Ki 67 что означает. Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Анализ крови на онкомаркер молочной железы

В последние годы одним из главных условий выбора правильной тактики является определение основных морфологических и генетических характеристик новообразования. Ключевыми диагностическими индикаторами в данном случае служат т.н. опухолевые маркеры или онкомаркеры. Это вещества, как правило, белковой природы, являющиеся структурной составляющей опухоли или вырабатываемые ею. Для злокачественных новообразований молочной железы такими онкомаркерами являются уровни экспрессии:

• эстрогеновых и прогестероновых рецепторов;
• белка HER2/neu ;
• фактора пролиферации Ki-67 ;
• раковых антигенов CA 15-3, СА 27-29, CEA .

Необходимо понимать, что понятие «рак груди» объединяет широкий диапазон патологических состояний. Речь может идти как о практически доброкачественных опухолях, так и о крайне агрессивных. Соответственно, к каждой ситуации требуется свой терапевтический подход . Онкомаркеры являются действенным диагностическим инструментом, позволяющим врачу просчитать клиническую ситуацию на несколько ходов вперед и найти оптимальный выход.

Навигация по статье

Эстрогеновые и прогестероновые рецепторы

Рецепторы – это белки находящиеся внутри клеток или на их поверхности, способные взаимодействовать с определенными веществами, в т.ч. – с циркулирующими в крови гормонами. Нормальные клетки ткани молочной железы содержат рецепторы к женским половым гормонам – эстрогену и прогестерону . Эти же рецепторы могут присутствовать и в некоторых опухолевых клетках. В этом случае эстроген и прогестерон будут способствовать росту такой опухоли.

Раковые антигены CA 15-3, СА 27-29, CEA

Подвергшиеся мутации раковые клетки воспроизводят белок, воспринимаемый организмом как антиген (cancer antigen, CA) т.е. чужеродный элемент. Эти опухолевые антигены попадают в кровеносное и лимфатическое русло и с током крови и лимфы свободно циркулируют в организме. Для рака молочной железы такими онкомаркерами являются раковые антигены CA 15-3, CA 27-29 и CEA.

CA 15-3 не является специфичным антигеном для рака молочной железы: его содержание повышается также и при , . Тем не менее, благодаря этому онкомаркеру можно дифференцировать злокачественные новообразования от доброкачественных , отследить характер развития уже обнаруженной опухоли, оценить эффективность терапевтических мероприятий и диагностировать .

CA 27-29 – специфический антиген рака груди. Но и его чувствительность, по мнению ряда , недостаточно высока, если полагаться исключительно на него, т.к. уровень CA 27-29 повышен также в первом триместре беременности и при доброкачественных опухолях груди, печени, почек. Наилучших результатов удается добиться при комплексном анализе крови на несколько онкомаркеров, включая, кроме вышеперечисленных, также и CEA (карциноэмбриональный антиген).

Анализ крови на онкомаркер молочной железы

Иммунохимическое исследование крови на онкомаркеры – одна из обязательных процедур, проводимых после начальной . Стандартный тест в МЦ Ихилов, как правило, включает анализ сыворотки крови на наличие CA 15-3, CA 27-29 и CEA . Следует отметить, что данный тест не является на 100% достоверным и может давать ложно позитивные результаты (об этом будет сказано ниже). В этой связи он может расцениваться лишь как дополнение к другим диагностическим мероприятиям, включающим маммографию, ультразвуковое исследование, .

Точный диагноз и правильный выбор тактики лечения возможен только на основании комплексных данных инструментальных исследований и расшифровки лабораторного анализа крови на онкомаркеры:

1. Если уровень онкомаркеров на рак молочной железы лишь слегка превышает норму и остается стабильным , то можно судить об отсутствии рецидивирования опухоли.
2. Если в течение длительного времени (от 3 до 9 месяцев) наблюдается поступательное повышение концентрации онкомаркеров в сыворотке крови , это может свидетельствовать о рекуррентном раке и о необходимости проведения более глубокой диагностики.

Почему анализ на онкомаркеры не всегда показателен

Вопрос о значимости онкомаркеров в и молочной железы до сих пор остается дискуссионным. К настоящему времени нет объективных свидетельств того, что регулярный контроль за уровнем онкомаркеров в крови после удаления опухоли ведет к лучшему исходу, нежели мониторинг клинической картины и отслеживание онкологической симптоматики.

Американское общество клинической онкологии считает нецелесообразным рутинные тесты на содержание онкомаркеров в сыворотке крови. При этом в Израиле эти исследования проводятся, более того – во многих случаях они помогают выявить рекуррентный рак еще на ранних этапах его развития, что позволяет своевременно начать лечение и делает более благоприятным . Однако, нет никаких данных, что подобная диагностическая тактика положительно сказывается на выживаемости пациентов. Здесь уместно привести результаты исследования . С 2002 по 2011 мы изучали данные о женщинах с метастатическим раком груди. Выяснилось, что 40% таких пациенток регулярно сдавали анализы на онкомаркеры (CEA, CA 15-3, CA 27.29), что не помогло избежать перехода заболевания .

Онкомаркеры в прогнозировании риска рецидива дуктальной карциномы

Одним из наиболее актуальных вопросов для женщин с дуктальной (протоковой) карциномой, перенесших лампэктомию, является вероятность рецидивирования опухоли. Риск рецидива, при условии успешно проведенной , определяется несколькими факторами:

• степенью злокачественности опухоли и ее размером
• возрастом пациентки
• имеющимися онкомаркерами

Чем выше степень злокачественности и больше размер исходного новообразования, тем вероятнее рекурренция рака. Большое значение имеет исследование раковых клеток на наличие тех или иных онкомаркеров. Если опухоль эстроген- или прогестерон-позитивная, то в качестве адъювантной (послеоперационной) терапии используются антигормональные препараты. Одним из научных прорывов в онкологии были представленные в 2011 году на Международном симпозиуме в Сан-Антонио результаты практического применения генетического теста Oncotype DX, позволяющего предсказать поведение опухоли, ее чувствительность к лечению, в т.ч. к лучевой и химиотерапии. При этом было установлено, что треть женщин с дуктальной карциномой, перенесших лампэктомию, не нуждаются в адъювантной терапии.

Стоимость лечения рака молочной железы

Сроки прохождения лечения в Ихилов рака молочной железы в амбулаторном режиме – 3-4 рабочих дня .

Цены лечения рака, установленные министерством здравоохранения Израиля в онкологическом центре Ихилов:

Отзыв о лечении рака молочной железы в Израиле

В сентябре 2015 года я почувствовала комок в левой груди. Я не паникер, но я знала, что это может значить. У меня была назначена встреча через месяц с моим акушером-гинекологом, поэтому сначала я подумала, что подожду и поговорю об этом со своим врачом.

У меня была маммография всего шесть месяцев назад. Но после изучения информации в интернете, я поняла, что для безопасности нужно встретиться с врачом раньше.

Отзыв о лечении рака поджелудочной железы в Израиле

За пять лет до того, как мне поставили диагноз, я тренировалась четыре раза в неделю и была в отличной форме. Друзья заметили, что я сильно похудела , но я просто думала, что это связано с моим активным образом жизни. В это время у меня постоянно были проблемы с желудком. Мои врачи рекомендовали безрецептурные препараты.

Исследование ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело. Ki-67 - маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Он оценивается в процентах и показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Является фактором прогноза опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение (и наоборот). Низкий уровень экспрессии гладкомышечного актина в строме новообразований и в стенках сосудов характерен для низкодифференцированных раков и опухолей с более высоким метастатическим потенциалом.

Состав исследования:

• Гистологическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67
• Иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли.

Метод исследования

Гистологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Локализация б/м: образец ткани (биоптат) опухолевого образования любой локализации.

Общая информация об исследовании

Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.

Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при раке любой локализации, при подозрении на злокачественный процесс, а также при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.

Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.

Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы "антиген-антитело", доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.

Для чего используется исследование?

• Морфологическое описание опухолевого процесса;
• определение пролиферативной активности (скрытого потенциала деления клеток и увеличения в размерах новообразования);
• верификация наличия опухолевого процесса и его доброкачественности/злокачественности;
• прогноз дальнейшего течения процесса;
• подбор наиболее адекватного и объективного метода лечения/выбор терапии;
• контроль эффективности проведенной терапии.

Когда назначается исследование?

• При наличии ракового процесса любой локализации;
• при наличии доброкачественного образования для исключения озлокачествления;
• при подборе и контроле терапии.

Что означают результаты?

Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.



• Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67 (включая жидкостную цитологию – окрашивание по Папаниколау)
• Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением рецепторного статуса Прогестерона и Эстрогена
• Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a

Кто назначает исследование?

Литература

• Sales Gil R, Vagnarelli P. Ki-67: More Hidden behind a "Classic Proliferation Marker". Trends Biochem Sci. 2018 Aug 18.
• Du R, Zhang H, Shu W, Chen B, Li Y, Zhang X, Wu X, Wang Z. Correlation between Ki-67 Expression and Hemodynamics of Contrast-Enhanced Ultrasound in Patients with Breast Infiltrative Ductal Carcinoma. Am Surg. 2018 Jun 1;84(6):856-861.

1

Целью исследования являлось сравнительное изучение уровней экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в подтипах тройного негативного рака молочной железы (ТНРМЖ) с различным андрогеновым статусом. Исследован операционный материал от 60 пациенток клинической группы 2А, клинической стадии T1-2N0M0, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Для иммуногистохимического исследования были использованы антитела к рецепторам эстрогена, прогестерона, андрогена, цитокератинам 5/6, Ki-67, Циклину D1, белкам HER2/neu и EGFR. Установлено, что в ТН РМЖ с признаками базального эпителия отмечался достоверно более высокий уровень экспрессии Ki-67 по сравнению с остальными ТН РМЖ, однако уровень экспрессии Циклина D1 был не однозначен. В части ТН РМЖ наблюдалась сверхэкспрессия Циклина D1, не имевшая корреляционной связи с уровнем экспрессии Ki-67. Высокий уровень Циклина D1 в базальноподобном ТН РМЖ встречался реже, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия, однако его среднее значение было достоверно выше. Уровень Ki-67 достоверно не отличался в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом. Гиперэкспрессия Циклина Д1 чаще наблюдалась среди андроген-положительных ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с андроген-отрицательными.

рецепторы андрогена.

базальноподобный тройной негативный рак молочной железы

тройной негативный рак молочной железы

1. Информационный бюллетень ВОЗ. 2015. – URL: http://www.who.int/ mediacentre/factsheets/fs297/ru/. / Informatsionnyi biulleten" VOZ. 2015. .

2. Тюляндин С.А., Стенина М.Б., Фролова М.А. Тройной негативный рак молочной железы // Практическая онкология. – 2010. – № 11 (4). – C. 247-52.

3. Perou C.M., Sørlie T., Eisen M.B. et al. Molecular portraits of human breast tumors // Nature. - 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

4. Кит О.И., Шатова Ю.С., Франциянц Е.М. и др. Путь к персонифицированной тактике лечения больных раком молочной железы // Вопросы онкологии. – 2017. – Т. 63. - № 5. - С. 719-723.

5. Andre F., Zielinski C. Optimal strategies for metastatic triple negative breast cancer with currently approved agents // Ann. Oncol. – 2013. - Vol. 24 (4). - P. 46-51.

6. Тодоров С.С., Босенко Е.С., Кучкина Л.П. и др. Биологическая гетерогенность тройного негативного рака молочной железы // Евразийский онкологический журнал: мат. IX Съезда онкологов и радиологов стран СНГ и Евразии (Минск, 15-17 июня, 2016 г.). – 2016. – Т. 4. - № 2. - С. 469.

7. Храмцов А.И. Определение базовых прогностических маркеров рака молочной железы с использованием технологии тканевых матриц: дис. … канд. мед. наук. – СПб., 2011. – 123 с.

8. Нефедова Н.А., Данилова Н.В. Клинико-морфологическая характеристика подтипов тройного негативного рака молочной железы // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 9-5. – С. 881-885.

9. Шатова Ю.С., Франциянц Е.М., Новикова И.А. и др. Антиандрогенная терапия: новое направление таргетной терапии рака молочной железы // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 3. - URL: http://www.?id=26392 (дата обращения: 07.03.2018).

10. Крылов А.Ю., Крылов Ю.В., Янченко В.В. Определение андрогеновых рецепторов в клетках тройного негативного рака молочной железы // Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2016. – № 1. - С. 32-36 (Белоруссия).

11. Скворцов В.А., Манихас Г.М. Циклин D1 и его прогностическая значимость в планировании эндокринной терапии у женщин постменопаузального возраста при раке молочной железы // Врач-аспирант. – 2012. – № 1.3 (50). - С. 401-407.

12. Басинский В.А., Савицкий С.Э., Шульга А.В. Прогностическое значение уровня экспрессии циклинов B1 и Д1 при раке яичников // Проблемы здоровья и экологии. - 2009. - С. 57-61.

13. José M. Coco Martin J.M., Balkenende A., Verschoor T. et al. Cyclin D1 overexpression enhances radiation-induced apoptosis and radiosensitivity in a breast tumor cell line // Cancer Res., 1999. – Vol. 59. - № 5. – P. 1134-1140.

14. Тюляндин С.А. Перспективные подходы лекарственной терапии немелкоклеточного рака легкого // Новое в терапии рака легкого (терапия рака легкого начала XXI века) / под ред. Н.И. Переводчиковой. – М., 2003 [Электронный ресурс]. – URL: https://medi.ru/info/11123/ (дата обращения: 07.03.2018).

15. Pestell R.G. New roles of Cyclin D1 // Am. J. Pathol. - 2013. - Vol. 183 (1). - P. 3-9.

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкопатологии у женщин во всем мире. Ежегодно в мире регистрируется более 1 млн случаев данной патологии, влекущей за собой летальный исход более чем 520 тыс. заболевших пациенток .

Тройной негативный рак молочной железы (ТН РМЖ) составляет от 10 до 20% всех опухолей молочной железы, это агрессивные опухоли, быстро дающие отдаленные метастазы, для них характерен плохой прогноз .

Успехи лечения и прогноза РМЖ напрямую зависят от правильной и своевременной морфологической, иммуногистохимической, молекулярно-генетической диагностики данного заболевания .

Ввиду отсутствия в клетках ТН РМЖ всех трех стандартных мишеней таргетной терапии (эстрогеновых рецепторов (ЭР), прогестероновых рецепторов (ПР) и HER2/neu-рецепторов), на сегодняшний день не существует специализированного лечения для этих опухолей, кроме терапии химиопрепаратами, действующими на все делящиеся клетки .

Наиболее часто выделяемым подтипом является базальноподобный ТН РМЖ, составляющий около 70% ТН РМЖ. В многочисленных работах предлагаются различные маркеры для выявления этого подтипа РМЖ: EGFR, высокомолекулярные базальные цитокератины (CК5/6, CК14, CК17), с-KIT, NGFR, белки р63, ламинил, остеонектин, виментин и ряд других . Однако единый диагностический стандарт пока не разработан.

Высказываются предположения о возможных различиях в тактике лечения подтипов ТН РМЖ. Весьма актуальным является поиск потенциальных мишеней для таргетной терапии подтипов ТН РМЖ путем определения значимых биологических маркеров и перехода к действительно персонифицированному лечению этой категории больных и, соответственно, улучшения его результатов .

Последние годы у исследователей вызывает интерес факт сохранности андрогеновых рецепторов (АР) в РМЖ отрицательных по ЭР и ПР. Обнаружено, что в ТН РМЖ также могут сохраняться АР, однако данные о доле таких опухолей сильно варьируют - от 10 до 43%, также нет однозначного мнения о прогностической значимости этого маркера .

Ki-67 - это ядерный белок, который связан с клеточной пролиферацией и экспрессируется в фазах митотического цикла S, G1, G2, и M, кроме G0. В образцах нормальной ткани молочной железы он также экспрессируется, но на низком уровне (менее 3% клеток). Уровень экспрессии Ki-67 во многом определяет тактику адъювантного лечения больных РМЖ. Для ТН РМЖ характерна гиперэкспрессия маркера пролиферации Ki-67.

Особый интерес представляют биомаркеры, которые участвуют в регуляции клеточного деления. В частности, циклины, ассоциированные с ними циклин-зависимые киназы и циклин-зависимые ингибиторы киназ играют важнейшую роль в развитии клеточного цикла. Наиболее актуальным биомаркером является регулятор клеточного цикла - Циклин D1. Повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления. Данные об уровне экспрессии Циклина D1 и его прогностическом значении в РМЖ и других опухолях немногочисленны и противоречивы .

Цель исследования: изучить уровни экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в базальноподобном и небазальноподобном ТН РМЖ, в том числе при наличии и отсутствии АР в опухоли.

Материал и методы. Материалом для настоящего исследования послужил операционный материал от 60 пациенток с ТН РМЖ, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Пациентки относились к клинической группе 2А, T1-2N0M0 (по результатам маммографии, УЗИ молочных желез и СКРТ органов грудной клетки, брюшной полости и малого таза). Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Возраст пациенток колебался от 29 лет до 71 года. Т.к. возраст 40 больных (66,7%) приходился на промежуток от 41 до 60 лет, то средний возраст в группе составил 51,3±3,5 года.

На основании стандартного иммуногистохимического (ИГХ) исследования у всех пациенток был выявлен ТН РМЖ (ER-/PR-/Her2-негативный), и определен уровень Ki-67. Дополнительно определили экспрессию АР и Циклина D1.

Для ИГХ-исследования с парафиновых блоков операционного материала готовили срезы толщиной 3-4 мк и проводили окрашивание в иммуногистостейнере BenchMark ULTRA. В таблице 1 представлена информация об использованных антителах.

Таблица 1

Характеристика использованных антител

	Антитело		Производитель	Разведение	Демаскировка
			Thermo Scientific		Трис буфер PH=8,0-8,5
					Цитратный PH=6
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5

Для характеристики экспрессии Ki-67, АР и Циклина D1 вычисляли долю клеток с окрашенными ядрами в процентах от общего количества опухолевых клеток. Андроген-положительными (АР+) считали опухоли с экспрессией ≥ 10% клеток опухоли, соответственно андроген-отрицательными (АР-) с экспрессией <10% клеток.

Для статистической обработки результатов использовали параметрические методы статистики для показателей вариационного ряда: средняя арифметическая (М), ошибка средней (m), медиана (Me), коэффициент вариации (C.V.). Достоверность разницы между двумя средними определяли по значению t-критерия Стьюдента, корреляционную связь оценивали по коэффициенту корреляции Пирсона (r).

Результаты и обсуждение. На основании результатов ИГХ-исследования с антителами к СК5/6 и EGFR все ТН РМЖ распределились следующим образом: базальные характеристики были выявлены в 37 (61,7%) случаях (БП ТН РМЖ) и отсутствовали в 23 (38,3%), последние мы отнесли к НК ТН РМЖ (табл. 2).

Таблица 2

Уровень экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница между показателями, обозначенными символом ● - достоверна (Р≤0,05).

В целом в ТН РМЖ уровень Ki-67 составил 76,4±2,2% (Ме=80, C.V.=20,4). Средний уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ был достоверно выше, чем в НК ТН РМЖ - 81,9±3,1% и 70,8±3,1% соответственно (P<0,05). В обеих группах разброс данных по этому показателю был незначительный, на что указывали коэффициенты вариации менее 30 (табл. 2).

Среднее значение уровня экспрессии Циклина D1 в ТН РМЖ составило 35,4±5,1. Разница средних показателей экспрессии Циклина D1 в БП ТН РМЖ и НК ТН РМЖ (38,1±8,1 и 32,8±6,5% соответственно) была не достоверна, также были близки значения медианы (22,5 и 20 соответственно) (табл. 2). Проведенный корреляционный анализ зависимости между уровнями экспрессии Ki-67 и Циклина D1 показал, что коэффициент корреляции имеет значения, близкие к нулю, что указывает на статистически не значимую зависимость этих количественных показателей (табл. 2).

Обращал на себя внимание высокий коэффициент вариации как в целом, так и в обеих группах ТН РМЖ - около 100, что свидетельствовало о большой вариабельности значений уровня экспрессии Циклина (табл. 2). И действительно, в изучаемых ТН РМЖ уровень экспрессии Циклина D1 колебался от 1% до практически 100% окрашенных ядер. Поэтому мы разделили каждую группу еще на 2 подгруппы: с высоким показателем экспрессии Циклина D1 и низким. За пороговое значение Циклина D1 мы приняли 30%, т.к. ранее встречали в работах других авторов подобную градацию . Данные представлены в таблице 3.

Таблица 3

Экспрессия маркеров клеточного цикла в подгруппах ТН РМЖ с высоким и низким уровнем Циклина D1

Группа ТН РМЖ			Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)	Базальноподобный		89,9 ±4,7▲	83,3 ±4,7 ●
			12,2 ±2,8	81,3 ±3,9
		Всего: 37 (100)
	Неклассифицированный		66,5 ±6,6▲	70,1±3,6 ●
			8,6 ±2,7	75 ±4,1
		Всего: 23 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных одинаковыми символами (▲ или ●), достоверна (Р<0,05).

Высокий уровень Циклина D1 в обеих группах встречался реже, чем низкий: в БП ТН РМЖ он наблюдался в 32,4% наблюдений, в НК ТН РМЖ в 43,5%. Средний уровень экспрессии этого маркера был достоверно выше (Р≤0,05) в БП ТН РМЖ - 89,9±4,7%, против 66,5±6,6% в НК ТН РМЖ (медиана - 92% и 70% соответственно) (табл. 3). Коэффициенты вариации в обоих случаях были меньше 30, что указывало на однородность исследуемых рядов данных.

Экспрессия Ki-67 в БП ТН РМЖ с высоким уровнем Циклина D1 составила в среднем 83,3±4,7%, в НК ТН РМЖ - 70,1±3,6%, медиана 85 и 70% соответственно, разница показателей являлась достоверной (Р<0,05). Низкий показатель коэффициента вариации (<30) также позволил сделать заключение об относительной однородности данных (табл. 3).

Низкий уровень Циклина D1 составил в среднем в БП ТН РМЖ - 12,2±2,8%, а в НК ТН РМЖ - 8,6±2,7%. Разница показателей не являлась достоверной в силу большой вариабельности данных в обеих подгруппах (коэффициент вариации 89,3 и 110,5 соответственно). Средний уровень экспрессии Ki-67 между подгруппами с низким уровнем Циклина D1 также не имел статистически достоверного различия и составил в БП ТН РМЖ - 81,3±3,9%, а в НК ТН РМЖ - 75 ±4,1% (p>0,05).

Т.о., высокая экспрессия Циклина D1 в БП ТН РМЖ встречалась несколько реже, но ее средний уровень был достоверно на 23,4% выше, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия (p<0,05).

В таблице 4 представлены результаты определения АР в изучаемых ТН РМЖ.

Таблица 4

Экспрессия Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом

Примечания: Ме - медиана, C.V. - коэффициент вариации.

АР+ опухоли наблюдались в 11 случаях (18,3%), средний показатель экспрессии АР составил 51,6±3,4%, Ме=71,9%. Можно отметить, что в 5 опухолях экспрессия составила 10-30%, в остальных 6 - от 80-95%. Т.е. при наличии в опухоли экспрессии АР она была либо низкой, либо высокой, средних показателей в диапазоне >30%, но <80% не наблюдалось. Соответственно АР- статус был установлен в 49 опухолях (81,7%). Долевое соотношение ТН РМЖ с признаками базального эпителия и без таковых было практически одинаковым как в АР+, так и в АР- опухолях (табл. 4).

Экспрессия Ki-67 в среднем составила в АР+ опухолях 68,9±6,4% (Ме=70), в АР- - 76±2,7% (Ме=80), различие этих показателей не было статистически достоверно (p>0,05) (табл. 4).

При кажущейся разнице экспрессии Циклина D1 в АР+ опухолях, по сравнению с АР- (51,8±13,7% и 31,6±5,1% соответственно), она также не была статистически достоверной (p>0,05). Высокий коэффициент вариации уровня Циклина D1, независимо от наличия или отсутствия АР в опухолях, указывал на крайнюю неоднородность этого показателя (АР+ - C.V.=74,8; АР- - C.V.=101,6) (табл. 4). В связи с этим также разделили ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом на подгруппы с гиперэкспрессией Циклина Д1 и его низким уровнем, данные представлены в таблице 5.

Таблица 5

Экспрессия маркеров клеточного цикла в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом в подгруппах с высоким и низким уровнем Циклина D1

АР-статус		Подгруппа ТН РМЖ по уровню Циклина D1	Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)			91,3 ±4,3▲	71,3 ±4,9
			20,2 ±6,2	66 ±11,7
		Всего: 11 (100)
			72,8 ±5,87▲	73,3±5,1
			9,4 ±1,9	79,04 ±3
		Всего: 49 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных символом ▲ - достоверна (Р<0,05).

В АР+ ТН РМЖ примерно с равной частотой наблюдались высокий и низкий уровни экспрессии Циклина Д1 (45,5% и 54,5% соответственно). Уровень Ki-67 в этих подгруппах достоверно не отличался. В АР- ТН РМЖ доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была почти в 2 раза меньше, чем опухолей с низкой экспрессией (34,7% против 65,3%).

В среднем в АР+ ТН РМЖ гиперэкспрессия Циклина Д1 была достоверно выше, чем таковая в АР- ТН РМЖ, 91,3% и 72,8% соответственно, Р<0,05 (табл. 5). Уровень Ki-67 достоверно не отличался ни в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом, ни в их подгруппах с высокой или низкой экспрессией Циклина Д1.

Таким образом, в части ТН РМЖ как с признаками базального эпителия, так и в случае их отсутствия была выявлена гиперэкспрессия Циклина D1. Гиперэкспрессия Циклина D1 зарегистрирована в различных опухолях, и большинство авторов исследований делают вывод, что ее роль в онкогенезе негативна. Повышенная экспрессия Циклина D1 в доброкачественных опухолях, может предшествовать их озлокачествлению, а также ассоциирована со снижением общей выживаемости онкобольных . На примере немелкоклеточного рака легкого установлено, что гиперэкспрессия Циклина D1 происходит за счет амплификации или гиперэкспрессии гена PRAД1, кодирующего Циклин D1, а повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления . Выявлена роль Циклина D1 в индукции клеточной миграции и инвазии, усилении ангиогенеза . Имеются экспериментальные данные о том, что гиперэкспрессия Циклина D1 повышает индуцированный облучением апоптоз и радиочувствительность линии клеток опухоли молочной железы .

Несмотря на то что в рамках проведенного исследования количество АР+ ТН РМЖ было небольшим, удалось выявить некоторые тенденции. Андрогеновый статус не влиял на уровень пролиферативной активности в ТН РМЖ, а гиперэкспрессия Циклина Д1 наблюдалась в части опухолей как АР+, так и АР-. Уровень высокой экспрессии Циклина Д1 в АР+ ТН РМЖ был в среднем достоверно выше, чем в АР-. Также среди АР+ ТН РМЖ большая доля опухолей имела гиперэкспрессию Циклина Д1. Имеются исследования, в которых показано, что женщины с Циклин D1-негативным, ЭР+ РМЖ имеют лучший прогноз при лечении . Возможно, что применение гормональной терапии в отношении андрогена будет иметь ту же закономерность для АР+ ТН РМЖ.

Заключение

В БП ТН РМЖ наблюдался достоверно более высокий уровень экспрессии общего маркера пролиферации Ki-67 по сравнению с ТН РМЖ, не имевшими признаков базального эпителия.

Различие средних значений Циклина Д1 этих групп не достоверно. Уровень Циклина D1 в обеих группах очень вариабелен и корреляционно не связан с экспрессией Ki-67.

Разделение изучаемых групп ТН РМЖ на подгруппы с высоким и низким уровнем экспрессии Циклина Д1 позволило установить, что в части ТН РМЖ наблюдалась гиперэкспрессия Циклина Д1, являющегося маркером такого важного звена митотического цикла, как S-фаза. Высокий уровень Циклина D1 в БП ТН РМЖ наблюдался реже, чем в небазальноподобных ТН РМЖ, однако его среднее значение в первом случае достоверно выше. При низком же уровне экспрессии Циклина D1 достоверных различий между группами не наблюдалось по причине значительного разброса данных.

При гиперэкспрессии Циклина D1 в опухолях сохранялся достоверно более высокий уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ по сравнению с НК ТН РМЖ; при низком же уровне Циклина D1 достоверность различий отсутствовала.

Доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была несколько больше среди АР+ ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с АР- опухолями.

Библиографическая ссылка

Ващенко Л.Н., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Кварчия М.В. СОПОСТАВЛЕНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ МАРКЕРОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ KI-67 И ЦИКЛИНА D1 В ТРОЙНОМ НЕГАТИВНОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С РАЗЛИЧНЫМ АНДРОГЕНОВЫМ СТАТУСОМ // Современные проблемы науки и образования. – 2018. – № 4.;
URL: http://?id=27732 (дата обращения: 01.02.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Или молочной железы – это страшное и по некоторым причинам смертельно опасное заболевание, которое занимает второе место по количеству заболевших среди обоих полов.

По физиологическим особенностям рак чаще всего встречается у женщин, при этом уровень смертности на последних стадиях достигает 90%.

Вконтакте

Определение

Основная сложность в лечении рака заключается в его «незаметности»: на первых стадиях – до 2 – его практически невозможно обнаружить, так как развитие заболевания происходит без особых симптомов.

Наблюдается болезненное состояние, иногда можно нащупать в груди странное уплотнение или из соска появляются специфические выделения, также может подняться температура или ощущаться слабость, но мало кто из заболевших обращает внимание на эти симптомы.

Когда же на 2-3-4 стадиях не замечать опухоль становится невозможно, вылечить ее становится сложнее, также снижается процент выздоровевших: на третьей стадии процент составляет 75-90%, на четвертой падает до 10%.

Важно знать: для обнаружения рака на ранних стадиях необходимо регулярно проходить обследование у маммолога, особенно женщинам, попавшим в группу риска.

Регулярное обследование груди и ее рентген поможет вовремя заметить уплотнение и провести дополнительные анализы. При возникновении сомнений врач должен провести обследование на онкомаркеры.

Это специальные вещества, которые вырабатывает организм, пытаясь защититься от рака. Их небольшое количество всегда присутствует в организме, а превышение нормы в большинстве случаев свидетельствуют о наличие рака. Это помогает определить наличие злокачественной опухоли раньше и сразу же начать лечение.

Онкомаркер

Для определения рака молочной железы выделяют несколько онкомаркеров, среди которых особую пользу приносит маркер ki-67.

Это вещество может появиться при разных вариантах опухолей, но чаще всего он проявляется именно при раке груди и мозга. Ki-67 проявляется в клетках во время деления, но не наблюдается в состоянии покоя.

Поскольку одним из главных отличий рака является его быстрый рост и деление клеток, обнаружить маркер ki-67 довольно просто. Индекс ki-67 – это отношение делящихся в данный момент клеток ко всем раковым клеткам.

При этом вещество помогает не только обнаружить опухоль, но и провести небольшой прогноз: если индекс ниже 10%, прогноз выживаемости составляет до 95%, при превышении этого числа, выживаемость снижается до 80%.

Обратите внимание: маммолог не должен ограничиваться только определением ki-67: для более точного прогноза и определения характера рака необходимо провести дополнительные исследования на другие онкомаркеры.

При этом опухоли с повышенным индексом лучше реагируют на агрессивное и сильное лечение, при котором воздействие происходит на делящиеся клетки, что повышает эффективность лечения. С другой стороны, повышенное содержание ki-67 может привести к образованию метастаз и рецидивам.

Для получения вещества врач берет пробу из подозрительной опухоли и исследует ее. Для более точного определения проба берется 2-3 раза с интервалом в несколько дней. Если уровень повышается, это говорит о развитии раковых клеток.

После этого маммолог может начать подбирать подходящее лечение. Онкомаркеры ki-67 крайне полезны: они помогают врачам определить рак молочных желез на ранних стадиях и начать бороться с ним. Само вещество также свидетельствует о некоторых особенностях развития злокачественной опухоли, что принимается маммологами к сведению для подбора лечения.

Вся правда о лечении рака молочной железы в следующем видео:

В последние годы наблюдается увеличение численности онкологических заболеваний молочной железы у женщин. Причина такой неутешительной статистики объясняется многими факторами. Прежде чем прописать соответствующую терапию, онкологи назначают тестирование, результаты которого помогают определиться с лечебной методикой. Среди этих тестов и анализов важную роль играет так называемый индекс ки-67.

Что это за показатель, и как ki 67 при раке молочной железы помогает установить индивидуальность прогрессирования патологии и разработать оптимальный план лечения?

Что такое маркер ki-67 и его значение в онкологии

Индекс ki-67 — это особый белок, так сказать антиген злокачественной опухоли, присутствующий в организме человека. Данное вещество формируется исключительно в момент дробления клеток, но если раковые клетки находятся в пассивном состоянии, выявить его невозможно, поэтому он не обнаруживается при обычном гистологическом изучении биоптата. Благодаря такой особенности маркера, медицине под силу спрогнозировать дальнейшее развитие опухолевого процесса.

Исследование РМЖ осуществляется на образцах перерожденных тканей, которые берутся при биопсии либо во время хирургической операции. Последующая обработка мутированного материала осуществляется либо с применением комплексных тестов, позволяющие вывести шкалу активности геномов, либо иммуногистохимического метода.

На сегодняшний день выявление индекса выполняется при диагностировании пациенток, у которых обнаружена карцинома в молочной железе. Однако данный исследовательский метод эффективен не только при раке груди, а и других опухолей в организме человека, однако именно при РМЖ он выполняется чаще, чем в других эпизодах онкологии.

При злокачественной природе опухоли врач рекомендует женщине пройти тестирование для того, чтобы установить влияет ли показатель антигена на формирование опухоли. Помимо этого, назначаются и другие анализы, к примеру, присутствует ли рецептор her2-neu. Исходя из полученных данных, и разрабатывается дальнейшая противоопухолевая терапия. Чем больше клеток занято в синтезе, тем выше уровень онкомаркера.

Показанием для назначения обследования на ки 67 при раке молочной железы является:

1. Если в организме человека присутствует онкология любой локализации.
2. Если имеются подозрения на злокачественный характер опухоли.
3. Если подозревается рост новообразования.
4. Если необходим тщательный контроль над лечебным процессом.
5. Если требуется найти процент .
6. Если требуется определиться с врачебной методикой по отношению к болезни.

Параллельно с этим устанавливается гормональная особенность опухолевого образования, и насколько велик риск формирования вторичных очагов в лимфатической системе и других органах.

Вне зависимости от того, насколько чувствительна опухоль к терапии гормональными препаратами и присутствует либо отсутствует поражение лимфатических узлов молочной железы, при большом показателе ki-67 часто наблюдаются рецидивы, которые снижают шансы на выздоровление. Под рецидивными моментами подразумевается:

• Возврат недуга после лечебного курса.
• Развитие метастаз в отдаленных внутренних органах (легкие, костный аппарат).
• Местный рецидив, то есть, непосредственно в тканях и лимфоузлах груди, или в послеоперационном рубце.

Если при рецидивирующем раке показатель маркера существенно возрос, по сравнению с первичным, это указывает на необходимость применения более агрессивных лечебных методов и их комбинацию.

Для сдачи анализа на реакцию маркера не требуется особого подготовительного периода и специальной обстановки. Специалист делает забор образца поврежденной ткани и выполняет его окрашивание, тем самым устанавливая численность клеток, готовых к синтезу, или находящихся в цикле размножения.

Для того чтобы расшифровать результат, используется специальный тип реактивов, в которых присутствуют отмеченные определенными веществами антитела:

• Оценка итогового результата окрашивания выполняется с использованием световых микроскопов.
• Процентный показатель устанавливается исходя из соотношения окрашенного клеточного материала к остальному, помимо этого степень тональности окрашивания абсолютно никакой роли не играет.
• При осуществлении тестирования точка отсечки индекса на 15% была установлена исходя из опыта патологоанатомов, при этом учитываются рекомендации известных международных онкологических клиник.
• Тестирование выполняется с учетом разделения всей раковой опухоли.

Расшифровка теста выполняется в процентном соотношении:

• Если окрашивание не произошло, то есть, оно нулевое, это означает, что новообразования в организме не имеется. Другими словами, ни одна клетка не достигла стадии пролиферации.
• Если маркер показал 100%, значит, все клетки находятся в пролиферативной стадии, то есть, они в фазе активного деления. В данной ситуации это указывает на стремительное прогрессирование рака.
• Показатель ниже 20% говорит о медленном росте опухоли.
• Если анализ показал больше 20%, это свидетельствует о быстром росте опухоли.

Данный индекс применяется и с целью определения эффективности терапии. Если она прошла удачно, то уровень маркера понижается.

Какая польза от пролиферативного индекса?

Онкомаркер ки-67 отличается высокой способностью в отношении определения делящихся (пролиферативных) клеток. Установив его степень, можно с точностью спрогнозировать показатель выживаемости.

Если его уровень очень высокий, то есть дробящих клеток достаточно много, значит, раковая опухоль будет хорошо поддаваться лечению химией. Дело в том, что препараты, используемые при химиотерапии, воздействуют только на пролиферативные клетки, а в иной ситуации ее применение не даст должного лечебного эффекта.

Однако у каждого высокоточного анализа имеются индивидуальные минусы, не является исключением и маркер ки 67. С одной стороны, высокий индекс указывает на неутешительный прогноз, но эффективность химиотерапии будет высока. С другой стороны, этот тест может и не пригодится при адъювантной химиотерапии.

Нормы, показатели и дальнейший прогноз при онкологии груди

Исходя из показателя ki-67 при онкологии грудной железы, и определяется дальнейшая терапия в отношении болезни. Исходя из того, насколько сильно превышена его норма и определяется дальнейший метод лечения:

1. Химиотерапия.
2. Лучевое облучение.

Учитывая результаты анализов и предполагаемого прогноза, выполняется расшифровка ki 67, исходя из которой, можно сказать, сколько пациентке остается жить:

• Менее 10% — положительный прогноз равен 95%. Если результат в пределах 10-15%, то рубеж в 5 лет благополучен для 85% женщин с карциномой.
• До 15% — считается благоприятным показателем. В данном случае для лечения показан курс гормональными препаратами.
• Результат в 30% — раковые клетки энергично делятся, однако реакция опухоли на химиотерапию будет хорошая. Чем выше показатели ки 67, тем лучше злокачественные клетки поддаются лечению.
• Если результат равный 90%, прогноз считается неутешительным, шанс на выживаемость — нулевой.

Если во время рецидива болезни онкомаркер показывает более высокое значение, чем было при первичной опухоли, значит, вторичная популяция опухоли имеет более агрессивный характер. В данном эпизоде потребуется комбинированная терапия, и скорее намного травматичнее, чем на первой стадии патологии.