiv a medicamentelor, iradierii.

Tratamentul abaterilor de la normă

În practica clinică, testul pentru reticulocite este cel mai adesea prescris după o analiză generală a sângelui atunci când scade eritrocitele și hemoglobina. Nivelul reticulocitelor vă permite să evaluați funcțiile măduvei osoase, sinteza celulelor roșii din sânge, pentru a determina tipul de anemie, pentru a urmări eficacitatea tratamentului său. Dacă rezultatele studiului sunt abandonate de la normal, merită să căutați sfaturi medicului participant - terapeut, pediatru, hematolog, chirurg. Pentru a preveni influența factorilor fiziologici asupra numărului de reticulocite, este necesar să se excludă situațiile care cauzează postul de oxigen - ascensoare la înălțime sau coborâri sub apă, ședere lungă în camera laminată sau înfundată, fumatul, consumul de alcool.

Recenzii postate pe acest site sunt o opinie personală a celor care i-au scris. Nu se auto-medicamente!

Reticulocite (semnificație clinică și diagnosticare laborator)

(1) reticulocitele având kernelul (eritronomoblaste), iar granulitatea este situată sub forma unei șmecheri dense în jurul kernelului;

(2) reticulocitele având o substanță de plasă de cereale sub forma unui tangler sau a unui chicot;

(3) reticulocitele având o grămadă sub forma unei rețele groase;

(4) reticulocite având o substanță de plasă de cereale sub formă de fire individuale;

(5) reticulocite care conțin boabe separate.

Cu anemie hemolitică (numărul de reticulocite poate ajunge până la 60% sau mai mult (în special creșterea crizelor hemolitice);

Cu o pierdere de sânge ascuțită (timp de 3-5 zile după pierderea de sânge, apare criza reticulocitelor), inclusiv creșterea reticulocitelor face posibilă supravegherea hemoragă ascunsă (de exemplu, la pacienții cu boală ulcerativă a tractului gastrointestinal, tifoid abdominal);

În tratamentul cu anemie cu deficit de fier de fier (în câteva zile (3-10) după începerea tratamentului anti-diamemină al anemiei pernicioase);

Cu un dezavantaj acut de oxigen;

Când metastazele tumorale în măduva osoasă.

Forma anormală a hemoglobinei;

Cu anemie aplastică și hipoplastică argenerată;

Sub anemie cauzată de insuficiența conținutului de fier, vitamina B12, acidul folic (anemie hipocromică microcitică și megaloblastică);

În timpul anemiei sideroblastice;

Când metastaza de cancer în os;

Cu boală de radiații și radioterapie;

În tratamentul citostaticii;

Cu boli autoimune ale sistemului de sângerare;

Pentru bolile renale;

După recurența anemiei cu ADDISON-BUMMER;

Selectarea incorectă a amestecării anticoagulante sau insuficiente a sângelui cu anticoagulantul;

Mâinile strânse cu hamul;

Primirea sulfanimamidelor (ambele rezultate subestimate și supraestimate sunt posibile);

Transfuzia de sânge la scurt timp înainte de studiu;

Hemoliza probelor de sânge.

Estimarea activității eritropoeze în statele însoțite de hemoliză sau de pierdere de sânge;

Data Val a capacității de măduvă osoasă de a se regenera după terapia citotoxică și transplantul de măduvă osoasă;

Prețul de reducere a sintezei eritropoietinei după transplantul de rinichi;

Controlul dopajului în sportivi (aportul de eritropoietină);

Detectarea tulburărilor capacității regenerative a măduvei osoase cu deficiența de fier, vitamine B12, B6, folate, cupru și monitorizare terapia adecvată;

Evaluarea reacției la terapia cu eritropoetină, Edrosupresors.

Reticulocitele ARN, cele mai mature (FFR%, fracțiunile reticulocitei scăzute ale fluorescenței, o fracție reticulocită de fluorescență scăzută);

Ratio RNA reticulocite (Fracțiuni de reticulocite de fluorescență MFR, Fluorescență medie) - fracțiuni reticulocite cu fluorescență medie);

Reticulocite de ARN mari (HFR%, fracțiuni de reticulocite de fluorescență ridicată) - fracțiuni de reticulocite de fluorescență ridicată);

Reticulocite: Ce este, ratele pentru copii și adulți, ridicat și scăzut, rolul în restricție

În general, testul de sânge, este adesea posibil să se întâlnească o astfel de desemnare a celulelor ca reticulocite. În sensul complet, cuvintele celulelor pe care nu le nu au, pentru că nu au un nucleu, chiar ca celule roșii roșii matură. Între timp, definiția acestor formulare nu este inclusă în lista cercetărilor hematologice obligatorii. Dacă aveți nevoie de un medic, acesta este accentuat separat de parametrii săi. Desigur, oamenii care au venit să ia o astfel de analiză, vreau să știu: ce fel de celule sunt reticulocitele pentru celule și de ce sunt la fel de ambigue.

Cine sunt ei și câte?

Reticulocitele sunt "recent mincite" celule roșii din sânge, tocmai au părăsit măduva osoasă.

Norma reticulocitelor în sângele periferice a unui adult este abia depășește 1% (în funcție de diferiți autori de la 0,8 - 1,3 până la 0,2 - 2%). La copiii au apărut numai în lume, pot exista 10%, dar, pe măsură ce copilul crește și se dezvoltă, indicatorii încep să scadă și au abordat deja cele două săptămâni de viață cât mai aproape de valorile normale ale adulților .

În general, eritropoese de nou-născuți este un subiect separat: Analiza luată după 12 ore după naștere prezintă o creștere vizibilă a nivelului de hemoglobină (până la 200 g / l), eritrocite (până la 6,0 x / l și mai mare) și reticulocite. O astfel de imagine a sângelui este observată timp de câteva zile, atunci acești indicatori încep să cadă, care este asociat cu o scădere a producției de eritropoietină. După două săptămâni - luna, producția de eritropoietină crește din nou, ceea ce duce la o creștere a nivelului reticulocitelor, iar eritropoese este normalizată (un copil semi-anual are puțin diferit de adulți). În acest sens, aș dori să atrag atenția cititorului la desemnarea unităților de măsurare a cantității de reticulocite, conținutul poate fi exprimat în ppm, apoi numerele vor crește de 10 ori.

Tabel: Drepturile reticulocitelor după vârstă

Cu toate acestea, vârsta "până în anul" include diferită, foarte responsabilă pentru corpul perioadelor copilului. În plus, va fi de remarcat avizul diferiților autori care iau în considerare alte opțiuni în care normele la copii sunt pictate literalmente până în zile și luni și, prin urmare, diferite de valorile anterioare. Există o diferență vizibilă în standardele adulților.

Pacientul să aleagă să creadă că tabelul, deși în diferite surse puteți găsi câteva bucăți, dar în cazuri îndoielnice nu ar face rău să întrebi în laborator ce metodă este calculată (microscopie sau analizor automat) și ce valori de referință Acest laborator utilizează.

De ce sunt atât de puțin și care sunt rolul lor?

Hemoglobina nu conține hemoglobina, dar are încă kernelul, deoarece ar trebui să fie celula reală, eritrbelul, care, în condiții normale, este transformat în eritroplastul bazofil (prorummoblast, unde primele semne de hemoglobinizare (etapa policromatofilă) sunt deja programate.

Dacă totul este în ordine cu formarea sângelui și condițiile corespund fiziologice, atunci viitorul eritrocite trece de stadiul Prorummoblast și Normoblast (reprezintă etapa finală a dezvoltării celulei roșii din sânge atunci când kernelul este încă prezent). Odată cu maturarea ulterioară a celulei, involuția nucleului apare și următorul predecesor este un normocite din policromatofil, ea încă pierde, transformându-se într-un tânăr Normocyte, numit reticulocite. Reticulocitele de kernel nu mai au, dar conțin hemoglobină și au capacitatea de a transfera oxigen și dioxid de carbon.

Reticulocitele se numără printre indicatorii analiza generală a sângelui, dar căutarea lor este angajată numai în cazurile în care apare nevoia de studiu intensitatea eritropoezului. Numărarea cantității de celule roșii din sânge se face în 1000 de celule roșii din sânge și își pune sarcina de a determina viteza de producere a măduvei osoase din sânge roșu: la produse accelerate - creșterea numărului de reticulocite, cu depresie - scade. Eritropoeza accelerată accelerată poate duce la faptul că măduva osoasă va fi stinsă în mai mult decât este necesar, numărul nu numai reticulocitelor, ci și predecesorii lor - normali. Cu toate acestea, de ce nu ar trebui să calculeze ca alte celule în timpul analizei clinice a sângelui?

Acestea necesită colorare separată

După pierderea kernelului de eritrocit, numai coloranți de acid percep, iar microscopia ușoară nu detectează structuri intracelulare de la ele, permițând elemente uniforme pentru speciile tinere sau mature. Cu toate acestea, puteți găsi reticulocite prin aplicarea unor metode speciale de colorare. Colorarea furnizată a unui portocaliu albastru sau acridină fără diamant, care detectează substanța bazofilă - formarea granulară sau filamentară, ajută la scoaterea într-o mase de masă totală (1000 de celule) de celule roșii din sânge, forme tinere - reticulocite.

Între timp, având o substanță reticulocitică în citoplasmă, care determină numele celulelor (substanța reticulofilamentosa), nu toate acestea sunt "la fel cu fața", prin urmare sunt împărțite în 5 grupe, fiecare dintre ele are propriile sale caracteristici de Substanța bazofilă (BV):

  1. Reticulocitele nucleare, care și-au primit numele datorită localizării BV sub forma unui whin sau nucleu.
  2. Celulele în formă de club - BV amintește de o mandrină sau o minge.
  3. Reticulocitele aproximative - substanța bazofilă este reprezentată de o grilă groasă;
  4. Formele neterminate - BV a rămas ca fire separate.
  5. Reticulocitele prafoase sunt boabe mici în celule și există o substanță bazofilă.

"Tineret" pe termen scurt

În sângele periferic al adulților sănătoși, nu mai mult de 1% dintre tinerii eritrocite circulă, care, în cea mai mare parte, se referă la grupul 4 și 5 (83%). Reticulocitele 3 și 4 grupuri sunt semnificativ mai mici, împreună cu aproximativ 18%, iar 1 grup (celulele nucleare) apar, în general, numai în cazul regenerării sporite.

Eritrocitele sunt în "vârsta frabă" și se numesc reticulocite de mult timp: 30 - 40 de ore de perioadă alocată pe care nu le părăsesc Sturromul măduvei osoase, formând acolo o rezervă de sânge roșie și după ieșire, care este reglementată , în principal hormon glicoprotein hormoral eritropoetin, 35 - 45 ceasuri călătoresc în mod liber prin vasele de sânge. În sângele periferic, reticulocitele spun în cele din urmă la revedere la "adolescența" - pierde cu reticulul și este trimis să îndeplinească funcțiile principale ale unei celule adulte, care, după cum sa menționat mai sus, celula este dificil de numit - nucleele nu au ("derivați de celule").

Aveți nevoie de numărarea reticulocitelor!

În anumite circumstanțe, produsele de eritrocite în măduva osoasă crește, prin urmare, randamentul unor forme tinere în fluxul sanguin crește sau, dimpotrivă, opresiunea formării sângelui va încetini randamentul reticulocitelor și apoi cantitatea lor în sânge vor fi coborâte. O încercare de estimare a eficacității eritropoezei, de regulă, începe cu calculul măduvei osoase proaspăt părului de celule roșii din sânge.

Utilizarea în analiza clinică Desemnarea RET este forțată să suspecteze distrugerea îmbunătățită a eritrocitelor din sânge (hemoliză). Cu toate acestea, aflarea cauzei distrugerii celulelor, apare întrebarea: Cum reacționează măduva osoasă la astfel de evenimente, încearcă să plătească pierderi cu forme tinere sau rămâne indiferentă? În plus, celulele roșii roșii crescute (sau reduse) pot informa despre comportamentul măduvei osoase și în alte circumstanțe:

  • Utilizarea medicamentelor care afectează activitatea principalei organe hematopoietice (preparate din fier, vitaminoterapie în 12 și acid folic);
  • Tratamentul cu eritropoietină, care, așa cum este cunoscut, controlează randamentul reticulocitelor din măduva osoasă);
  • Starea măduvei osoase după transplantul corpului donatorului.

Reticulocitele sunt îmbunătățite - ce înseamnă asta?

Valorile crescute ale conținutului de forme tinere din populația celulelor eritrocite pot indica prezența diferitelor procese patologice și reacția măduvei osoase asupra prezenței acestora:

  1. Este puțin probabil ca pierderea de sânge, în special masivă, nu va forța un creier sănătos să lucreze intens - la urma urmei, pierderile ar trebui să fie completate cât mai curând posibil, prin urmare numărul de reticulocite poate fi majorat la 10 - 12% (‰ sau 100 - 120 de reticulocite la 1000 de celule roșii din sânge - 1/10 parte).
  2. Distrugerea celulelor roșii din sânge datorită loviturii de otrăvuri hemolitice sau, datorită altor circumstanțe, nu va lăsa și măduva osoasă "indiferentă" - decăderea consolidată a eritrocitelor mature va crește omnibar cota de forme tinere (uneori această cotă poate ajunge la 50%).
  3. Nu trece neobservată de o astfel de boală gravă ca anemie hemolitică, ceea ce a dus la o creștere a ret la 300%, adică nu ar trebui căutate reticulocite în celulele roșii din sânge, ci, dimpotrivă, deoarece toate formele vor fi tineri și Adulții vor avea timp să se prăbușească.
  4. Însoțită de reticulocitoză și alte patologii hematologice (policitemie, talasemie), precum și metastaze în neoplaziile măduvei osoase ale diferitelor localizări.
  5. Valorile reticulocitelor vor fi crescute în cazul hipoxiei acute (foame de oxigen) datorită diferitelor circumstanțe care pot continua o persoană din momentul nașterii la bătrânețe.
  6. Cauza cantităților crescute de celule tinere poate fi astfel de infecții cum ar fi malaria.
  7. Reticulocitoza este observată în tratamentul eficient cu preparate din fier cu așteptare (după 1-2 săptămâni), este posibil să se stabilească până la 200% (criza reticulocitelor) aproximativ o săptămână mai târziu de la începutul măsurilor terapeutice în cazul a 12-frunze- anemie cu deficiențe.

Puțin sau deloc deloc

Scăderea nivelului reticulocitelor este observată în oprimarea germenii de eritrocitare a formării sângelui și reducerea produselor de celule roșii roșii cu drepturi depline din diferite motive din care puteți aloca:

  • Anemia aplastică în care toate formațiunile de sânge suferă;
  • Boala renală, sinteza de frânare a eritropoietinei, necesară pentru reglarea eliberării celulelor de măduvă osoasă tineri;
  • Boli hematologice autoimune;
  • Lipsa de vitamina B 12 și acidul folic, care afectează foarte mult funcția măduvei osoase, deoarece este necesar pentru maturarea celulelor. În acest caz, dezvoltarea se oprește la nivelul eritroblastului: celulele de dimensiuni mari, fragile, de aceea nu plastice, care nu au capacitatea de a se scurge în capilare înguste (anemie megaloblastică);
  • Alcoolismul (care este reînnoirea sângelui?);
  • Cazul meu;
  • Metastazele de neoplasme în sistemul osos.

In cele din urma

Căutarea și numărarea reticulocitelor se face în 1000 de celule roșii din sânge, se referă, prin urmare, la testul general de sânge. Dacă o persoană este bine, se pierde tot ceea ce înseamnă a produce o culoare separată și pentru a căuta formulare tinere, care, în astfel de cazuri, nu sunt efectuate informații. Un alt lucru dacă apar suspiciuni că ceva este în neregulă cu linia de eritrocite - atunci aceste celule pot clarifica într-o oarecare măsură situația.

Între timp, în alte cazuri, perceperea acestui studiu, ca un popor separat, întreabă cum să se pregătească pentru analiză pentru a obține un rezultat fiabil. În mod tradițional, UAC este dat pe stomacul gol, pentru reticulocite, iar acest lucru nu este fundamental, astfel încât să nu vă faceți griji. În plus, dacă sângele venos este luat pentru a analiza sau testul este realizat de un analizor automat de înaltă calitate, atunci laboratorul nu va trebui să viziteze laboratorul. Totul va fi marcat în general de testare a sângelui.

Reticulocitele de numărare

Reticulocitele sunt un indicator al numărului de celule, precursorii eritrocitelor produse în măduva osoasă. Reticulocitele - tinerii eritrocite reflectă capacitatea regenerativă a măduvei osoase. Numărarea reticulocitelor este utilizată pentru a estima intensitatea formării sângelui. Studiul se efectuează la: reducerea numărului de eritrocite, hemoliza suspectată, estimarea eritropoezei, în tratamentul anemiei cu fier și vitamina B 12, eritropoeina.

Reticulocitele sunt celule roșii roșii fără nucleare, a cărei maturare apare în timpul ieșirii la sângele periferic din măduva osoasă. Cantitatea de reticulocite formate reflectă activitatea eritropoeică a măduvei osoase. Cu alte cuvinte, conținutul de reticulocite reflectă rata de formare a eritrocitelor și servește ca indicator al răspunsului măduvei osoase la anemizare.

În plus față de parametrii general acceptați ai reticulocitelor - conținutul absolut și relativ (%) al reticulocitelor, apariția unor noi analizatori hematologici (pictura cu coloranți speciali pentru acizi nucleici) a făcut posibilă obținerea unor parametri suplimentari reticulocite:

reticulocite cu un conținut mediu de ARN (MFR%, fracțiune de reticulocite cu fluorescență medie);

reticulocite ARN (HFR%, fracție de reticulocite de fluorescență ridicată);

fracțiunile reticulocitelor imature (IRF%, fracțiunea reticulocitelor imature).

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după pictura de coloranții lor speciale

Numărarea reticulocitelor într-un frotiu după pictura de coloranții lor speciale este în practică cea mai utilizată metodă de numărare a numărului de reticulocite. Acest lucru se datorează faptului că metoda este simplă, destul de ieftină și nu necesită echipamente scumpe speciale, în legătură cu care poate fi utilizat în orice laborator clinic de diagnosticare.

Principiul metodei

Identificarea substanței de plasă de cereale a reticulocitelor cu vopsele alcaline, cu numărare ulterioară a acestora într-un frotiu de sânge.

Reactivi

Puteți utiliza unul dintre următoarele coloranți:

  1. O soluție saturată de cresil albastru în alcool absolut (pentru prepararea alcoolului absolut, este necesar să reziste la etanol 96% în mai multe schimbări ale pulberii de podium de cupru calcinat). La 100 ml de alcool absolut durează 1,2 g de vopsea.
  2. Azura I: Azur I - 1 g oxalat de amoniu - 0,4 g, clorură de sodiu - 0,8 g, alcool etilic 96% - 10 ml, apă distilată - 90 ml. Soluția de vopsea într-o sticlă închisă este plasată pe 2 până la 3 zile într-un termostat la 37 ° C și se agită periodic viguros. Apoi răciți la temperatura camerei și filtrați printr-un filtru de hârtie. Soluția este reținută în mâncăruri de sticlă de groază. Când apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou.
  3. Soluție Azura II: Azur II - 1 g, citrat de sodiu - 5 g, clorură de sodiu - 0,4 g, apă distilată - 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, după ocazional amestecând. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită pe o căldură slabă timp de 15 până la 20 de minute, fără a aduce la fierbere. Se răcește la temperatura camerei și filtrată. Păstrați în vasul de sticlă întunecată.

Echipament special

Progresul

Culoarea reticulocitelor se efectuează fie pe geam, fie în tub.

Pictura reticulocitelor pe sticlă

Atunci când pictează reticulocitele pe sticlă, o sticlă de sticlă de sticlă bine spălată și cu conținut scăzut de grăsimi este încălzită peste un arzător de flacără. Stickul de sticlă este aplicat pe sticlă o picătură de vopsele enumerate mai sus și pregătește curse de sticlă de măcinare a vopselei. Eticheta sticlosului etichetează partea din sticlă pe care se aplică frotiu de vopsea. Într-o astfel de formă de sticlă, puteți pregăti viitorul și puteți depozita într-un loc întunecat uscat. Înainte de a analiza o cameră umedă pregătită. De obicei, pentru acest lucru utilizează un vas Petri cu hârtie de lână sau filtru. Ei aplică o picătură de sânge pe un frotiu de vopsea, ei pregătesc un frotiu subțire de la ea și au pus imediat într-o cameră umedă timp de 3-10 minute. Apoi a uscat frotiurile din aer.

Colorarea reticulocitelor într-un tub de testare

Colorarea reticulocitelor din tub este diferită atunci când se utilizează coloranți diferiți.

Metoda 1 - Colorarea reticulocitelor în a vitro cu un albastru cu diamante cresil.

Înainte de utilizare, o soluție de lucru a unui albastru de diamant albastru este preparată într-un tub de testare la o picătură de 1% soluție de oxalat de potasiu 4 picături de soluții de vopsea cu cilindru cu diamant. Se adaugă 0,04 ml de sânge (două pipete până la eticheta 0.02). Amestecul este cu atenție, dar agitat cu atenție și se lasă timp de 30 de minute. Apoi agitat și pregătiți lovituri subțiri.

Metoda 2 - Pictura reticulocitelor într-un tub Azur II.

0,05 ml soluție de vopsea Azur II și 0,2 ml de sânge sunt plasați în tub. Amestecul este bine amestecat și lăsat timp de 20 până la 30 de minute. Se amestecă din nou și pregătește curse subțiri.

Metoda 3 - colorarea reticulocitelor într-un tub azur I.

Tubul de testare este plasat 0,3 - 0,5 ml din soluția de vopsea Azur I și 5 - 6 picături de sânge cu o pipetă din aparatul Panchenkov. Tubul este închis cu un dop de cauciuc, amestecul este agitat cu atenție și lăsat timp de 1 până la 1,5 ore (reticulocitele sunt pictate mai bine atunci când expunerea de 1,5 - 3 ore). Se amestecă și pregătește curse subțiri.

În prezent, există coloranți gata pentru reticulocitele fabricației din fabrică. Pictura reticulocitelor cu ajutorul lor este făcută conform instrucțiunilor atașate.

Numărarea reticulocitelor.

Gătit într-unul dintre microscopiele de frotițe menționate mai sus, cu o lentilă de imersie. În frotiu, reticulocitele și celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de cereale în reticulocite - la albastru (când pictează azur și diamant cresil albastru) sau o culoare de cinema-purpuriu (când pictează azur I) .

Fotografii de reticulocite:

Găsiți priveliști de vedere unde se află celulele roșii din sânge separat. În aceste domenii de vedere, este necesar să se calculeze cel puțin 1000 de celule roșii din sânge și să notă dintre acestea numărul de eritrocite care conțin substanța cereale-nitale. Se obține o precizie mai mare atunci când se numără pentru 2000 - 3000 de celule roșii din sânge.

Datorită faptului că, în câmpul de vedere, există un număr mare de eritrocite, ceea ce face dificilă contabilizarea, este necesar să se limiteze (reduce) un câmp de vedere. Pentru a face acest lucru, puteți utiliza fie un ocular special, în care puteți reduce câmpul de vedere la dimensiunea dorită sau utilizați fereastra specială (de la hârtie tăiați cercul cu un diametru oarecum mai mic decât ocularul, un mic Rinombiația este tăiată în centrul cercului și introduceți fereastra obținută în ocular).

Numărul de reticulocite estimate este exprimat cu 100 (ca procent) sau 1000 (în Promill) al celulelor roșii din sânge.

Exemplu: La calcularea într-un frotiu de 1000 de celule roșii din sânge, s-a arătat că 15 eritrocite de la 1000 au o substanță de plasă de cereale de un grad sau altul, adică sunt reticulocite. În consecință, numărul reticulocitelor în acest caz este de 1,5% sau 15.

Literatură:

  • Directorul "Metode de laborator de cercetare în clinică" editat de Mennshikova V. V. - Moscova, "Medicină", \u200b\u200b1987
  • Lyubina A. Ya., Ilyicheva L. P. și Co-Autori - "Cercetare de laborator clinice" - Moscova, "Medicină", \u200b\u200b1984

Numărarea cantității de reticulocite cu microscopie fluorescentă

Metoda de numărare a cantității de reticulocite cu microscopie luminescentă este caracterizată prin simplitate și necesită puțin timp, mai precisă în comparație cu metoda obișnuită, deoarece cele mai mici boabe ale substanței net-nichly se găsesc în microscopie luminoasă.

Reticulocite

Reticulocitele sunt tinere eritrocite formate după pierderea normobilizărilor nucleelor. Caracteristica caracteristică a reticulocitelor este prezența unei substanțe frumoase (reticulum), reprezentând ribozomi agregați și mitocondriile în citoplasma lor.

Incluziile patologice în celulele roșii din sânge

Taurus Zholley (Taurus Hauella-Zholly) - Incluziile roșii rotunde roșii în dimensiuni se găsesc la 1 (mai puțin adesea 2 - 3) într-o singură celulă roșie din sânge. Contemporan Kernel-ul rămâne după îndepărtarea RES. Revelate cu hemoliză intensivă și "bloc" res, după splenectomie, cu anemie megaloblastică ..

Studiul citochimic Lipid.

Studiul citochimic al lipidelor se bazează pe utilizarea substanțelor de colorare care dizolvă în grăsimi (Sudan III, Sudan IV, Sudanul negru etc.). Pentru a identifica grăsimile neutre, se utilizează Sudan III, pictura de grăsime în culoarea portocalie. Lipoidele sunt mai bine detectate de Sudan Negru (colorarea neagră).

Analiza urinei în Nechiphenko

Metoda Nechiphenko din diagnosticarea internă a laboratorului este cea mai comună metodă de cuantificare a elementelor de formare în urină. Această metodă este cea mai simplă, disponibilă pentru orice laborator și este convenabilă în practică în ambulatoriu și are, de asemenea, câteva avantaje față de alte metode cantitative bine cunoscute pentru studierea precipitatului de urină. Conform metodei, numărul de elemente în formă (eritrocite, leucocite și cilindri) este determinat cu 1 ml de urină.

© 18 Diagnosticare laborator

Numărarea reticulocitelor în sânge (cantitate)

Ce sunt reticulocitele (reticulocitele)?

Reticulocitele sunt uniforme tinere de eritrocite (predecesorii de celule roșii roșii mature) care conțin o substanță de cereale frumos detectată cu o culoare specială (compatibilă). Reticulocitele sunt detectate atât în \u200b\u200bmăduva osoasă, cât și în sângele periferic. Timpul de maturare a reticulocitelor este de 4-5 zile, din care se coaceau in sange periferice timp de 3 zile, dupa care devin celule mature din sange din sange. Reticulocitele nou-născute se găsesc în cantități mai mari decât adulții.

Numărul de reticulocite din sânge reflectă proprietățile regenerative ale măduvei osoase. Numărul lor este important pentru a evalua gradul de activitate al eritropoezei (produsele de eritrocite): Atunci când accelerează eritropoese, proporția de propacilocitică crește și în timpul scăderii încetinirii. În cazul distrugerii sporite a celulelor roșii din sânge, cota de propacculocite poate depăși 50%. O scădere bruscă a numărului de eritrocite în sângele periferic poate duce la o supraestimare artificială a numărului de reticulocite, deoarece acesta din urmă este calculat în% din toate eritrocitele. Prin urmare, un "indice reticulos" este utilizat pentru a evalua severitatea anemiei:% din reticulocitele x hematocrit / 45 x 1,85, unde 45 este hematocrit normal, 1,85 - numărul de zile necesare pentru primirea de noi reticulocite în sânge. Dacă indexul< 2 – говорит о гипопролиферативном компоненте анемии, если > 2-3, apoi o creștere a formării eritrocitelor.

Indicații pentru analiza testului:

  • diagnosticarea hemopowerului ineficient sau reducerea produselor de eritrocite;
  • diagnosticul diferențial al anemiei;
  • evaluarea reacției la terapie cu fier, acid folic, vitamina B12, eritropoeina;
  • efectul monitorizării transplantului de măduvă osoasă;
  • monitorizarea terapiei cu eritroppresoare.
  • Pregătirea pentru studiu: Studiul se efectuează pe stomacul gol sau cel puțin 2 ore după
  • ultima masă, atunci când luați sânge, este necesar să se evite compresia pe termen lung a cablajului venei.

Când crește numărul de reticulocite (reticulocitoză)?

  • Anemia postgrimică (criza reticulocitelor, o creștere de 3-6 ori).
  • Anemie hemolitică (până la 300%).
  • Lipsa acută de oxigen.
  • Tratamentul anemiei cu deficit de B12 (criza reticulocitelor Nadia Vitamina C12 Terapie).
  • Terapia anemiei cu deficit de fier de preparate din fier (Ziua tratamentului).
  • Thalassemia.
  • Malarie.
  • Politică.
  • Tumorile de metastaze în măduva osoasă.

Când scade numărul de reticulocite?

  • Anemie aplastica.
  • Anemie hipoplastică.
  • Anemia cu deficiențe necurate B12.
  • Metastaze de neoplasme în os.
  • Bolile autoimune ale sistemului de formare a sângelui.
  • Myxedem.
  • Boli ale rinichilor
  • Alcoolism.

Reticulocite

Reticulocite - eritrocite tinere formate după pierderea nucleelor \u200b\u200bnormoblastelor. O particularitate caracteristică a reticulocitelor este prezența unei substanțe frumoase în citoplasmă reprezentând ribozomi agregați și mitocondriile. Această substanță este detectată cu o metodă specială de colorare - furnizată (ridicată), care este, fără celule de pre-fixare. Substanța de cereale în diferite reticulocite se distinge prin polimorfism; decât o celulă mai mică decât substanța este mai abundentă. La cele mai tinere reticulocite, are forma unei minge groase, celulele mai mature sunt detectate sub forma unei ochiuri, fire individuale și apoi boabe individuale. În frotiurile pictate prin metode hematologice convenționale, reticulocitele culorilor gri-roz sunt filme policromatice, adică vopsită cu coloranți diferiți.

Determinarea cantității de reticulocite se efectuează în timpul microscopiei frotiurilor special vopsite

3.2.1 Metode de culoare a frotiurilor de sânge pentru reticulocite de Alekseev (numărarea pe Fonio)

Principiu: Metoda se bazează pe numărarea numărului de reticulocite în frotiuri de sânge pictate pe 1000 de celule roșii din sânge. 2 frotiuri (pe trombocite și reticulocite) sunt preparate în același timp.

Reactiv: soluția de vopsea de lucru a lui Alekseev

Curs de definiție: În capilarul pentru determinarea ESP, soluția de lucru câștigă la eticheta 0,75 pl și capilarul plin de sânge din puncția degetului pacientului. Raportul colorantului la sânge este 1: 4. Amestecul este lăsat timp de 2 ore, apoi faceți o frotiu subțire pe geamul glisier. Smearul este uscat în aer și microscopic cu imersie.

Numărarea se face după cum urmează: Grilele reticulocite sunt pictate în albastru. În timpul numărării eritrocitelor, numărul de reticulocite consideră în domeniul de vedere. Numără 1000 de celule roșii din sânge. Rezultatul este exprimat ca procent.

Valoarea de reglementare: în sângele unei persoane sănătoase conține 0,2-1,0%

(sau 2-10 este permisă chiar și a 12 reticulocite industriale)

Valoarea clinică și diagnostică: aspectul reticulocitelor în sângele periferic indică funcționarea măduvei osoase îmbunătățite și este utilizată în evaluarea diferitelor tipuri de anemie.

Creșterea numărului de reticulocite se observă după pierderea sângelui, cu anemie hemolitică

Reticulocitoză bruscă - marcată cu icter hemolitic

Reducerea numărului de reticulocite în prezența anemiei vorbește despre un tip aplazic de formare a sângelui.

În funcție de nivelul reticulocitelor din sânge, anemia este împărțită în:

Regenerator (numărul de reticulocite este de 0,5-5% - acestea sunt anemie postgamă);

Hiperegenerator (numărul de reticulocite mai mari de 5% este anemia hemolitică);

Gipo - și Argene (numărul de reticulocite este redus sau sunt absente, în ciuda cursei grave a anemiei - și aplaze, fier și. În anemie cu 12 deficitare).

Metoda de colorare supravarală a reticulocitelor.

Detectarea substanței de plasă de cereale a reticulocitelor atunci când pictează un albastru cu diamant-cresil fără fixare preliminară.

Soluția 1% cu diamant-cresil albastru: 50 mg de vopsea este dizolvată în 5 ml de soluție fiziologică și se adaugă 20 mg citrat de sodiu (soluția este stocată într-un vas de sticlă întunecată, potrivit pentru mai multe zile).

2 picături de soluție de 1% a vopselei de diamant albastru albastru albastru și 1 picătură de sânge sunt aplicate pe sticla subțire cu orificiul. Se agită cu grijă cu un baston de sticlă și amestecul este plasat într-o cameră umedă (vasul Petri în care există roluri ușor umezite de tifon sau lână în margini) timp de 30 de minute la temperatura camerei. Apoi faceți curse și uscate.

În accidente vasculare cerebrale, celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verde, iar substanța de plasă de cereale din reticulocite - în culoarea albastră și violet.

Microscopicul microscopic cu lentile de imersie. Numărarea reticulocitelor este produsă de 1000 de celule roșii din sânge (o precizie mare se obține prin numărarea eritrocitelor).

O creștere a numărului de reticulociteobservate la:

stimularea eritropoeză (pierdere de sânge, hemoliză, criză reticulocită cu un tratament cu succes în anemie de 12 stații, lipsa acută de oxigen).

Reducerea numărului de reticulociteobservate la:

inhibarea eritropoezei (anemie aplastică și hipoplastică, netratată în anemie identică, metastază de cancer în os),

boli ale rinichilor, bolilor endocrine.

Metode de calcul al numărului de reticulocite

(1) Numărarea numărului de reticulocite în frotiu după pictura de coloranții lor speciale. Această metodă este în practică cea mai utilizată metodă datorită faptului că este simplu, destul de ieftin și nu necesită echipamente scumpe speciale, respectiv, pot fi utilizate în nici un laborator clinic de diagnosticare. Principiul metodei se bazează pe detectarea unei substanțe de plasă de cereale de reticulocite cu culoarea antică cu vopsele alcaline (soluție saturată de cilindru de diamant albastru în soluție absolută alcool / Azura I / Azura II), cu numărarea ulterioară a acestora în sânge frotiu. Culoarea reticulocitelor se efectuează fie pe geam, fie în tub. Numărarea se efectuează utilizând un microscop: a gătit una dintre metodele de mai sus ale microscopicului cu o lentilă de imersie; În frotiu, reticulocitele și celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de cereale în reticulocite - la albastru (când pictează azur și diamant cresil albastru) sau o culoare de cinema-purpuriu (când pictează azur I) . (2) Numărarea numărului de reticulocite cu microscopie luminescentă. Această metodă este caracterizată de simplitate și necesită un timp mic, mai precis comparativ cu metoda obișnuită, deoarece cu microscopie luminescentă, se găsesc cele mai mici boabe ale substanței net-nichly, dar este posibilă numai dacă există un microscop fluorescent și special coloranți și, prin urmare, sunt disponibile doar câteva laboratoare.. Principiul calculării numărului de reticulocite cu microscopie fluorescentă se bazează pe utilizarea capacității substanței reticulocitelor la fluoresce după procesarea portocaliei de acridină din sânge. Sângele este amestecat cu portocaliu de acridină într-un tub sau mixer de testare într-un raport de 1 parte a sângelui și 10 părți ale vopselei (amestecul poate fi stocat nu mai mult de 5 ore). Amestecul este agitat timp de 2 minute, picătură a amestecului este aplicată pe diapozitiv și acoperită cu sticlă de acoperire. În acest caz, lichidul nu trebuie să depășească sticla de acoperire. Microscopic utilizând filtrul filtrului ZHS-17. În preparare, celulele roșii din sânge au contururi verzi închise și nu fluoresse, iar în reticulocite, substanța de plasă de cereale este strălucitoare cu roșu strălucitor, datorită căruia reticulocitele sunt ușor de calculat. În sânge, o heparină stabilizată sau citrat de sodiu, fluorescența reticulocitelor nu este observată. (3) Numărarea automată a cantității de reticulocite cu analizor hematologic. În analizoarele hematologice moderne, tehnologia de numărare a elementelor de formare a sângelui se bazează pe metoda dirijoare propusă de H. Wallace și Joseph R. CULTER În 1947, principiul metodei constă în calcularea numărului și determinarea caracterului impulsurilor care decurg din trecerea celulei prin orificiul diametrului mic (diafragma), pe ambele părți ale căror doi electrozi izolați unul de celălalt. Fiecare trecere a celulei prin diafragmă este însoțită de aspectul unui impuls electric, care este înregistrat de un senzor electronic. Separarea celulelor pe categorii (eritrocite, leucocite, trombocite, precipitate) se efectuează de către dispozitivul bazat pe analiza amplitudinii impulsurilor obținute. Pentru a determina concentrația de celule, este suficient pentru a sări peste o anumită cantitate de eșantioane prin canal și calculați numărul de impulsuri care sunt generate. În plus față de parametrul clasic al reticulocitelor, conținutul relativ (%) al reticulocitelor (RET%, procentul reticulocitelor), determinat utilizând 1 și 2 metode de diagnosticare de laborator, datorită apariției analizoarelor hematologice de înaltă tehnologie (3 Metodă), A devenit posibilă primirea (de exemplu, utilizând un colorant fluorescent brevetat pentru analizor SYSMEX-XXT-2000I) parametri de reticuloci informativi suplimentari: reticulocite ARN de nivel scăzut, cele mai mature (LFR%, fracțiuni reticulocite cu fluoresis redus, o fracție reticulocită cu fluorescență scăzută ); Ratio RNA reticulocite (Fracțiuni de reticulocite de fluorescență MFR, Fluorescență medie) - fracțiuni reticulocite cu fluorescență medie); Reticulocite de ARN mari (HFR%, fracțiuni de reticulocite de fluorescență ridicată) - fracțiuni de reticulocite de fluorescență ridicată); Fracțiunile reticulocitelor imature (IRF%, fracțiunea reticulocitelor imature). Diferențierea reticulocitelor pe baza gradului de maturitate și, în consecință, conținutul acizilor nucleici este o reflectare a activității hematopoietice a măduvei osoase. Metodologie (analizor sysmex -xt-2000i). În cuvă curgătoare, celulele traversează fasciculul laserului semiconductor, în timp ce fasciculul este eliminat sub unghiuri mari și joase și excitația unui colorant fluorescent. Acest lucru vă permite să determinați diferitele etape ale maturității reticulocitelor asupra conținutului ARN în celule și intensitatea strălucirii lor. Numărarea automată a reticulocitelor este caracterizată de o precizie ridicată (se calculează mai mult sau mai reproductibilă (coeficientul de variație este de aproximativ 6%). Această tehnologie oferă numărarea exactă a reticulocitelor chiar și cu concentrațiile lor extrem de scăzute.

Reticulocitopenia și reticulocitoza, cauzele dezvoltării, semnificația diagnostică a detectării acestora.

Reticulocite

Reticulintele sunt tinere eritrocite formate după pierderea Normoblastelor din nuclee. O particularitate caracteristică a reticulocitelor este prezența unei substanțe frumoase în citoplasmă reprezentând ribozomi agregați și mitocondriile. Această substanță este detectată cu o metodă specială de colorare - la subiect, adică fără celule pre-fixare. Substanța de cereale în diferite reticulocite se distinge prin polimorfism: ceea ce o celulă este mai mică, substanța este mai abundentă. La cele mai tinere reticulocite, are forma unei minge groase, celulele mai mature sunt detectate sub forma unei ochiuri, fire individuale și apoi boabe individuale. În frotiurile pictate prin metode hematologice convenționale, reticulocitele culorilor gri-roz sunt filme policromatice, adică vopsită cu coloranți diferiți.

Determinarea cantității de reticulocite se face în microscopie de frotiuri special vopsite.

Metodă unificată de numărare a cantității de reticulocite după vopsirea de către cresilul diamantului albastru, Azur I sau Azur II direct pe geam sau în tub (1972).

Colorarea supranvitală cu coloranți care detectează substanța de cereale-nitrați a reticulocitelor.

Reactivi. Puteți utiliza unul dintre următoarele coloranți.

1. O soluție saturată de albastru de diamant cresil în alcool absolut (pentru prepararea alcoolului absolut, este necesar să reziste la etanol 96% în mai multe schimbări ale pulberii de dispoziție de cupru calcinat). La 100 ml de alcool absolut durează 1,2 g de vopsea.

2. Azura I, propusă de P. N. Kinicov: Azur 1 - 1 g oxalat de amoniu - 0,4 g, clorură de sodiu-0,8 g, alcool etilic 96% 10 ml, apă distilată - 90 ml. Soluția de vopsea din flaconul închis este plasată timp de 2-3 zile în termostat la 37 ° C și se agită periodic viguros. Apoi răciți la temperatura camerei și filtrați printr-un filtru de hârtie. Soluția este reținută în mâncăruri de sticlă de groază. Când apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou.

3. Azura II a următoarei compoziții: Azur II 1 g, citrat de sodiu 5 g, clorură de sodiu, 0,4 g apă distilată 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, interferează periodic. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită pe o căldură slabă în debit, fără a aduce la fierbere. Răcit la temperatura camerei și filtru). Păstrați în vasul de sticlă întunecată.

Echipament special. Microscop.

Sticla de sticlă de sticlă bine spălată și scăzută este încălzită deasupra arzătorului de flacără. Stickul de sticlă este aplicat pe un pahar de picătură de unul dintre coloranți și pregătiți o cursă de vopsea cu sticlă de măcinare. Etichetăm partea din sticlă la care se aplică frotiu de vopsea, sticlos. Într-o astfel de formă de sticlă, puteți pregăti viitorul și puteți depozita într-un loc întunecat uscat. Ei fac o picătură de sânge pe un frotiu de vopsea, ei pregătesc un frotiu subțire de la ea și au pus imediat într-o cameră umedă timp de 3-4 minute (puteți folosi o feluri de mâncare Petri cu lână așezată sau hârtie de filtru pe margini). Apoi a uscat frotiurile din aer.

În cursa gătită de celule roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzuie, o substanță de cereale - în culoarea albastră.

Metoda 1: Înainte de utilizare, se prepară o soluție de lucru a unui albastru de diamant albastru în tubul la o picătură de 1% oxalat de potasiu soluție 4 picături de soluție de vopsea 1. Se adaugă 0,04 ml de sânge (două pipete până la eticheta 0.02). Amestecul este bine, dar agitat cu atenție și se lasă timp de 30 de minute. Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Metoda 2: 0,05 ml soluție de vopsea 3 și 0,2 ml de sânge sunt plasate în tubul de testare. Amestecul este bine amestecat și lăsat de namin. Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Metoda 3: 0,3-0,5 ml soluție de vopsea 2 și 5-6 picături de pipetă de sânge din aparatul Panchenkov sunt plasate în tub. Tubul de testare este acoperit cu un dop de cauciuc, amestecul este cu grijă, dar agitat cu atenție și lăsat timp de 1-2 ore (reticulocitele sunt preocupate în timpul expunerii de 2-3 ore). Se amestecă și pregătește curse subțiri.

În accidente vasculare cerebrale, celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de cereale în culoarea albastră sau violet albastru.

Gătit într-unul dintre microscopiele de frotițe menționate mai sus, cu o lentilă de imersie. Este necesar să se calculeze cel puțin 1000 de eritrocite și să notă dintre acestea numărul de eritrocite care conțin o substanță granitară-nitală. Aproape pentru o precizie mai mare, ei folosesc un ocular special, în care puteți reduce câmpul de vedere la dimensiunile necesare. Cu lovituri subțiri uniforme în care eritrocitele sunt situate într-un rând, ele selectează un astfel de câmp de vedere în care există, de exemplu, 50 de eritrocite și apoi calculează 20 de astfel de câmpuri.

În absența unui ocular gata, poate fi ușor pregătit, pentru care ocularul este deșurubat, puneți-l în ea o bucată de hârtie cu o pătrată și un șurub tăiat.

Numărul de reticulocite numeroase este exprimat cu 1000 sau 100 de eritrocite.

Numărarea numărului de reticulocite cu microscopie luminescentă.

Folosind capacitatea unei substanțe a reticulocitelor la fluoresce după tratarea sângelui cu portocaliu de acridină.

1. Soluție portocalie acridină pe o soluție izotonică de clorură de sodiu și o concentrație de 1: 5000. Pentru prepararea soluției izotonice, se recomandă utilizarea apei distilate pH 5,8-6,8, o soluție de portocale de acridină trebuie să fie proaspătă; Stocați-o mai mult de 3-5 zile într-o sticlă închisă cu un dop de montaj.

2. Uleiul de imens de umiditate.

Puteți utiliza ulei de imersie aphluolog sau obișnuit cu fluorescență, respinsă de nitrobenzen (0,3 ml de nitrobenzen pe 1 ml de ulei). Yu. N. Zubytsky ca un ulei rezistent la ulei propune utilizarea unui anisol umed.

Echipament special. Microscop Ultraviolet Muif Zm sau Luminesscent.

Sângele este amestecat cu portocaliu de acridină într-un tub sau mixer de testare într-un raport de 1 parte din sânge și 10 părți ale vopselei (amestecul poate fi stocat nu mai mult de 5 ore). Amestecul este agitat timp de 2 minute, picătură a amestecului este aplicată pe sticla de diapozitive și acoperită cu sticlă de acoperire.

Microscopic utilizând filtrul filtrului ZHS-17.

În preparare, celulele roșii din sânge nu sunt fluorescente, iar în reticulocite, substanța cereale-nitale strălucește cu roșu strălucitor.

Se observă că în sânge stabilizat de heparină sau citrat de sodiu, fluorescența reticulocitelor nu este observată.

Metoda este caracterizată prin simplitate și necesită ceva timp; Datorită strălucirii strălucitoare, reticulocitele sunt ușor de calculat.

Valori normale. La sanatos, numărul de machiaj reticulocite sau 0,2-1,2%.

Numărul de reticulocite din sânge reflectă proprietățile regenerative ale măduvei osoase, iar evaluarea acesteia este utilizată pe scară largă în diferite anemie (vezi Tabelul 24). Creșterea numărului de retratretocite este observată după sânge, cu anemie hemolitică, în special în timpul perioadei de criză (numărul de reticulocite poate fi%), precum și în contextul tratamentului anemiei ADENER prin vitamina B12 (reticulocite Criza - creșterea numărului de reticulocite în a 4-8-a zi de tratament). Reducerea numărului de reticulocite este caracteristică anemiei hipoplazice, recurența anemiei cu ADDISEN-BUMMER

Determinarea cantității de reticulocite poate fi utilizată pentru a determina producerea de eritropoeză și calcularea duratei de viață a eritrocitelor.

Literatură. Gomzakov N. V. V. Lab, cazul, 1960, nr. 5, p. 38-39;

ZUBITSKY YU. N. LAB. o afacere; 1967, № 2, p. 35;

Reticulocitele de numărare

Principiu. Colorarea supranvitală cu coloranți care dezvăluie substanța de boabe de cereale a reticulocitelor.

Reactivi. Puteți utiliza una dintre următoarele coloranți: 1) o soluție saturată de diamant cresil albastru într-un alcool etilic absolut. Pentru prepararea alcoolului absolut, este necesar să reziste la etanol 96% în mai multe schimbări ale pulberii de dispoziție de cupru calcinat. Pe 100 ml de alcool absolut durează 1,2 g de vopsea; 2) Soluția Azura 1 conform P. N. Kinikov: Azur I - 1 g; Oxalatul de amoniu - 0,4 g; clorură de sodiu - 0,8 g; 96% alcool etilic - 10 ml; Apă distilată - 90 ml. Soluția de vopsea din flaconul închis este plasată timp de 2-3 zile în termostat la 37 ° C și se agită periodic viguros. Apoi răciți la temperatura camerei și filtrați printr-un filtru de hârtie. Soluția este stocată în mâncăruri de sticlă de groază. Când apare sedimentul, vopseaua trebuie filtrată din nou; 3) Soluția Azura II: Azor II - 1 g; citrat de sodiu - 5 g; clorură de sodiu - 0,4 g; Apă distilată - 45 ml. Soluția este lăsată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile, experimentată periodic. Pentru a accelera dizolvarea, vopseaua poate fi încălzită pe o căldură slabă timp de 15-20 de minute, fără a aduce la fierbere. Se răcește la temperatura camerei și filtrată. Păstrați în vasul de sticlă întunecată.

Cursul de definiție. Colorarea pe sticlă. Sticla de sticlă de sticlă bine spălată și scăzută este încălzită deasupra arzătorului de flacără.

Stickul de sticlă este aplicat pe un pahar de picătură de unul dintre coloranți și pregătiți o cursă de vopsea cu sticlă de măcinare. Etichetăm partea din sticlă la care se aplică frotiu de vopsea, sticlos. Într-o astfel de formă de sticlă, puteți pregăti viitorul și puteți depozita într-un loc întunecat uscat. Aplicați o picătură de sânge pe frotiu de vopsele, pregătesc frotirea de ardere din ea și plasate imediat într-o cameră umedă timp de 3-4 minute (puteți folosi un vas Petri cu lână, tifon sau hârtie de filtru cu role). Apoi a uscat frotiurile din aer.

În cursa pregătită, loviturile de eritrocite sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de plasă de cereale - în culoarea albastră.

Colorarea în tubul de testare. Metoda 1: Înainte de utilizare, o soluție de lucru de albastru cu diamant cresil este preparată într-un tub de testare la o picătură de 1% soluție de oxalat de potasiu 4 picături de soluție de vopsea (reactiv 1). Se adaugă 0,04 ml de sânge (două pipete până la eticheta 0.02). Amestecul este bine, dar agitat cu atenție și se lasă timp de 30 de minute. Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Metoda 2: 0,05 ml soluție de vopsea 3 și 0,2 ml de sânge sunt plasate în tub. Amestecul este agitat temeinic și lăsat timp de 20-30 de minute. Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Metoda 3: 0,3-0,5 ml soluție de vopsea 2 și 5-6 picături de pipetă de sânge din aparatul Panchenkov sunt aduse în tubul de testare. Tubul este închis cu un dop de cauciuc, amestecul este agitat cu atenție și lăsat timp de 1-1,5 ore (reticulocitele sunt preocupate atunci când expunerea este de 1,5-3 ore). Se amestecă și pregătește curse subțiri.

Numărarea reticulocitelor. În accidente vasculare cerebrale, celulele roșii din sânge sunt vopsite într-o culoare galben-verzui, o substanță de plasă de cereale - în culoarea albastră sau albastră.

Gătit într-unul dintre microscopiele de frotițe menționate mai sus, cu o lentilă de imersie. Este necesar să se calculeze cel puțin 1000 de celule roșii din sânge (se obține mai multă precizie atunci când se calculează 2000-3000 eritrocite) și să notă dintre acestea numărul de celule care conțin o substanță de plasă de cereale. În practică, pentru o mai mare precizie, se folosește ocularul special, în care puteți reduce câmpul de vedere la dimensiunile necesare. Cu lovituri subțiri uniforme în care eritrocitele sunt situate într-un rând, ele selectează un astfel de câmp de vedere în care există, de exemplu, 50 de eritrocite și apoi calculează 20 de astfel de câmpuri.

În absența unui ocular gata, poate fi ușor pregătit, pentru care ocularul este deșurubat, puneți-l în ea o bucată de hârtie cu o pătrată mică tăiată și un șurub. Numărul de reticulocite numeroase este exprimat cu 1000 sau 100 de eritrocite.

\u003e Numărarea reticulocitei

Aceste informații nu pot fi utilizate în timpul tratamentului cu auto-tratament!
Asigurați-vă că consultați un specialist!

Ce aveți nevoie de numărare reticulocite?

Numărarea reticulocitelor este un test de laborator al sângelui, care permite evaluarea eficacității eritropoisului. Eritropourile se numește procesul de formare a eritrocitelor în măduva osoasă. Iar reticulocitele sunt celule sanguine care sunt o formă de tranziție între predecesorii celulelor roșii din sânge formate în măduva osoasă și eritrocitele care circulă în sânge. Numărul lor arată cât de intens apare procesul de formare a sângelui.

În ce cazuri calculează eritrocitele?

Necesitatea numărului de reticulocite apare atunci când se găsesc semne de tulburări de anemie sau eritroproutine în analiza clinică: o scădere sau o creștere a numărului de eritrocite sau concentrații de hemoglobină, apariția eritrocitelor de dimensiuni sau forme anormale etc. Studiul ajută la diagnosticarea Tipul de anemie și monitorizați procesul de tratament. Numărarea reticulocitelor se efectuează, de asemenea, pentru a monitoriza eficacitatea terapiei chimice și a radiațiilor în tumorile măduvei osoase.

Cine poate ajuta analiza și unde se poate face?

Analiza poate prescrie terapeutul, pediatru, hematolog, infecțioasă, chirurg sau ginecolog. Se face în clinici de stat și în centrele medicale private care îndeplinesc tensiunea arterială pentru cercetarea de laborator. Pentru a calcula reticulocitele, sângele este luat de la un deget sau de la venele și îl examinează sub microscop sau cu un analizor hematologic. Rezultatul analizei este gata a doua zi.

Cum să vă pregătiți pentru cercetare?

Unii agenți antiinflamatori nesteroidieni, antibiotice ale grupului de fluorochinolonă și tetraclină, derivați de nitrofuran, tranchilizante, tihyretetic și alte medicamente pot afecta rezultatul analizei. Prin urmare, cu o zi înainte de studiu, este recomandabil să se oprească recepția de droguri, după ce anterior a coordonat anularea lor de o zi cu medicul. Cu 2-3 ore înainte de gardul de sânge, nu este de preferință să nu fumezi. Puteți bea apă curată fără gaz.

Ce cantitate de reticulocite este considerată normală?

În valori absolute, numărul reticulocitelor la femei trebuie să fie de 17-63,8 x 10 ^ 9 / l, la bărbați, acesta variază de la 23 la 70 x 10 ^ 9 / l. În procente, reticulocitele sunt de la 0,5 la 1,9% din numărul total de eritrocite. Cea mai mare cantitate de celule roșii roșii imature este sărbătorită la copii nou-născuți (în funcție de diverse date de la 5 la 15%). Cu vârsta, numărul lor scade treptat. Creșterea numărului de reticulocite este sărbătorită la însărcinată, fumători și alpiniști.

Ce boli pot vorbi abaterile de la normă?

Creșterea cantității de reticulocite se numește reticulocitoză, reducând reticulociteneenia. Prin ea însăși, nivelul reticulocitelor nu este baza pentru formularea oricărui diagnostic, dar permite medicului să sugereze mai corect care este procesul patologic în organism.

Reducerea numărului de reticulocite sau chiar absența lor completă este observată sub diferite tipuri de anemie (hipoplastică, aplastică, sederoblastică, cauzată de un dezavantaj de fier, acid folic, vitamina B12), în timpul metastazelor tumorale din os, în tratamentul citostaticii , radiații și radioterapie.

Cauzele reticulocitozei pot fi anemie hemolitică (în acest caz, numărul de reticulocite atinge 60 sau mai mult procente), pierderea de sânge accentuată (cu 3-4 zile după ce are loc cu criza reticulocitelor), malaria, policitemia, tratamentul anti-diamemină , lipsa acută de oxigen. O cantitate crescută de reticulocite poate indica sângerări ascunse (de exemplu, persoanele cu boală peptic).

© 2021 Huhu.ru - gât, examinare, nas curbat, boli ale gâtului, migdale