Метиленовый синий водный раствор его состав. Метиленовый синий — как использовать в аквариуме

Метиленовый голубой, он же синий, а в простонародье, синька - востребованный препарат в ветеринарии. Его применение основано на сильном обеззараживающем эффекте. Порошок или жидкость в пузырьке стоят копейки и справляются со многими заболеваниями животных. Инструкция и принцип действия препарата просты.

Описание и свойства

Метиленовый синий относится к классу антисептических веществ, которые убивают, а не угнетают вредоносную микрофлору. Действующее вещество - метилтиониния хлорид. Сфера поражения:

• вирусы;
• бактерии;
• грибковые инфекции;
• простейшие микроорганизмы.

Метиленовый синий останавливает воспалительные процессы, заживляет раны. Растворы синьки на спирту используют в разных отраслях медицины. Препарат - мощный антидот при отравлениях сероводородом, угарным газом, нитритами, цианидами.

Метиленовый синий выпускается в таких жидких формах:

1. Спиртовой раствор 1%: флакон 10 мл с капельницей в картонном коробке.
2. Водный раствор 1%: стеклянные флаконы объемом 25-100 мл.
3. Раствор синьки 1% с глюкозой 25%. Выпускается в ампулах для внутривенных инъекций. Объем - 20-50 мл.

Внимание! Концентрация хлорида метилтиониния в 10 мл жидкого вещества составляет 100 мг.

Оригинальный сине-бирюзовый порошок найти в продаже сложнее. Его сегодня практически не выпускают. Сухой метиленовый синий плохо растворяется в спирте, чуть лучше - в воде (пропорция 1:30). После расщепления окрашивает жидкость в насыщенно-синий цвет. Также используется в качестве красителя для текстиля.

Показания и особенности

Метиленовый синий не раздражает кожу или слизистую, зато оказывает быстрый и длительный эффект на место заражения. Согласно инструкции по применению препарат рекомендован при:

• ревматизме у лошадей и КРС;
• диарее инфекционной природы у коз и овец ;
• грибковых инфекциях у аквариумных рыб;
• любых инфекционных недугах у домашней птицы.

Ветеринары высоко оценивают эффективность метиленового синего. Он считается наиболее действенным в своей группе препаратов. Метиленовый синий быстро подсушивает влажные раны и ускоряет их заживление. Он целиком безопасен.

Из минусов люди отмечают лишь специфический запах и сильную маркость средства. При всех положительных сторонах дозировать метиленовый синий следует в точности с инструкцией по применению. Превышение нормы при внутреннем приеме чревато отторжением в виде рвоты, болей в животе. Также у животных могут образоваться отеки.

Внимание! Сухой порошок хранится бессрочно в невлажном месте, жидкие препараты - 3 года.

Инструкция по применению допускает как наружный, так и внутренний прием метиленового синего. Нормы и рекомендации для лечения и профилактики заболеваний птицы:

1. Раны любой природы на коже. Промывка пораженных и соседних с ними участков спиртовым раствором 1-3%. Также используют присыпку 1-2%.
2. Бурсит. Вводить прямо в рану 2%-й раствор на спирту. Доза - 0,01 мл/кг живого веса птицы.
3. Инфекции ЖКТ. Давать с питьем в дозировке 1:5000.
4. Болезни мочевыводящих путей инфекционной природы. Промывка органов раствором 0,02%.
5. Отравления. Вводить инъекциями 0,1-0,25 мл/кг за 1 раз. Использовать 1%-й водный раствор.
6. Для лечения рыб метиленовый синий не используют в общем аквариуме. Краситель может повредить его устройство. Сначала больных особей отсаживают в отдельную емкость. Дозировка - 1 мл (20 капель) на 50 л воды.

Предварительно инструкция по применению советует приготовить концентрат: растворить необходимую дозу метиленового синего в 0,2 л. Смесь подливают в аквариум небольшими порциями. Курс продолжается 5 сут. После этого половину воды в емкости меняют чистой. Алгоритм уместен и в качестве профилактики.

Для других животных применяют жидкий метиленовый синий 0,5-1% с питьем:

• лошади и КРС - 200-600 мл;
• овцам, свиньям, козам - 50-160 мл;
• собакам - 10-30 мл.

Альтернатива - внутривенный ввод 1%-го раствора:

• лошади, коровы - 100-200 мл;
• козам, свиньям, овцам - 20-50 мл;
• собакам - 10-30 мл.

А какие обеззараживающие препараты Вы используете для животных?

Лечение кур: видео

Метиленовый Синий представляет собой антисептический препарат.

Фармакодинамика и фармакокинетика

Данное средство принадлежит к антисептическим . Его действие основано на способности лекарства взаимодействовать с некоторыми группами веществ грамположительных бактериальных клеток , их белками и мукополисахаридами с образованием малорастворимых и медленно ионизирующих комплексов.

Препарат обладает окислительно-восстановительными свойствами и способен играть роль донора ионов водорода в организме. Благодаря этому он может применяться как при некоторых отравлениях.

Средство не поступает в системный кровоток при местном применении. При внутреннем приеме лекарство экскретируется через почки.

Кроме того, данное средство может использоваться для аквариумных рыб. Оно препятствует размножению ихтиофтириусов, триходин, аэромонад, миксобактерий, хилодонелл, костий, псевдомонад. Метиленовый синий для аквариума также используется с целью улучшения кислотного обмена в тканях рыб, если их транспортировали, приготовления антибактериального корма, обработки икры и мальков.

Однако при его применении вода становится синей, из-за чего пачкается оборудование и аксессуары в аквариуме, затрудняется наблюдение за питомцами. Поэтому использовать данное средство желательно в отдельном сосуде.

Показания к применению

Препарат применяется при ожогах , гнойно-воспалительных заболеваниях кожных покровов, пиодермии .

В случае и лекарство может использоваться как внутрь, так и наружно, в том числе для диагностики почечной функции .

Иногда применяется Метиленовый синий при . Препаратом обрабатываются пораженные участки слизистой полости рта. В некоторых случаях это приводит к дополнительным ожогам , так что в настоящее время данное средство используется редко, особенно в свете того, что сейчас более популярны другие действенные препараты.

Противопоказания

Нельзя применять средство при негативной реакции на его компоненты. Кроме того, оно противопоказано детям до 1 года.

Побочные действия

Среди побочных действий препарата указаны повреждения тканей почек и мочевого пузыря, тошнота, анемия , болезненные ощущения в эпигастральной области , рвота.

При наружном использовании средства возможны . Притом чем большая площадь обрабатывается, тем выше вероятность их возникновения.

Инструкция по применению Метиленового Синего (Способ и дозировка)

Инструкция на Метиленовый синий в случае применения наружно сообщает, что пациентам необходимо смазать раствором пораженные места кожных покровов, немного захватывая окружающие здоровые области. В этом случае нужно использовать 1-3% раствор препарата. Места на теле, в которых проводится обработка, следует заранее очистить. Раствор наносится посредством ватного тампона.

При заболеваниях органов мочевыводящей системы используют водный раствор Метиленового Синего 0,02%. Для этого препарат разводят самостоятельно.

Внутрь лекарство взрослые принимают в дозировке 0,1 г по 3-4 раза в день. Для детей дозы рассчитываются, исходя из возраста, – по 0,005-0,01 г на 1 год жизни. Дети должны принимать лекарство с той же частотой, что и взрослые.

В случае тяжелых отравлений окисью углерода , сероводородом и цианидами применяют 50-100 мл водного раствора 1% или раствор 1% на 25% глюкозе. Лекарство вводится в/в .

При отравлениях нитритом или производными анилина Метиленовый Синий используется как противоядие. Раствор 1% вводят в/в по 0,1-0,15 мл/кг.

Во всех случаях продолжительность курса лечения определяется специалистом индивидуально.

Кроме того, данное лекарственное средство используется для аквариумов. Инструкция для рыб предусматривает несколько способов применения:

• очистка пресноводного аквариума – вводится раствор из расчета 1 капля на 2,5 л воды, предварительно его растворяют в 100-200 мл воды, после чего вливают небольшими порциями, немного помешивая. Спустя 5 суток половину воды в аквариуме заменяют. При необходимости процедуру можно повторить еще на 5 дней. По завершению обработки воду осветляют, применяя фильтры с , или же частично заменяют ее;
• улучшение тканевого дыхания рыб – раствор в течении 5 суток вводится в дозировке 1 мл на 75 л воды;
• антибактериальный корм – 3 капли раствора разводят водой в соотношении 1 к 2 и смешивают с 3 г корма, массу хорошо перемешивают и подсушивают при комнатной температуре. Рыбы должны получать такой корм на протяжении 10 суток;
• обработка икры – разводят препарат из расчета 1 мл на 50 мл воды и помещают в такой раствор икру на 2-3 часа;
• обработка морских рыб – препарат добавляют в отсадник, в котором содержится аквариумная вода, из расчета 1 мл раствора на 10 л воды, после чего хорошо перемешивают и запускают туда рыб. Так их выдерживают на протяжении трех часов. Такую обработку следует проводить через день 5 раз.

Метиленовый синий, также известный как хлорид метилтиониния, является лекарственным средством и красителем. В качестве лекарственного средства он, в основном, используется для лечения метгемоглобинемии. В частности, он используется для лечения уровня метгемоглобинемии, который превышает 30% или если симптомы присутствуют, несмотря на кислородную терапию. Ранее он был использован при отравления цианидами и инфекциях мочевыводящих путей, но такое использование больше не рекомендуется. Обычно препарат вводят путем инъекции в вену. Общие побочные эффекты включают головную боль, рвоту, спутанность сознания, одышку и высокое кровяное давление. Другие побочные эффекты включают серотониновый синдром, распад красных кровяных клеток и аллергические реакции. Использование часто связано с тем, что моча, пот и стул приобретают цвет от синего до зеленого. Хотя использование препарата во время беременности может нанести вред ребенку, отсутствие такого использования при метгемоглобинемии, вероятно, более опасно. Метиленовый синий является тиазиновым красителем. Он действует путем преобразования трехвалентного железа в гемоглобин и в двухвалентное железо. Метиленовый синий был впервые изготовлен в 1876 году Генрихом Каро . Он включен в Перечень основных лекарственных средств Всемирной организации здравоохранения – список наиболее эффективных и безопасных лекарств, необходимых в системе здравоохранения. В Соединенных Штатах флакон на 50 мг стоит около 191,40 долларов США . В Соединенном Королевстве, флакон на 50 мг стоит около 39,38 фунтов.

Использование в медицине

Метгемоглобинемия

Хотя многие тексты указывают на то, что метиленовый синий обладает свойствами окислителя, он действует в качестве окислителя только при очень высоких дозах. В фармакологических дозах, он обладает свойствами восстановителя. Именно по этой причине, метиленовый синий используется в качестве лекарственного средства для лечения метгемоглобинемии. Это заболевание может возникнуть при приеме некоторых фармацевтических препаратов, токсинов или бобов. Обычно, через зависимые от NADH или NADPH ферменты метгемоглобин-редуктазы, метгемоглобин восстанавливается обратно в гемоглобин. Когда большое количество метгемоглобина встречается вторично по отношению к токсинам, метгемоглобин-редуктазы оказываются перегруженными. Метиленовый синий, при внутривенном введении в качестве противоядия, сам сначала восстанавливается до лейкометиленового синего, который затем уменьшает группу гема от метгемоглобина до гемоглобина. Метиленовый синий может сократить период полураспада метгемоглобина от часов до минут. Однако, в высоких дозах метиленовый синий фактически вызывает метгемоглобинемию, меняя этот путь.

В сочетании со светом

Инфекции мочевых путей

Метиленовый синий является компонентом часто назначаемого мочегонного анальгетика / противоинфекционного / противоспазматического средства, известного как «Prosed», комбинация лекарственных средств, которая также содержит фенилсалицилат, бензойную кислоту, гиосциамин сульфат и метенамин (он же гексаметилентетрамин).

Отравление цианидом

Так как восстановительный потенциал метиленового синего подобен потенциалу кислорода и может быть уменьшен компонентами электронной транспортной цепи, большие дозы метиленового синего иногда используются как противоядие от отравления цианидом калия. Этот метод впервые был успешно опробован в 1933 году доктором Матильдой Молденхауэр Брукс в Сан-Франциско, хотя впервые его продемонстрировал Бо Сахлин из университета Лунда в 1926 году.

Краска или пятна

Метиленовый синий используется в эндоскопической полипэктомии в качестве дополнения к физиологическому раствору или адреналину и используется для инъекции в подслизистую оболочку вокруг полипа, подлежащего удалению. Это позволяет идентифицировать плоскость подслизистой ткани после удаления полипа, что полезно при определении того, нужно ли удалять больше ткани, и существует ли высокий риск перфорации. Метиленовый синий также используется в качестве красителя в хромоэндоскопии и распыляется на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, чтобы выявить дисплазию или предраковые поражения. Внутривенно вводимый метиленовый синий легко выделяется в мочу и, таким образом, может использоваться для тестирования мочевых путей на наличие отверстий или свищей. В хирургических операциях, таких как диссекции сигнальных лимфатических узлов, метиленовый синий может быть использован для визуального слежения за лимфатическим дренированием соответствующих тканей. Аналогичным образом, метиленовый синий добавляется к костному цементу в ортопедических операциях для обеспечения легкого различия между природной костью и цементом. Кроме того, метиленовый синий ускоряет упрочнение костного цемента, увеличивая скорость, с которой костный цемент может эффективно применяться. Метиленовый синий используется в качестве средства визуализации / ориентации в ряде медицинских устройств, включая хирургическую герметичную пленку, TissuePatch. Когда метиленовый синий «полихромируется» (окисляется в растворе или «созревает» при грибковом метаболизме, как первоначально было отмечено в диссертации д-ра Д.Л. Романовского в 1890-х годах), он последовательно деметилируется и образует все три, ди, моно и неметильные промежуточные соединения, которые представляют собой Azure B, Azure A, Azure C и тионин, соответственно . Метиленовый синий является основой базофильной части спектра эффекта Романовского-Гимзы. При использовании только синтетических Azure B и Eosin Y, он может служить стандартным пятном Гимзы; но без метиленового синего, нормальные нейтрофильные гранулы имеют тенденцию к избыточному окрашиванию и выглядят как токсичные гранулы. С другой стороны, если используется метиленовый синий, это может способствовать нормальному виду гранул нейтрофилов и может дополнительно также усиливать окрашивание ядрышек и полихроматофильных эритроцитов (ретикулоцитов) . Традиционное применение метиленового синего – прижизненное или суправальное окрашивание нервных волокон, эффект, впервые описанный Полом Эрлихом в 1887 году. Разбавленный раствор красителя либо вводят в ткань, либо наносят на небольшие свежие кусочки ткани. Выборочная синяя окраска развивается при воздействии воздуха (кислорода) и может фиксироваться путем погружения окрашенного образца в водный раствор молибдата аммония. Жизненно важный метиленовый синий в прошлом широко использовался для исследования иннервации мышц, кожи и внутренних органов. Механизм селективного поглощения красителя не совсем понятен; жизненно важное окрашивание нервных волокон в коже предотвращается уабаином, препаратом, который ингибирует Na / K-АТФазу клеточных мембран .

Плацебо

Метиленовый синий использовался в качестве плацебо; врачи говорили своим пациентам, что их моча изменит цвет и можно расценивать это как признак того, что их здоровье улучшилось. Этот же побочный эффект затрудняет тестирование метиленового синего в традиционных плацебо-контролируемых клинических исследованиях.

Ифосфамидная токсичность

Другое применение метиленового синего заключается в лечении ифосфамидной нейротоксичности. Метиленовый синий был впервые зарегистрирован для лечения и профилактики нейропсихиатрической токсичности ифосфамида в 1994 году. Ядовитый метаболит ифосфамида, хлорацетальдегид (CAA), разрушает митохондриальную дыхательную цепь, что приводит к накоплению никотинамидадениндинуклеотидного водорода (NADH). Метиленовый синий действует как альтернативный акцептор электронов и реверсирует ингибирование NADH глюконеогенеза печени, а также ингибирует превращение хлорэтиламина в хлорацетальдегид и ингибирует множественные активности аминооксидазы, препятствуя образованию CAA . Дозировка метиленового синего для лечения нейротоксичности ифосфамида варьируется в зависимости от его использования одновременно в качестве адъюванта при инфузии ифосфамида в сравнении с его применением для изменения психиатрических симптомов, которые проявляются после завершения инфузии ифосфамида. Согласно сообщениям, метиленовая синь при приеме до шести доз в день приводила к улучшению симптомов в течение от 10 минут до нескольких дней. В качестве альтернативы, было предложено внутривенное введение метиленового синего каждые шесть часов для профилактики во время лечения ифосфамидом у пациентов с историей нейропсихиатрической токсичности ифосфамида. Профилактический прием метиленового синего за день до начала применения ифосфамида и три раза в день во время ифосфамидной химиотерапии был рекомендован для снижения частоты возникновения нейротоксичности ифосфамида .

Вазоплегический синдром

В литературе сообщалось об использовании метиленового синего в качестве дополнения для лечения людей, которые испытывают вазоплегический синдром после кардиохирургии.

Побочные эффекты

Химия

Метиленовый синий не следует путать с метиловым синим, другим гистологическим пятном, новым метиленовым синим или с метил-виолетами, часто используемыми в качестве индикаторов рН. Метиленовый синий представляет собой гетероциклическое ароматическое химическое соединение (производное фенотиазина) с химической формулой C16H18N3SCl. При комнатной температуре, он выглядит как твердый, непахучий, темно-зеленый порошок, который при растворении в воде дает синий раствор. Гидратированная форма содержит 3 молекулы воды на единицу метиленового синего. Метиленовый синий имеет рН 3 в воде (10 г / л) при 25 ° C (77 ° F).

Получение

Абсорбция света

Метиленовый синий является сильнодействующим катионным красителем с максимальным поглощением света около 670 нм. Специфика поглощения зависит от ряда факторов, включая протонирование, адсорбцию других материалов и метахромазию – образование димеров и агрегатов высших порядков в зависимости от концентрации и других взаимодействий.

Использования

Окислительно-восстановительный показатель

Метиленовый синий широко используется в качестве окислительно-восстановительного показателя в аналитической химии. Растворы этого вещества синие, когда они находятся в окислительной среде, но становятся бесцветными, если подвергаются действию восстанавливающего агента. Окислительно-восстановительные свойства можно наблюдать при классической демонстрации химической кинетики в общей химии, эксперименте с «синей бутылкой». Обычно раствор готовят из глюкозы (декстрозы), метиленового синего и гидроксида натрия. При встряхивании бутылки, кислород окисляет метиленовый синий, и раствор становится синим. Декстроза будет постепенно восстанавливать метилен синий до его бесцветной, восстановленной формы. Следовательно, когда растворенная декстроза полностью израсходуется, раствор снова станет синим.

Генератор оксида водорода

Метиленовый синий также является фотосенсибилизатором, используемым для создания синглетного кислорода при воздействии как кислорода, так и света. Он используется в этом отношении для получения органических пероксидов по реакции Дильса-Альдера, которая запрещена по спину при нормальном атмосферном триплетном кислороде.

Сульфидный анализ

Образование метиленового синего после реакции сероводорода с диметил-п-фенилендиамином и железом (III) при рН 0,4-0,7 используют для определения фотометрическими измерениями концентрации сульфида в диапазоне от 0,020 до 1,50 мг / л (от 20 частей на миллиард до 1,5 ЧНМ). Тест очень чувствителен, и синяя окраска, развивающаяся при контакте реагентов с растворенным H2S, стабильна в течение 60 мин. Готовые к применению наборы, такие как сульфидный тест Spectroquant , облегчают рутинные анализы. Тест на сульфид метиленового синего является удобным методом, часто используемым в почвенной микробиологии для быстрого обнаружения в воде метаболической активности сульфатредуцирующих бактерий (SRB). Следует отметить, что в этом тесте метиленовый синий является продуктом реакции, а не реагентом. Добавление сильного восстановителя, такого как аскорбиновая кислота, к сульфидсодержащему раствору, иногда используется для предотвращения окисления сульфида из атмосферного кислорода. Хотя это, безусловно, является хорошей мерой предосторожности для определения сульфида с ионоселективным электродом, однако это может препятствовать развитию синего цвета, если свежеобразованный метиленовый синий также будет восстановлен, как описано выше в абзаце о окислительно-восстановительном индикаторе.

Водное тестирование

Цветная реакция в подкисленном водном растворе метиленового синего, содержащего хлороформ, может обнаруживать анионные поверхностно-активные вещества в образце воды. Такой тест известен как анализ MBAS (анализ активных веществ метиленового синего). Однако анализ MBAS не может отличить конкретные поверхностно-активные вещества. Некоторыми примерами анионных поверхностно-активных веществ являются карбоксилаты, фосфаты, сульфаты и сульфонаты.

Значение метиленового синего в мелком заполнителе

Значение метиленовое синего отражает количество глинистых минералов в совокупных образцах. Раствор метиленового синего последовательно добавляют к мелкому заполнителю, который перемешивается в воде. Присутствие свободного раствора красителя можно проверить с помощью теста пятен на фильтровальной бумаге.

Биологическое окрашивание и т. д.

В биологии, метиленовый синий используется в качестве красителя для ряда различных процедур окрашивания, таких как пятно Райт и краситель Дженнера. Так как это временный метод окрашивания, метиленовый синий можно также использовать для исследования РНК или ДНК под микроскопом или в геле: например, раствор метиленового синего можно использовать для окрашивания РНК на гибридизационных мембранах в северном блоттинге для проверки количества присутствующей нуклеиновой кислоты. Хотя метиленовый синий не так чувствителен, как бромид этидия, он менее токсичен и не интеркалирует в цепи нуклеиновых кислот, что позволяет избежать интерференции с удержанием нуклеиновых кислот на гибридизационных мембранах или с самим процессом гибридизации. Его также можно использовать в качестве индикатора того, живы ли эукариотические клетки, такие как дрожжи. Метиленовый синий восстанавливается в жизнеспособных клетках, оставляя их неокрашенными. Однако, мертвые клетки неспособны уменьшить окисленный метиленовый синий, и клетки окрашиваются в синий цвет. Метиленовый синий может мешать дыханию дрожжей, так как он собирает ионы водорода, полученные в процессе.

Аквакультура

История

Метиленовый синий был описан как «первый полностью синтетический препарат, используемый в медицине». Метиленовый синий был впервые подготовлен в 1876 году немецким химиком Хайнрихом Каро. Его использование при лечении малярии было впервые применено Полом Гуттманом и Полом Эрлихом в 1891 году. В течение этого периода до первой мировой войны такие исследователи, как Эрлих, считали, что эти лекарства и красители работали аналогично, преимущественно окрашивая патогены и, возможно, нанося им вред. Метиленовый синий продолжал использоваться во время второй мировой войны, причем солдаты его недолюбливали: «Даже в туалете, когда мы мочимся и видим темно-синюю мочу, это не очень приятно». Недавно было возобновлено противомалярийное применение этого препарата. В 1933 году Матильда Брукс обнаружила, что метиленовый синий является противоядием от отравления угарным газом и отравления цианидом. Голубая моча использовалась для контроля соблюдения нормативных режимов приема лекарств у психических пациентов. Это вызвало интерес – с 1890-х годов по сегодняшний день – к антидепрессивным и другим психотропным эффектам препаратам. Метиленовый синий стал ведущим соединением в исследованиях, ведущих к открытию хлорпромазина.

Наименования

Исследование

Малярия

Метилен Синий был идентифицирован Полом Эрлихом приблизительно в 1891 как возможное средство для лечения малярии. Он перестал использоваться против малярии во время Тихоокеанской войны в тропиках, так как американские и союзные солдаты не любили его за два видных, но обратимых побочных эффекта: образование синей мочи и становление белка глаза синим. Интерес к его применению в качестве противомалярийного препарата был недавно возобновлен, особенно из-за его низкой цены. В настоящее время проводится несколько клинических испытаний, в которых делаются попытки найти подходящую комбинацию лекарственных средств. Согласно исследованиям, проведенным среди детей в Африке, этот препарат, по-видимому, обладает эффективностью против малярии, но попытки сочетать метиленовую синь с хлорохином были разочаровывающими.

Болезнь Альцгеймера

Метионин изучался для лечения деменции Альцгеймера . Предполагается, что метиленовый синий влияет на нейродегенерацию при болезни Альцгеймера путем ингибирования агрегации белков тау. Метиленовый синий также влияет на диссоциацию амилоидов. TauRx Therapeutics переформулировали препарат под торговой маркой LMTX. Эта формулировка проходит клинические испытания фазы 3 для безопасности и эффективности как «TRx0237». LMTX решает некоторые из проблем, связанных с дозозависимостью, которые были подняты ранее в исследовании.

Биполярное расстройство

Метиленовый синий изучался как вспомогательное средство при лечении биполярного расстройства. Изучалась саркома Капоши, связанная со СПИДом, вирус Западного Нила и инактивирование золотистого стафилококка и ВИЧ-1. Более 70 лет известно, что фенотиазиновые красители и свет обладают вирулицидными свойствами.

Метиленовый синий как нейропротектор

Травматическая черепно-мозговая травма (ЧМТ) приводит к постоянным неврологическим нарушениям, а метиленовый синий (MС) оказывает нейропротективное действие центральной нервной системы. Однако только одно предыдущее исследование изучало эффективность МС в контролируемой кортикальной модели травматического повреждения ЧМТ. Кроме того, еще предстоит выяснить конкретные механизмы, лежащие в основе действия МС против ЧМТ. В одном из исследований выяснялось нейропротекторное действие МС на ЧМТ и возможные механизмы такого действия. В мышиной модели ЧМТ животных произвольно делили на фиктивную, плацебо (нормальный солевой раствор) или МС-группы. Длительность лечения составила 24 и 72 часа (острая фаза ЧМТ) и 14 дней (хроническая фаза ЧМТ) после ЧМТ. Во время острой фазы определяли содержание воды в мозге (BWC), уровни гибели нейронов и аутофагии, а во всех временных точках оценивали неврологический дефицит, объем травмы и активацию микроглии. Поврежденное полушарие BWC было значительно увеличено через 24 ч после ЧМТ, и было ослаблено после лечения MС. Наблюдалось значительно большее количество выживших нейронов в группе MС, по сравнению с группой плацебо через 24 и 72 ч после ЧМТ. В острой фазе, животные, обработанные МС, демонстрировали значительно повышенную экспрессию отношения Beclin 1 и повышенные показатели LC3-II к LC3-I по сравнению с группой плацебо, что указывает на увеличение скорости аутофагии. Неврологические функциональные дефициты, измеренные с использованием модифицированного неврологического показателя тяжести, были значительно ниже в острой фазе у животных, получавших МС, и объемы поражения головного мозга у животных, получавших МС, были значительно ниже по сравнению с другими группами во все временные точки. Микроглия активировалась через 24 ч после ЧМТ, достигала максимума через 72 ч и сохранялась до 14 дней после ЧМТ. Хотя количество Iba-1-позитивных клеток в плацебо и MС-группах через 24 ч после ЧМТ не были существенно различными, отмеченное ингибирование микроглии наблюдалось в группе MС через 72 ч и 14 дней после ЧМТ. Эти результаты показали, что МС оказывает нейропротекторное действие за счет увеличения аутофагии, уменьшения отека мозга и ингибирования активации микроглии. В другом исследовании были рассмотрены взаимоотношения структура-активность MС in vitro с использованием MС и шести структурно связанных соединений. MС уменьшает образование митохондриального супероксида за счет альтернативного переноса электрона, минуя митохондриальные комплексы I-III. MС уменьшает образование реактивных свободных радикалов и обеспечивает нейропротекцию в клетках HT-22 против глутамата, IAA и токсичности ротенона. В частности, МС не обеспечивает защиту от прямого окислительного стресса, вызванного глюкозооксидазой. Замена боковой цепи на 10-азоте МС приводила к 1000-кратному снижению защитной способности против нейротоксичности глутамата. Соединения без боковых цепей в положениях 3 и 7, хлорфенотиазин и фенотиазин, имеют четкие окислительно-восстановительные потенциалы по сравнению с МС и не способны усиливать перенос митохондрий, в то же время получают прямые антиоксидантные действия против глутамата, IAA и ротеноновых действий. Хлорофенотиазин проявлял прямое антиоксидантное действие в анализе лизата митохондрий по сравнению с МС, что требовало восстановления при помощи NADH и митохондрий. МС повышал сложную внутривенную экспрессию и активность, в то время как 2-хлорофенотиазин не оказывал никакого эффекта. Исследование показало, что МС может ослаблять продуцирование супероксида, функционируя как альтернативный носитель переноса митохондрий и как регенерируемый антиоксидант в митохондриях.

Ядерные и митохондриальные нарушения при прогерии

Прогерия, или фатальная преждевременная старость, вызвана мутацией одного нуклеотида в гене LMNA. Предыдущие доклады были посвящены ядерным фенотипам в клетках HGPS, однако потенциальный вклад митохондрий, ключевого игрока в нормальном старении, остается неясным. Используя микроскопический анализ с высоким разрешением, была продемонстрирована значительно увеличенная доля набухших и фрагментированных митохондрий и заметное снижение подвижности митохондрий в фибробластных клетках HGPS. Примечательно, что экспрессия PGC-1α, центрального регулятора биогенеза митохондрий, ингибировалась прогерином. Чтобы спасти митохондриальные дефекты, клетки HGPS были обработаны митохондриальным антиоксидантным метиленовым синим (MС). Анализ показал, что МС не только уменьшил митохондриальные дефекты, но также помог выявить ядерные аномалии в клетках HGPS. Дополнительный анализ показал, что обработка МС высвобождает прогерин из ядерной мембраны, восстанавливает потерю перинуклеарных гетерохроматинов и корректирует экспрессию нерегулируемого гена в клетках HGPS. Вместе эти результаты демонстрируют роль митохондриальной дисфункции в развитии фенотипов преждевременного старения в клетках HGPS и предлагают МС в качестве перспективного терапевтического подхода к HGPS.

Клеточные и молекулярные действия метиленового синего в нервной системе

Недавние исследования показывают, что МС оказывает благотворное влияние при болезни Альцгеймера и улучшает память. Хотя модуляция пути cGMP считается наиболее значительным эффектом MС, опосредующим его фармакологические действия, недавние исследования показывают, что он имеет несколько клеточных и молекулярных мишеней. В большинстве случаев, биологические эффекты и клиническое применение МС диктуются его уникальными физико-химическими свойствами, включая его планарную структуру, окислительно-восстановительную химию, ионные заряды и характеристики спектра света.

:Tags

Список использованной литературы:

Hamilton, Richart (2015). Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2015 Deluxe Lab-Coat Edition. Jones & Bartlett Learning. p. 471. ISBN 9781284057560

Ahmad, Iqbal; Aqil, Farrukh (2008). New Strategies Combating Bacterial Infection. John Wiley & Sons. p. 91. ISBN 9783527622948.

Salah M.; Samy N.; Fadel M. (January 2009). «Methylene blue mediated photodynamic therapy for resistant plaque psoriasis». J. Drugs Dermatol. 8 (1): 42–9. PMID 19180895

Метиленовый синий (синька метиленовая) — это известный водный голубой индикатор, который был разработан в конце 19 века. На сегодня вещество широко применяется в медицине, легкой промышленности в качестве красителя для тканей, в химии в роли индикатора и пр. Препарат относят к антисептической группе, он оказывает обеззараживающее и болеутоляющие воздействие. Метиленовый синий назначают при обработке ран, ожогов, используют в качестве дополнительного средства при лечении гнойно-воспалительных процессов. Также практикуется применение лекарства при отравлениях, в роли противоядного средства. Его назначают не только взрослым, но и детям.

Показания к применению

По инструкции, медикамент прописывают при таких недугах:

• Ожоги, раны, афтозные поражения слизистой
• Герпес, сикоз, пиодермия.
• Метгемоглобинемия.
• Воспалительные процессы при цистите, уретрите и пр.

Более того, Метиленовый синий назначают при острой интоксикации нитратами, синильной кислоты и пр. Он оказывает отличный противоядевый эффект и быстро помогает восстановиться организму. Часто используют раствор Метиленового синего для диагностирования почечной недостаточности. В определенных случаях препарат назначают при стоматите.

Состав препарата

Спиртовой раствор состоит из индикатора Метиленового синего и спирта.

Раствор для внутреннего введения в качестве основного компонента включает Метиленовый синий, дополнительным веществом выступает глюкоза.

Водный раствор включает Метиленовый синий и очищенную воду.

Лечебные свойства

Основное вещество медикамента проявляет обеззараживающую и обезболивающую активность, оказывает прекрасное антибактериальное воздействие. Также поставляет в организм человека водородные ионы. Воздействие данного препарата основано на создании соединения с белками и мукополисахаридами клеток бактерий, такой процесс воздействует губительно на многие микроорганизмы. При использовании местно, не проникает в кровь.

Формы выпуска

Средняя цена: 100 руб

Метиленовый синий производится в виде порошка, водного раствора, раствора на спирту и раствора в ампулах.

Порошок имеет вид мелких кристаллов, темно-синего цвета, с бронзовым оттенком. Отпускается в упаковке по 10 г.

Раствор изготовлен на основе 1% спирта. Прозрачный, темно-синего цвета, с запахом спирта. Продается во флаконах из стекла по 10 или 15 мл.

Водный раствор голобуго цвета, не имеет запаха. Предлагается в стеклянных флаконах по 10, 25, 50 и 100 мл, размещенных в пачке из картона.

Смесь для внутреннего введения, представлен 1% раствором Метиленового синего и 25% глюкозой. Производится в ампулах по 20 и 50 мл.

Способ применения

Для обработки ран, ожогов препарат используют в виде раствора на спирту, аккуратно наносится на пораженные места при помощи ватного тампона. Перед использованием лекарства пораженные участи необходимо предварительно очистить.

При промываниях, которые проводят при цистите или уретрите, назначают Метиленовый синий водный раствор. По рецепту соотношения раствора должно соответствовать 1:5000. Процедуры проводят 1-2 раза в день, их длительность определяет врач.

Внутреннее применение синьки метиленовой для взрослых – 0,1 г 3-4 раза в сутки. Для детей доза рассчитывается исходя из возраста ребенка, примерная дозировка 0,005-0,01г на 1 год.

Отравления, вызванные цианидами или сероводородом, требуют использования препарата внутривенно. Для этого прописывают 50-100мл 1% водного раствора или 1% раствора с 25% глюкозы. При интоксикации нитратами или анилином дозировка должна не превышать 0,1-0,15 мл/кг 1% раствора.

Во время лечения стоматита практикуют водный раствор синьки. Поскольку раствор на спирту может навредить слизистой, вызвать ожоги, а у детей отравление. При стоматите ватным тампоном обрабатывают все язвочки и раны. Процедуру проводят 3 раза в день, после каждого приема пищи.

Беременность и грудное вскармливание

По инструкции, Метиленовый синий беременным использовать необходимо с особой осторожности и только под тщательным присмотром врача, поскольку его воздействие при вынашивании ребенка полностью не изучено. При грудном кормлении вопрос использования средства также следует обсудить со специалистом.

Противопоказания

Применение препарата запрещено при таких показаниях:

• Непереносимость к составляющим медикамента
• Дети до 1 года.

Также запрещается применять средство для обработки слизистых.

Меры предосторожности

Нельзя вводить лекарство подкожно и под оболочку головного мозга.

Внутривенно вводят очень медленно и с особой осторожностью.

Побочные эффекты

Метиленовый синий может спровоцировать развитие некоторых нежелательных реакций, чаще всего из них можно наблюдать:

• Тошнота и рвоты
• Болезненность в области живота
• Развитие анемии
• Травмирование тканей мочевого пузыря и почек

При нанесении на кожные покровы возможно развитие аллергии, которая проявляется высыпаниями, покраснением, зудом и пр.

Условия и срок хранения

Сохранять медикамент нужно в затемненном месте при комнатном температурном режиме, оберегая от детей. Срок годности 2 года.

Аналоги

Антисепт

Прикарпатская ФК, Украина

Цена от 150 до 200 рублей.

Антисепт – местное антисептическое средство, в состав которого входит этиловый спирт и очищенная вода. Используется для дезинфекции кожи, при небольших ранах, порезах, царапинах и пр. Наносится на поврежденные места с помощью салфеток или ватных тампонов.

Плюсы:

• Хороший дезинфицирующий эффект
• Приемлемая стоимость.

Минусы:

• При нанесении вызывает кратковременное жжение
• При больших дозах могут проявляться побочные реакции.

Бонадерм

Новозед, Россия

Цена от 400 до 850 рублей

Бонадерм — препарат, с антисептической активностью. Описание данного средства, гласит, что чаще всего его используют для дезинфекции рук перед хирургическим вмешательством, контактом с инфекционными больными, для обработки медицинских инструментов, при операциях, грибке ног.

Плюсы:

• Отличное обеззараживающее и антимикробное воздействие
• Не раздражает кожу.

Минусы:

• Хранение только в плотно закрытой емкости
• Немалая цена.

Для изучения микроорганизмов производят микроскопирование как живых, так и убитых микробов в неокрашенном и окрашенном виде.

Микроскопический препарат готовят на предметном стекле. Предметные стекла должны быть кристально чисты и абсолютно обезжирены. На поверхности обезжиренного стекла вода легко расплывается и не образует капель шаровидной формы .

Дочерние и родовые шрамы на поверхности дрожжевых клеток.

Новые стекла перед употреблением кипятят в 1%-ном растворе соды 10 минут, промывают водой, слабой соляной кислотой и хорошо прополаскивают в дистиллированной воде.

Стекла после исследования надо обработать раствором серной кислоты в течение 2 часов, хорошо промыть в воде и прокипятить 10 минут в 4%-ном растворе соды. Ополоснутые затем дистиллированной водой стекла протирают чистой полотняной тканью.

Хранить предметные стекла лучше всего в банке с притертой пробкой, погруженными в смесь спирта с эфиром, взятых в равных объемах. Из банки предметные стекла достают пинцетом.

Покровные стекла - тонкие стеклышки (толщиной 0,15-0,17 мм) размерами обычно 18х18 мм, 20х20 мм, 18х24 мм. Ими накрывают препарат на предметном стекле для изучения.

Как приготовить раствор метиленового синего

Физиологический раствор натрия хлорида с метиленовым синим: метиленовый синий 0,1 г; физиологический раствор натрия хлорида -100,0 мл. Отвешивают указанное выше количество метиленового синего и помещают его в чистую бутылку. Прибавляют физиологический раствор натрия хлорида и тщательно перемешивают до полного растворения кристаллов краски. Для работы фильтруют небольшое количество раствора краски в капельницу.

Техника приготовления краски из сухого порошка. Некоторое количество порошка малахитового зеленого или метиленового синего растирают пестиком в чистой сухой ступке. Отвешивают 3 г порошка краски, насыпают его в бутылку и прибавляют дистиллированную воду, чтобы получилось 100 мл раствора. Для приготовления рабочего раствора наливают 1 мл одного из полученных выше 3%-х водных растворов краски в бутылочку емкостью 250 мл. Прибавляют 100 мл глицерина и 100 мл дистиллированной воды; перед использованием раствор тщательно перемешивают.

Где взять метиленовый синий?

Коврик, скальпель, метиленовый синий.

Если у вас домашний микроскоп, возникает вопрос, где брать препараты?

Всё очень просто: этот препарат продаётся в магазинах, он используется в аквариумистике. Смотрите на фото. Также для приготовления препаратов для микроскопа пригодится скальпель и коврик для резки (безопасный, вы не будете царапать под ним стол, он самовосстанавливающийся).

На фото - коврик для резки , скальпель и бутылочка метиленового синего . Всё приобретено в самом обычном (не специализированном) интернет-магазине.

Исследование микроорганизмов в живом виде

Плесневые грибы и дрожжи лучше рассматривать в живом виде в препарате «раздавленная капля». Клетки этих микроорганизмов относительно крупные, обычно при микроскопировании в живом виде хорошо выявляются их форма, размеры, детали внутреннего строения, характер размножения (почкование, деление, спорообразование и т.д.).

Бактерии чаще рассматривают в мертвом виде на фиксированных окрашенных препаратах (из-за их малого размера). При этом мы получаем более ясное представление о форме и размерах клеток, о способности их к спорообразованию.

В живом виде в «раздавленной капле» бактерии рассматривают в том случае, когда выясняют их способность к движению.

При микроскопировании дрожжей в каплю жидкости на стекле добавляют петлей небольшое количество метиленовой сини (до голубого окрашивания) и эту смесь тщательно размешивают. Окраска живых дрожжей метиленовой синью применяется для того, чтобы выявить мертвые клетки, легко окрашивающиеся в синий цвет. Живые клетки остаются неокрашенными, так как не пропускают краску через свою оболочку.

Приготовленный на предметном стекле препарат дрожжей накрывают покровным стеклом и рассматривают с объективом 40Х. В таком препарате обычно хорошо видны прозрачные овальные или круглые клетки дрожжей с ядрами и оболочками, которые хорошо заметны в клетках живых дрожжей. Мертвые клетки, как правило, более мелкие по сравнению с живыми и окрашены в синий цвет.

Окраска дрожжей метиленовым синим

Наибольшее распространение получил метод выявления мертвых клеток с помощью метиленового синего. После попадания в клеточную цитоплазму под действием ферментов редуктаз этот краситель восстанавливается живыми дрожжевыми клетками до бесцветных соединений. Мертвые клетки окрашиваются в синий цвет. Эффективность данного метода зависит не только от состояния клеточной мембраны, но и от активности оксидоредуктаз в клетке.

Окраска клеток метиленовым синим и сафранином

Более полную информацию о физиологическом состоянии дрожжей дает окрашивание фиксированных препаратов метиленовым синим, танином и сафранином. Сафранин применяется для выявления клеточных ядер, которые окрашиваются в красный цвет. Если клетки живые и содержат оксидоредуктазы, расщепляющие метиленовый синий, то окрашенный препарат приобретает красноватый, а не фиолетовой оттенок.

Реактивы: краситель метиленовый синий; краситель сафранин; 5 %-й раствор танина в воде; физиологический раствор (0,9 %-й раствор NaCl).

Нанести каплю суспензии дрожжей на обезжиренное мылом предметное стекло. Оставить высыхать на воздухе при комнатной температуре. После высыхания капли зафиксировать препарат (10 раз провести стеклом в пламени спиртовки). Нагревать несильно, не пережигать. Залить стекло раствором метиленового синего и выдержать в течение 4 минут при комнатной температуре. Смыть краситель теплой водой. Залить стекло свежеприготовленным раствором танина на 2 минуты. Смыть краситель под струей воды. Залить на 16 минут стекло раствором сафронина. Смыть краситель. Микроскопирование следует проводить нефлюоресцирующим маслом при увеличении 400х.

Препарат живых бактерий

Препарат живых бактерий готовится подобно препарату дрожжей, но бактерии можно рассматривать и без добавления краски . Препарат рассматривается с иммерсионным объективом 90 X, лучше всего в затемненном поле (т.е. с прикрытой диафрагмой). Если культура бактерий подвижная, то хорошо видны быстрые разнохарактерные движения отдельных клеток.

Морфология голодных и старых клеток (фотоувеличение 400х).

Для приготовления препарата плесневых грибов очень осторожно (чтобы не разрушить органов спороношения) специальной иглой (можно препаровальной) или ботаническим пинцетом снимают кусочек пленки гриба и переносят его в каплю воды, предварительно нанесенную на предметное стекло. Препарат осторожно, слегка придавливая, накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом с объективом 8Х. При этом увеличении хорошо различается строение органов спороношения плесневых грибов. Для подробного изучения отдельных деталей строения (гиф, сумок и т.д.) препарат рассматривают с объективом 40X.

При приготовлении препаратов в раздавленной капле нужно помнить:

1. При опускании покровного стекла на каплю следует прикоснуться его ребром к краю капли и, постепенно наклоняя, опустить стекло.

2. Капля не должна быть большой, чтобы жидкость не переливалась за края и не попадала на верхнюю сторону покровного стекла. Избыток воды снимите фильтровальной бумагой.

3. Одиночные пузырьки воздуха, оставшиеся под покровным стеклом, обычно не мешают наблюдению. Но если их много, препарат лучше приготовить заново.

4. Препарат не должен быть слишком густым, чтобы микроорганизмы не заслоняли друг друга.

5. Приготовленные препараты рассматривают тут же после приготовления (особенно живых бактерий), так как в иначе вода высыхает и клетки бактерий теряют подвижность.

6. Бактериологическую петлю (или иглу) перед каждым очередным пассажем и после него (нанесение капли воды на стекло, снятие культуры с агара и ее размешивание, взятие краски и т.д.) следует обязательно докрасна прокаливать в пламени горелки. После прокаливания петлю быстро охлаждают на воздухе (держат 2-3 секунды, ни к чему не прикасаясь) и приступают к выполнению очередного этапа работы.

Морфологическая модель клетки.

Простая окраска препаратов

При простой окраске препаратов на фиксированный мазок наливают несколько капель какого-либо красящего раствора (метиленового синего, разведенного фуксина и прочее). Для получения более чистых препаратов рекомендуется красящий раствор наливать на отрезок фильтровальной бумаги, которой покрывают мазок.

Раствор краски в среднем выдерживают на мазке 2-3 минуты (в зависимости от вида краски):

• Фуксин красит интенсивно, причем окрашиваются одинаково хорошо все виды бактерий. Продолжительность окрашивания раствором фуксина вполне достаточна на протяжении 1-2 минут.
• Щелочную метиленовую синь оставляют для окрашивания мазка на 2-3 минуты. Она красит менее сильно, но препарат получается более изящный, к тому же различные бактерии приобретают окраску различной интенсивности. При окраске метиленовой синью у крупных клеток (например, дрожжевых) дифференцируется ядро и цитоплазма.
• Раствор генцианвиолета держат для окраски 3-5 минуты.

Виды красителей для приготовления образцов для микроскопа

Окраска клеток дрожжей иодонитротетразолиум хлоридом.

Красители в микробиологии являются солями двух типов: 1) кислые красители – у которых ион, придающий окраску (хромофор), является анионом (пример - эозин); 2) основные красители – те, у которых роль хромофора играет катион (пример - метиленовый синий).

Кислые красители являются кислыми потому, что хромофор, будучи кислотой, при образовании придающей окраску соли, связывается с основанием (NaOH).

Красители второго типа называются основными потому, что хромофор, будучи основанием, при образовании соли связывается с кислотой (HCl).

Обычно кислые красители связываются более интенсивно с цитоплазменными (основными) компонентами клетки, а основные – с ядерными (кислыми).

Методы окрашивания основаны либо на микроскопировании в видимом (обычном) свете, либо на флуоресцентной микроскопии. Красителями для светового микроскопа являются метиленовый синий, раствор Люголяи др. Из флуоресцентных красителей применяют магниевую соль 1-анилино-8-нафтален сульфоновой кислоты (Mg-ANS), а также дигидрородамин.

Окраска клеток дигидрородамином в зеленом и красном спектре.